1. 用PBS液漂洗蓋玻片的原代細(xì)胞3次積極影響，每次30s；
2. 在室溫中用3%甲醛/PBS固定20min緊密協作；
3. 用PBS液再漂洗3次越來越重要，每次1min，后用濾紙吸干多余的PBS液發揮重要作用；
4. 投入冷丙酮中（-10—-20℃）7min醒悟；
5. 用PBS漂洗3次，每次1min高質量，后用濾紙吸干多余的PBS液也逐步提升；
6. 向直徑6cm的干凈碟皿*滴一滴濃度為0.1—0.2mg/ml的一級抗微管蛋白抗體記得牢，令小蓋片細(xì)胞面向下扣在抗體液上，覆以皿蓋重要的作用，于37℃生化培養(yǎng)箱中放置45min—1h更多可能性；
7. 向碟皿內(nèi)勻速緩慢滴加PBS，令蓋片浮起在液面積極回應，用鑷子夾出重要性，按步驟3處理；
8. 向干凈碟皿*滴一滴濃度為0.1—0.2mg/ml的熒光標(biāo)記的二抗多種場景，其后操作按步驟6進(jìn)行；
9. 按步驟7和3操作規劃；
10. 滴pH8.5的90%的甘油/PBS少許于載玻片上擴大公共數據，把小蓋片的原代細(xì)胞面覆在大蓋片上；
11. 將蓋片置于熒光顯微鏡下觀察帶動擴大；
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