氨基酸的存在形態(tài)
氨基酸在生物體中主要有兩種形態(tài)存在:一種是游離氨基酸橋梁作用,以游離態(tài)存在的單個(gè)氨基酸分子長遠所需,可被直接吸收利用;另一種是水解氨基酸求得平衡,需要將待檢產(chǎn)品中的蛋白質(zhì)紮實做、多肽等氨基酸鏈水解成單個(gè)氨基酸,因此至關重要,水解氨基酸反映的是產(chǎn)品中所有氨基酸單位(單個(gè)或多個(gè))的組成提供深度撮合服務。
水解氨基酸的前處理方法
確定蛋白質(zhì)的氨基酸組成需要兩個(gè)步驟:
第一步水解,即將蛋白質(zhì)肽鍵打開(kāi)的發生,釋放出單個(gè)氨基酸組成部分,然后進(jìn)行回收。分析樣品的多樣性造成了樣品前處理的復(fù)雜性新的動力。有研究顯示的過程中,水解的不合理是影響氨基酸分析正確性的首要原因。
第二步分析廣泛關註,即利用色譜技術(shù)對(duì)水解產(chǎn)物進(jìn)行定性和定量分析促進進步,以確定氨基酸的種類及其含量。
由于氨基酸回收的復(fù)雜性優勢領先,需要針對(duì)不同類型的氨基酸來(lái)選擇適合的水解方法迎來新的篇章,主要有酸水解、氧化水解推動並實現、堿水解薄弱點、和酶水解。以下針對(duì)較常用的酸水解進(jìn)行介紹優化程度。
酸水解法
酸水解法是氨基酸分析中較常用的前處理方法形勢, 22種α-氨基酸中大多數(shù)可采用酸水解法,即用6M高純度的鹽酸將蛋白質(zhì)裂解成單個(gè)游離氨基酸取得明顯成效,隨后把殘留的鹽酸蒸發(fā)去除約定管轄。
水解過(guò)程中使用6M HCl進(jìn)行水解22-24小時(shí),水解后的氨基酸需要取1-2ml溶液放在真空離心濃縮儀中濃縮蒸干,加入2ml水后就繼續(xù)濃縮蒸干發揮,重復(fù)兩次上述操作顯著,以保證去除鹽酸。高濃度鹽酸去除時(shí)開放以來,由于鹽酸的強(qiáng)腐蝕性占,常規(guī)的濃縮儀的管路、真空泵提供了有力支撐、腔體等部件容易被腐蝕供給,所以一款真正耐鹽酸的濃縮儀是減少實(shí)驗(yàn)室成本的關(guān)鍵。
耐強(qiáng)酸的溶劑蒸發(fā)工作站
市面上的濃縮設(shè)備有很多種實事求是,但真正能耐受高濃度鹽酸進行探討、硝酸和TFA的設(shè)備卻不多見(jiàn)。Genevac EZ-2 4.0溶劑蒸發(fā)工作站不僅能耐受6M鹽酸服務水平,還能實(shí)現(xiàn)無(wú)人值守最新、自動(dòng)停機(jī)等功能。
Genevac EZ-2 4.0
耐鹽酸的核心:
1處理方法、方便替換的金屬全部由哈氏合金或玻璃替代重要作用;其余均用特氟龍密封工藝處理;
2習慣、離心腔充足、樣品架都通過(guò)PTFE密封工藝進(jìn)行陽(yáng)極氧化處理;
3的積極性、聚四氟乙烯制造的蒸汽截止閥和波紋管綠色化發展;
4、真空出口連接器采用聚丙烯制造十大行動;
5左右、密封圈采用杜邦Kalrez全氟醚橡膠背景下,可耐強(qiáng)酸強(qiáng)堿綜合措施。
其他優(yōu)勢(shì):
● Sample Guard™ 控溫系統(tǒng),防止樣品過(guò)熱自然條件;
● Dri-Pure®防暴沸功能:防止樣品暴沸產(chǎn)生交叉污染設計標準,避免樣品損失;
● 樣品容器兼容性強(qiáng)互動互補、通量高:多種轉(zhuǎn)子可選發揮重要帶動作用;
● Sample Genie樣品轉(zhuǎn)移功能:濃縮后可直接將樣品轉(zhuǎn)移至GC小瓶?jī)?nèi)上機(jī)測(cè)試,無(wú)需二次轉(zhuǎn)移意料之外;
● 無(wú)人值守文化價值,自動(dòng)停機(jī)。
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