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菌種活化培養(yǎng)基的配置

閱讀:6078      發(fā)布時(shí)間:2019-7-1
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1)菌種試管斜面(活化)培養(yǎng)基及母種擴(kuò)大培養(yǎng)基
馬鈴薯瓊脂糖培養(yǎng)基:馬鈴薯(去皮)200 g 真正做到、葡萄糖20 g重要作用、瓊脂15~20g、蒸餾水1000 ml 習慣, pH自然。試驗(yàn)用量為1/5進展情況。
① 稱量 取去皮馬鈴薯40g的積極性,葡萄糖兩份,每份2g至關重要,瓊脂1.5-2.0g不久前。瓊脂加入的量取決于瓊脂的質(zhì)量,質(zhì)量差的應(yīng)適當(dāng)增加提升行動。
② 將馬鈴薯切成小塊能力建設,放入鍋中,加水200mL有效性,煮沸30 min創新內容。用雙層紗布濾去馬鈴薯殘?jiān)瑸V液加蒸餾水定容到200mL廣泛關註,攪拌均勻善於監督。
③ 取100mL濾液,裝入250mL的錐形瓶內(nèi)就能壓製,加入2g葡萄糖更合理,攪拌使糖溶解,然后加塞包扎更優美,等待滅菌各方面。該培養(yǎng)基即為酵母菌擴(kuò)大培養(yǎng)的液體PDA培養(yǎng)基。

④ 將剩余100mL馬鈴薯濾液放回鍋中成效與經驗,加入瓊脂適應性,加熱熔化。在瓊脂熔化的過程中傳遞,需要用玻璃棒不斷攪拌融合,并控制火力不要使培養(yǎng)基溢出或燒焦深入闡釋。

⑤ 加入2g葡萄糖,葡萄糖溶解后完成的事情,加入適量的水以補(bǔ)充加熱過程中損失的水分物聯與互聯,定容到100mL。

⑥ 分裝 將煮好的培養(yǎng)基分裝于試管中改造層面,其量為管高的1/5供給,滅菌后制成斜面。分裝三角瓶的容量以不超過三角瓶容積之一半為宜經驗分享。
⑦ 加塞 在管口塞上棉塞解決方案。棉塞可過濾空氣,防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)有力扭轉。
⑧ 包扎 加塞后上高質量,將試管用線繩捆好,再在棉塞外包一層報(bào)紙廣度和深度,以防止滅菌時(shí)冷凝水潤濕棉塞深入交流,其外再用一道線繩扎好。用記號(hào)筆注明培養(yǎng)基名稱科技實力。
⑨ 滅菌 將上述培養(yǎng)基以0.1MPa處理,121℃,高壓蒸汽滅菌20 min在此基礎上。

⑩ 擱置斜面 將滅菌的試管培養(yǎng)基豎直放置助力各行,冷至50℃左右(以防斜面上冷凝水太多),將試管口端擱在玻棒或其他合適高度的器具上自主研發,擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜確定性。

2)進(jìn)行恒溫?fù)u床培養(yǎng)的PDA液體培養(yǎng)基

① 稱量 取去皮馬鈴薯180g,分別稱取葡萄糖1g損耗、2g相貫通、3g各三份。

② 將馬鈴薯切成小塊積極影響,放入鍋中自動化方案,加水900mL,煮沸30 min越來越重要。用雙層紗布濾去馬鈴薯殘?jiān)€上線下,濾液加蒸餾水定容到900mL,攪拌均勻醒悟。
③ 分裝 將煮好的培養(yǎng)基分裝于9個(gè)錐形瓶中數據顯示,每支錐形瓶100mL培養(yǎng)基,編號(hào)(1)-(9)也逐步提升,用記號(hào)筆注明置于恒溫?fù)u床記得牢。
④ 加葡萄糖註入了新的力量,利用1mol/L的氫氧化鈉溶液或1mol/L的鹽酸溶液按照下表調(diào)節(jié)pH ,并向?qū)?yīng)PDA液體培養(yǎng)基(每瓶100mL)中加入相應(yīng)量的葡萄糖 更多可能性。
⑤ 加塞 攪拌充分后去創新,在瓶口塞上棉塞。棉塞可過濾空氣緊迫性,防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)結構。
⑧ 包扎 加塞后,再在棉塞外包一層報(bào)紙高效,以防止滅菌時(shí)冷凝水潤濕棉塞溝通協調,其外再用一道線繩扎好。
⑨ 滅菌 將上述培養(yǎng)基以0.1MPa體系,121℃保障性,高壓蒸汽滅菌20 min,冷卻待用大局。

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