免疫共沉淀(Co-IP)實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)材料:蛋白質(zhì)試劑、試劑盒:RIPA Buffer PBS Protein A agarose 瓊脂糖 還有考馬斯亮藍(lán)染色液
儀器連日來、耗材: 離心機(jī) 搖床 EP管 細(xì)胞刮子 離心管 培養(yǎng)板 電泳儀 電泳槽 高效液相色譜儀
免疫共沉淀(Co-IP)實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)步驟
一互動互補、試劑準(zhǔn)備
1.預(yù)冷PBS,RIPA Buffer意向,細(xì)胞刮子(用保鮮膜包好后意料之外,埋冰下),離心機(jī)形式。
2.用預(yù)冷的PBS洗滌兩次細(xì)胞置之不顧,zui終一次吸干PBS。
3.加入預(yù)冷的RIPA Buffer(1 ml/107個(gè)細(xì)胞數字化、10 cm培養(yǎng)皿或150 cm2培養(yǎng)瓶方便,0.5 ml/5×106個(gè)細(xì)胞、6 cm培養(yǎng)皿各領域、75 cm2培養(yǎng)瓶)應用領域。
4.用預(yù)冷的細(xì)胞刮子將細(xì)胞從培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶上刮下,把懸液轉(zhuǎn)到1.5EP管中進行培訓,4℃發展機遇,緩慢晃動(dòng)15 min(EP管插冰上,置水平搖床上)法治力量。
免疫共沉淀(Co-IP)實(shí)驗(yàn)
其原理是:當(dāng)細(xì)胞在不是變性條件下被裂解時(shí)全技術方案,完整細(xì)胞內(nèi)存在的很多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用被保存了下來(lái)分享。比如用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X,那么與X在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來(lái)信息化。目前多用精制的proreinA預(yù)先結(jié)合固化在argarose的beads上方式之一,使之與含有抗原的溶液及抗體反應(yīng)后,beads上的proreinA就能吸附抗原達(dá)到精制的目的新型儲能。這種方法常用于測(cè)定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合創新能力;也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。
上海劍鈍生物技術(shù)有限公司成立于2005年一站式服務,公司位于上海長(zhǎng)江軟件園發展需要,實(shí)驗(yàn)室面積600多平方米。公司目前具備*的生物學(xué)管理、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)顯示,能夠?yàn)閺V大客戶(hù)提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究效率和安、開(kāi)發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)設計能力。 我們擁有專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員深入開展。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士后)2人更為一致,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人技術的開發,主要致力于基因組學(xué)研究與應用、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)更高效、代謝組學(xué)全面協議、生物化學(xué)、病理檢測(cè)具體而言、基因檢測(cè)等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣工具。通過(guò)高度細(xì)分、*的服務(wù)平臺(tái)喜愛,為廣大客戶(hù)提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)重要的角色。目前,協(xié)助發(fā)表的SCI及國(guó)家核心期刊上的學(xué)術(shù)論文達(dá)兩千余篇向好態勢,涉及臨床醫(yī)學(xué)平臺建設、腫瘤生物學(xué)、免疫學(xué)貢獻力量、細(xì)胞生物學(xué)使用、分子生物學(xué)等生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域。
更為可喜的是優化程度,公司于2015年投資建立了1800平方米的動(dòng)物中心積極性,能夠?yàn)閺V大客戶(hù)提供更為專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)及造模服務(wù)奮勇向前。
時(shí)光荏苒不斷豐富,通過(guò)全體員工的共同努力,公司*具備從上游的高通量篩選到下游特定基因功能解析的完善整合技術(shù)平臺(tái)規劃,能夠真正為客戶(hù)提供專(zhuān)業(yè)擴大公共數據、完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。