移動端
直播推薦
回放
回放
速率區(qū)帶離心法 |你的分離純化方法選對了嗎前沿技術？
密度梯度離心（isodensity centrifugation method）又稱為區(qū)帶離心多種方式。
該方法的優(yōu)點是可以同時使樣品中幾種或全部組分分離，具有良好的分辨率技術創新，分離效果好深入交流研討，可一次獲得較純組分。
缺點是離心時間較長廣泛應用，需制備梯度液關註度，操作要求高。
按照離心分離原理哪些領域，密度梯度離心又可分為速率區(qū)帶離心法(rate zonal centrifugation method敢於挑戰，R-Z)和等密度離心法 (isopycnic centrifugation method)。
速率區(qū)帶離心也可稱為等區(qū)密度離心，是根據(jù)樣品中不同組分粒子所具有的不同的體積大小和不同的沉降系數(shù)將混合樣品進行離心分離提純提供了遵循。
離心時將需要分離的樣品溶液置于由密度梯度材料(如蔗糖參與水平、氯化銫 (CsCI)、溴化鈉等)形成的梯度液柱上面服務效率，樣品粒子的密度必須大于梯度液柱中任一點的密度明確相關要求，否則無法得到理想的區(qū)帶離心效果。離心時統籌發展，混合樣品中不同的組分將在梯度液柱的不同位置分別形成各自的區(qū)帶體製，選擇適合的轉(zhuǎn)速和時間進行離心，當各組分區(qū)帶距離拉得遠時創新科技，結(jié)束離心，然后將區(qū)帶取出覆蓋。這樣只需通過一次離心就可以把混合樣品中的各組分分離提純異常狀況，其純度和回收率均可滿足要求。
優(yōu)點是一次分離純化高效，組分的沉降系數(shù)相差 20% 以上的即可選用此法應用創新，分辨力高，操作熟練可以將組分沉降系數(shù)相差 5%～10% 的樣品很好的分離機構。
缺點是材料的條件限制的特性，樣品液濃度不能太高，否則操作條件很難控制基礎，同時此法與差速離心法相比提供堅實支撐，處理樣品的量要小的多。
圖 1 速率區(qū)帶離心
速率區(qū)帶離心的時間必須嚴格控制高產，不能太短信息化技術，否則樣品區(qū)帶不清，時間也不能太長良好，否則待分離組分可能沉底逐步顯現。需要分離的樣品顆粒的沉降速度取決于顆粒形狀、大小引領、密度及離心力等因素自動化裝置。離心前后樣品的狀態(tài)如圖 1 所示。
速率區(qū)帶離心經(jīng)典的應用就是通過蔗糖密度梯度離心應用前景，進行各種亞細胞器(核糖體有很大提升空間、線粒體、Exosome 等)和病毒顆粒(病毒載體首次、疫苗等)的純化的有效手段。例如，我們在上一期中得到的 70S 核糖體沉淀，經(jīng)過水解后關鍵技術，可利用蔗糖密度梯度離心了解情況，進一步分離純化得到 50S 和 30S 的兩個亞基。具體的實驗流程如下：
離心課堂正在連載技術研究，持續(xù)關注了解更多離心方法重要的！
關注往期離心課堂
□
□
□
□
□
□
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品姿勢，未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉(zhuǎn)載問題分析、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的交流研討，應在授權范圍內(nèi)使用更加完善，并注明“來源：儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者建設應用，本網(wǎng)將追究其相關法律責任支撐作用。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息動力，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責同時，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體效高性、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時模式，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任提升。
- 如涉及作品內(nèi)容高品質、版權等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系支撐能力，否則視為放棄相關權利健康發展。
浙公網(wǎng)安備 33010602002722號
第二十一屆北京分析測試學術報告會暨展覽會(BCEIA 2025)
展會城市：北京市展會時間：2025-09-10