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質(zhì)譜是怎么做到定量分析的應用創新?

閱讀:437      發(fā)布時(shí)間:2022-10-11
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質(zhì)譜的定量和紫外檢測(cè)器的特性,蒸發(fā)光檢測(cè)器沒(méi)什么本質(zhì)區(qū)別交流,只不過(guò)質(zhì)譜的線性范圍比較令人抓狂而已。當(dāng)然還有一系列的問(wèn)題,比如說(shuō)特別是很多生物分析的樣品還不大,你稀釋十倍之后很可能質(zhì)譜信號(hào)的強(qiáng)度不會(huì)下降十倍高產。1ppm對(duì)應(yīng)的離子計(jì)數(shù)為一萬(wàn),0.1ppm對(duì)應(yīng)的離子計(jì)數(shù)不是一千而很可能是五千三千發揮作用。


質(zhì)譜信號(hào)強(qiáng)度與待分析物含量的關(guān)系


任何定量分析方法都需要建立實(shí)驗(yàn)測(cè)量信號(hào)與待分析物的量的關(guān)系良好。很幸運(yùn)的是,在質(zhì)譜中發揮,通常也可以建立這樣的關(guān)系顯著,因此質(zhì)譜信號(hào)是可以用于定量的。從題主的說(shuō)明來(lái)看開放以來,Ta的疑惑主要在這里占。既然問(wèn)題是“質(zhì)譜是怎樣做到定量的?"提供了有力支撐,我們不妨把質(zhì)譜信號(hào)的產(chǎn)生按時(shí)間順序粗略分為三個(gè)步驟激發創作,即離子的產(chǎn)生,傳輸與檢測(cè)進一步意見。


1. 產(chǎn)生離子時(shí)增幅最大,不同樣品分子的電離通常是相互獨(dú)立的。因此樣品量越多的必然要求,其產(chǎn)生的離子也就越多研究成果。目前常用的各種離子化方法(EI、ICP完善好、ESI大面積、MALDI等)在實(shí)驗(yàn)中(嚴(yán)格來(lái)說(shuō)僅在一定濃度范圍內(nèi)——術(shù)語(yǔ)是動(dòng)態(tài)范圍,dynamic range)都至少滿足樣品量與產(chǎn)生離子量的正相關(guān)問題分析,一般情況下也可以進(jìn)一步近似成線性相關(guān)培養。


2. 傳輸離子時(shí),簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)可以認(rèn)為傳輸效率與被傳輸離子的量無(wú)關(guān)更加完善;(嚴(yán)格地說(shuō)形式,被傳輸?shù)碾x子太多時(shí),相同電荷的互相排斥會(huì)造成離子束的“體積"變大支撐作用,導(dǎo)致傳輸效率下降日漸深入。這種影響在空間有限的離子阱中表現(xiàn)得更加明顯,因此在離子阱質(zhì)譜中一個(gè)重要的技術(shù)就是適當(dāng)控制進(jìn)入儀器的離子數(shù)量同時,使其既不太少也不太多互動式宣講。)


3. 檢測(cè)離子時(shí),不論是使用光電倍增管的檢測(cè)器模式,還是檢測(cè)鏡像電流的檢測(cè)器(ICR/Oribtrap)自動化,其信號(hào)強(qiáng)度(在一定范圍內(nèi))均與離子數(shù)量大致線性相關(guān)提升。


廢話幾句,可能會(huì)使題主感覺(jué)質(zhì)譜不能定量的原因之一是不折不扣,我們看到的質(zhì)譜圖常用相對(duì)強(qiáng)度作為縱坐標(biāo)意料之外,即0-100%強(qiáng)峰,而不展示信號(hào)的絕對(duì)強(qiáng)度形式。但在做質(zhì)譜的時(shí)候置之不顧,儀器記錄的當(dāng)然是絕對(duì)強(qiáng)度(相對(duì)強(qiáng)度也是通過(guò)絕對(duì)強(qiáng)度換算出來(lái)的)。我們需要用絕對(duì)強(qiáng)度來(lái)定量時(shí)進一步提升,就需要這部分平時(shí)不晨臻g廣闊?吹男畔⒘恕?/span>


另外改革創新,在談到色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法時(shí)知識和技能,待分析物與實(shí)驗(yàn)測(cè)量信號(hào)的關(guān)系之中又多了一層色譜,即待分析物含量->色譜流出物中樣品含量->質(zhì)譜信號(hào)新模式。與EI譜圖分析以相對(duì)強(qiáng)度為主不同實現,在色譜-質(zhì)譜聯(lián)用時(shí),信號(hào)的絕對(duì)強(qiáng)度就成了我們天天都要關(guān)心的內(nèi)容組織了,因?yàn)橘|(zhì)譜信號(hào)強(qiáng)度隨時(shí)間的變化就是實(shí)驗(yàn)的色譜圖服務體系,通常以總離子強(qiáng)度或者某一特定質(zhì)荷比離子的強(qiáng)度作圖。


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