犬胰島素（INS）定量檢測試劑盒（ELISA）：英文名稱：Canine Insulin（INS） ELISA KIT狀態。本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）技術節能。僅供科研使用指導，定量檢測血清、血漿國際要求、細胞培養(yǎng)上清液中犬胰島素（INS）的濃度流動性。

僅供科研使用，不得用于臨床檢驗競爭激烈。

犬胰島素(INS)定量檢測試劑盒（ELISA）說明書

【產品名稱】

通用名稱：犬胰島素(INS)定量檢測試劑盒（ELISA）

英文名稱：Canine Insulin（INS） ELISA KIT

【包裝規(guī)格】

48人份/盒持續創新，96人份/盒

【預期用途】

僅供科研使用，定量檢測血清空白區、血漿協調機製、細胞培養(yǎng)上清液中犬胰島素(INS)的濃度。

【檢驗原理】

犬胰島素(INS)定量檢測試劑盒（ELISA）采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）形勢。在預包被抗犬胰島素(INS)抗體（固相抗體）的微孔酶標板中向好態勢，加入犬胰島素(INS)校準品和待測樣本，再加入另一株HRP標記的抗犬胰島素(INS)抗體（酶標抗體）服務機製，經過溫育與充分洗滌貢獻力量，去除未結合的組分，在微孔板固相表面形成固相抗體-抗原-酶標抗體的夾心復合物大幅拓展。加底物A和B覆蓋範圍，底物在HRP催化下，產生藍色產物積極性，在終止液（2M 硫酸）作用下奮勇向前，zui終轉化為黃色，在酶標儀上測定吸光度（OD值）實施體系，吸光度（OD值）與待測樣品中犬胰島素(INS)的濃度正相關組建。擬合校準品曲線，可以計算出樣本中犬胰島素(INS)的濃度效果較好。

【主要組成成分】

主要成分

校準品濃度依次為： 1600重要的意義、800、400等多個領域、200再獲、100、0pg/mL應用擴展。校準品已經通過測試體驗區，結果表明HBs抗原陰性，HIV1活動上、HIV2和HCV抗體陰性有望，由于不存在一種試驗方法能夠*保證沒有這些物質，本品必須按照具有潛在的感染性進行處理導向作用，處理過程應當遵循通用的安全措施方案。

需要但未提供的材料及耗材

  1應用的選擇、酶標儀

2、精密移液器及一次性吸頭

3左右、蒸餾水

4背景下、洗瓶或者自動洗板機

5、37℃水浴鍋或恒溫箱

6可靠保障、500ml量筒

7等特點、無粉一次性乳膠手套

8、質控品（可從藍圖生物科技產品研發(fā)系統(tǒng)中選擇）

【儲存條件及有效期】

  1綠色化發展、2-8℃保存至關重要，切勿冷凍，有效期6個月用上了。

  2提升行動、開封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中關註，密閉自封袋研究進展，并將全部試劑放回2-8℃冰箱。

  3連日來、開封后快速融入，按照建議的條件保存，校準品系統、包被微孔板和HRP標記抗體增強，有效期為14天，其他成分在標簽標明的有效期內是穩(wěn)定的交流等。

【適用儀器】

  半自動的酶標儀更加廣闊，如Thermo MK3，或者國產酶標儀提高。

【樣本要求】

  樣本類型和采集

以下只是列出樣品采集的一般指南可以使用。所有樣本采集過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑紮實。

1效高化、細胞培養(yǎng)上清：4000rpm條件下離心20min，去除細胞顆粒和聚合物投入力度，上清液保存在- 20℃以下創造，避免反復凍融。

2法治力量、血清：使用不含熱原和內毒素的試管全技術方案，操作過程中避免任何細胞刺激分享，4000rpm條件下離心20min共享，小心地分離出血清信息化，保存在- 20℃以下，避免反復凍融生動。

3新型儲能、血漿：肝素，EDTA上高質量，或檸檬酸鈉作為抗凝劑一站式服務。在4000rpm條件下，離心20分鐘取上清深入交流，血漿保存在-20℃以下引領作用，避免反復凍融。

樣本保存和穩(wěn)定性

樣本在2-8℃條件下臺上與臺下，可以儲存72h用的舒心，或者在- 20℃儲存6個月。樣本收集后集聚效應，不是一次檢測完集成，請按一次用量分裝凍存，避免反復凍融互動講，使用時在室溫下解凍穩定性，確保樣品均勻充分解凍。

【檢驗方法】

試劑準備

1過程中、使用前去突破，所有的組分都要至少復溫30min，確保充分復溫到室溫達到。

2具體而言、濃縮洗滌液：從冰箱取出的濃縮洗滌液，會有結晶產生智慧與合力，這屬于正诚矏?，F(xiàn)象，水浴加熱使結晶*溶解開放要求。濃縮洗滌液與蒸餾水向好態勢，按1:20稀釋，即1份的濃縮洗滌液服務機製，添加19份的蒸餾水貢獻力量。

3、底物：底物液A和B大幅拓展，在使用前發行速度，按1:1體積充分混合，混合后15分鐘內使用與時俱進。

操作程序

1性能、所有試劑和組分都先恢復到室溫更適合，標準品、質控品和樣品溝通協調，建議做復孔要素配置改革。

2、按前面試劑準備中描述的方法保障性，配制好試劑盒各種組分的工作液帶動產業發展。

3、從鋁箔袋中取出所需板條十分落實，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱倍增效應。

4、設置標準品孔製造業、樣本孔和空白孔多樣性，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL，樣本孔加待測樣本50μL新格局，空白孔不加明顯。

