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大鼠腦源性神經(jīng)生長因子(BDNF)檢測試劑盒說明書
實驗原理
是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)貢獻力量。往預先包被兔α2巨球蛋白(A2M)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本大幅拓展、標準品發行速度、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌與時俱進。用底物TMB顯色性能，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色綜合運用。顏色的深淺和樣品中的兔α2巨球蛋白(A2M)呈正相關供給。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD值)，計算樣品濃度實事求是。
樣本處理要求
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘進行探討，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清服務水平，保存過程中如出現(xiàn)沉淀最新，應再次離心。
2.血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑促進善治，混合10-20分鐘后擴大，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清發揮效力，保存過程中如有沉淀形成新格局，應該再次離心。
3.尿液：用無菌管收集安全鏈，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)顯示。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成真正做到，應再次離心科普活動。胸腹水、腦脊液參照實行強化意識。
4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時長期間，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)現場。仔細收集上清高端化。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右提單產。通過反復凍融深入實施，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)發展空間。仔細收集上清效果。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心足了準備。
5.組織標本：切割標本后合作關系，稱取重量。加入一定量的PBS系統，PH7.4增強。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度交流等。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標本勻漿充分規劃。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)提高。仔細收集上清。分裝后一份待檢測適應性，其余冷凍備用堅實基礎。
6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行重要作用，提取后應盡快進行實驗等地。若不能人上進行試驗，可將標本放于-20℃保存尤為突出，但應避免反復凍融.
7.不能檢測含NaN3的樣品規定，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
品優(yōu)勢
1. 品種齊全空間載體、質(zhì)量可靠高質量、靈敏度高、操作簡便重要組成部分、穩(wěn)定性好流程。
2. 特異性強：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
3. 重復性好：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% 勃勃生機，板間變異系數(shù)小于15% 助力各業。
4. 同城(上海)需要代測可免費上門取樣，享送貨上門服提供有力支撐。
5. 根據(jù)客戶需求專業(yè)定制elisa試劑盒并提供免費代測服務應用。
6. 臻科生物可提供專業(yè)技術服務,全方為您解決實驗進程中所遇到一切實驗問題。
四、ELISA試劑盒組成
名稱
96孔配置
48孔配置
備注
微孔酶標板
8孔×12條
8孔×6條
無
標準品
0.3mL*6管
0.3mL*6管
無
*
6mL
3mL
無
檢測抗體-HRP
10mL
5mL
無
20×洗滌緩沖液
25mL
15mL
按說明書進行稀釋
底物A
6mL
3mL
無
底物B
6mL
3mL
無
終止液
6mL
3mL
無
封板膜
2張
2張
無
說明書
1份
1份
無
自封袋
1個
1個
無
注意事項
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果臺上與臺下。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃用的舒心。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果集聚效應。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體集成。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印互動講，否則影響OD值穩定性。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用過程中。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果去突破。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上達到。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體作用。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產(chǎn)品行業分類。
10. 實驗還需要酶標儀(450nm)技術特點，37℃恒溫箱，高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL發展邏輯、2-20uL凝聚力量、20-200uL、200-1000uL以及蒸餾水或去離子水聽得進。
11. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用新的力量。
12. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水便利性。
13. 如果可能傳播疾病全面展示，所有的樣品都應管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置緊迫性。
操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條結構，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔高效，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL溝通協調；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加體系。
4.除空白孔外保障性，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔責任製，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min十分落實。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液(350μL)製造業，靜置1min優化服務策略，甩去洗滌液，吸水紙上拍干發展基礎，如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)兩個角度入手。
6.每孔加入底物A、B各50μL同期，37℃避光孵育15min生產效率。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)產業，在450nm波長處測定各孔的OD值滿意度。
實驗結果計算
以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標可持續，在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線主要抓手，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程構建，計算出樣品的濃度集成應用。
八、關于兔α2巨球蛋白(A2M)定量ELISA試劑盒的特別說明
公司*專業(yè)供應各類科研產(chǎn)品不負眾望，包括ELISA試劑盒、農(nóng)殘試劑盒調解製度、放免試劑盒精準調控、生物試劑、檢測卡等優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品應用的因素之一。
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第四屆全國光譜大會
展會城市：株洲市展會時間：2025-05-08