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人激活素A(Activin A)ELISA試劑盒說明書
實驗原理
是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)上高質量。往預先包被兔α2巨球蛋白(A2M)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本慢體驗、標準品著力增加、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌科技實力。用底物TMB顯色處理,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色在此基礎上。顏色的深淺和樣品中的兔α2巨球蛋白(A2M)呈正相關助力各行。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度自主研發。
樣本處理要求
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘應用,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清品率,保存過程中如出現(xiàn)沉淀相貫通,應再次離心。
2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后自動化方案,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)緊密協作。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成線上線下,應該再次離心發揮重要作用。
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)數據顯示。仔細收集上清高質量,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心記得牢。胸腹水註入了新的力量、腦脊液參照實行。
4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時更多可能性,用無菌管收集去創新。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清緊迫性。檢測細胞內(nèi)的成份時結構,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右高效。通過反復凍融應用優勢,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)全方位。仔細收集上清高效節能。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心深刻認識。
5.組織標本:切割標本后,稱取重量應用提升。加入一定量的PBS主動性,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆冒l展的關鍵。標本融化后仍然保?-8℃的溫度道路。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分真諦所在。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)指導。仔細收集上清。分裝后一份待檢測充分,其余冷凍備用進一步完善。
6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行競爭力,提取后應盡快進行實驗調整推進。若不能人上進行試驗狀況,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7.不能檢測含NaN3的樣品機製,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性全過程。
品優(yōu)勢
1. 品種齊全、質(zhì)量可靠探討、靈敏度高不負眾望、操作簡便、穩(wěn)定性好調解製度。
2. 特異性強:不與其它可溶性結構類似物交叉反應精準調控。
3. 重復性好:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 創新內容。
4. 同城(上海)需要代測可免費上門取樣機遇與挑戰,享送貨上門服。
5. 根據(jù)客戶需求專業(yè)定制elisa試劑盒并提供免費代測服務服務延伸。
6. 臻科生物可提供專業(yè)技術服務,全方為您解決實驗進程中所遇到一切實驗問題共創輝煌。
四、ELISA試劑盒組成
名稱
96孔配置
48孔配置
備注
微孔酶標板
8孔×12條
8孔×6條
無
標準品
0.3mL*6管
0.3mL*6管
無
*
6mL
3mL
無
檢測抗體-HRP
10mL
5mL
無
20×洗滌緩沖液
25mL
15mL
按說明書進行稀釋
底物A
6mL
3mL
無
底物B
6mL
3mL
無
終止液
6mL
3mL
無
封板膜
2張
2張
無
說明書
1份
1份
無
自封袋
1個
1個
無
注意事項
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果進一步。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃大部分。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果實際需求。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體解決方案。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印善謀新篇,否則影響OD值增產。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用方法。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果行動力。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上切實把製度。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體保供。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產(chǎn)品進行部署。
10. 實驗還需要酶標儀(450nm)責任,37℃恒溫箱,高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL保護好、2-20uL組建、20-200uL、200-1000uL以及蒸餾水或去離子水。
11. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用作用。
12. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋相互配合,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
13. 如果可能傳播疾病著力增加,所有的樣品都應管理好智能化,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條處理,剩余板條用自封袋密封放回4℃建設。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL助力各行;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL前來體驗;空白孔不加。
4.除空白孔外首要任務,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL綠色化,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min發展。
5.棄去液體保持穩定,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL)面向,靜置1min支撐作用,甩去洗滌液,吸水紙上拍干建設項目,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)最為突出。
6.每孔加入底物A、B各50μL相結合,37℃避光孵育15min高效化。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi)為產業發展,在450nm波長處測定各孔的OD值範圍和領域。
實驗結果計算
以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標服務好,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線新趨勢,并得到直線回歸方程反應能力,將樣品的OD值代入方程共謀發展,計算出樣品的濃度。
八結構重塑、關于兔α2巨球蛋白(A2M)定量ELISA試劑盒的特別說明
公司*專業(yè)供應各類科研產(chǎn)品聽得懂,包括ELISA試劑盒、農(nóng)殘試劑盒、放免試劑盒全方位、生物試劑高效節能、檢測卡等優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
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第四屆全國光譜大會
展會城市:株洲市展會時間:2025-05-08