5、除空白孔外顯示，標準品孔和樣本孔創新為先，加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體100μL。

6科普活動、用封板膜蓋住反應板創新延展，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

7長期間、揭開封板膜基本情況，棄去液體，吸水紙上拍干高端化，每孔加滿洗滌液力量，靜置20s，甩去洗滌液提單產，吸水紙上拍干深入實施。

8、如此重復4次（共洗板5次）發展空間。若使用自動洗板機效果，請按洗板機操作程序進行洗板，添加浸泡20s的程序解決，可以提高檢測的精度預期。洗板結束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上結構，充分拍干反應板重要的作用。

9、將底物A和B按1:1體積充分混合更優美，所有孔中加入底物混合液100μL各方面。用封板膜蓋住反應板防控，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min成效與經驗。

10、所有孔加入終止液50μL堅實基礎，在酶標儀上讀取各孔吸光度（OD值）稍有不慎。

【檢驗結果的解釋】

檢測完成后，以標準品濃度做為縱坐標等地，對應的吸光度（OD值）作為橫坐標最為顯著，利用計算機軟件，采用四參數(shù)Logistic曲線擬合（4-pl）規定，創(chuàng)建標準曲線方程環境，通過樣本的吸光度（OD值）研究成果，利用方程計算樣品的濃度值調整推進。

如果樣品被稀釋，通過上述方法測的的濃度值規則製定，要乘以稀釋倍數(shù)流程，才是樣品的zui終濃度合作。

【檢驗方法的局限性】

1、僅供科研使用助力各業，不得用于臨床診斷極致用戶體驗。

2、在試劑盒標示的有效期內使用應用，過期產品不得使用建議。

3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用相貫通。

4用的舒心、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。

5助力各行、如果樣本值高于zui高標準品濃度值前來體驗，請將樣本適當稀釋后，再重新測定確定性。

6更加廣闊、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結果，檢測前，請排除該因素非常完善。

7性能穩定、通過其他方法得到的檢測結果，與本試劑盒測定結果不具有直接的可比性作用。

【產品性能指標】

1情況正常、物理性能

試劑盒的各液體組分應澄清透明、無沉淀或者絮狀物技術特點。微孔板鋁箔袋應真空包裝提高鍛煉，無破損漏氣。

2凝聚力量、劑量反應曲線線性

校準品劑量反應曲線相關系數(shù)r值有所提升，大于等于0.9900。

3新的力量、精密度

批內精密度：三組已知的高先進水平、中、低濃度樣品全面展示，進行二十次在同一個板塊內精度評估重要平臺。批內變異系數(shù)CV%小于10%。

批間精密度：三組已知的高核心技術、中應用提升、低濃度樣品，進行二十次在不同板塊內精度評估溝通協調。批間變異系數(shù)CV%小于15%要素配置改革。

4、靈敏度

zui低檢出劑量小于10pg/mL保障性。

5帶動產業發展、回收率

三組已知的高、中十分落實、低濃度樣品倍增效應，進行五次回收率評估，回收率在85%-115%之間設施。

6需求、特異性

本試劑盒識別天然和重組犬胰島素(INS)，與結構類似物無交叉組合運用。

7更讓我明白了、穩(wěn)定性

    2℃-8℃保存，有效期6個月積極。

【注意事項】

生物安全

1探索、檢測必須符合實驗室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴格防止交叉污染，所有樣品滿意度、洗棄液和各種廢棄物都應按照傳染物進行處置情況較常見。

2、試劑盒的液體組分中主要抓手，含有proclin-300防腐劑體製，可能引起皮膚過敏反應，避免吸入煙霧與皮膚接觸創新科技。

3服務延伸、底物液對皮膚、眼睛和上呼吸道有刺激作用高效流通，避免吸入煙霧調解製度。戴上防護手套精準調控，實驗完成后*洗手功能。

技術提示

1、混合蛋白溶液時解決，避免起泡預期。

2、加校準品與樣本時幅度，每個校準品濃度和樣本都要更換移液槍頭結構，公共組分應該懸臂加樣，避免交叉污染貢獻。

3規模最大、合適的溫育時間，和充分的洗滌步驟統籌，是保證實驗結果準確性的必要條件系統性。

4、底物溶液為無色液體單產提升，保存過程中變?yōu)樗{色傳遞，代表底物溶液已經失效，不得使用勞動精神。

5開展攻關合作、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序*，加入終止液后預下達，藍色底物產物的有效手段，會瞬間變?yōu)辄S色。

6方案、實驗中關鍵技術，用剩的板條，應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存表現。

7特點、所有液體組分，使用前充分搖勻結論，嚴格按照說明書標明的時間和諧共生、加樣量及加樣順序進行溫育操作。

廢物處理

  所有使用或未使用的試劑適應性強，所有污染性的一次性材料技術交流，應當遵循傳染性或潛在傳染性產品的處理程序，每個實驗室都有責任根據(jù)其實驗的類型和危險性級別拓展，進行廢物和污物的處理創造更多，同時要嚴格依照有關規(guī)定對待所有的廢物和污物。