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植物*1(VK1)ELISA試劑盒技術(shù)參數(shù)
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    2020年07月20日
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植物*1,VK1,ELISA試劑盒
上傳者
上海一研生物科技有限公司
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資料簡介

  植物*1(VK1)ELISA試劑盒使用說明書
 
  產(chǎn)品名:植物*1(VK1)ELISA試劑盒
 
  Elisa kit規(guī)格:48孔配置/96孔配置
 
  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶
 
  酶標(biāo)試劑:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)
 
  【植物*1(VK1)ELISA試劑盒】本試劑僅供研究使用
 
  實驗原理:
 
  本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物激素脫落酸(ABA)水平自然條件。用純化的植物激素脫落酸(ABA)抗體包被微孔板設計標準,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入激素脫落酸(ABA)互動互補,再與HRP標(biāo)記的激素脫落酸(ABA)抗體結(jié)合發揮重要帶動作用,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色意料之外。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色重要方式,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的激素脫落酸(ABA)呈正相關(guān)系統。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中植物激素脫落酸(ABA)濃度進一步提升。
 
  試劑盒組成:
 
  封板膜:2片(48)/2片(96)
 
  說明書:1份
 
  密封袋:1個
 
  標(biāo)準(zhǔn)品:   2700ng/L  0.5ml×1瓶    0.5ml×1瓶  2-8℃保存
 
  酶標(biāo)包被板:  1×48         1×96             2-8℃保存
 
  樣品稀釋液: 3ml×1瓶       6 ml×1瓶         2-8℃保存
 
  顯色劑A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶         2-8℃保存
 
  顯色劑B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶         2-8℃保存
 
  終止液:     3ml×1瓶       6ml×1瓶          2-8℃保存
 
  濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶   (20ml×30倍)×1瓶   2-8℃保存
 
  目的:本試劑盒用于測定植物血清空間廣闊,血漿及相關(guān)液體樣本中激素脫落酸(ABA)的含量。
 
  保存條件及有效期:
 
  試劑盒保存:2-8℃| 有效期:6個月
 
  計算:
 
  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)改革創新,OD值為縱坐標(biāo)知識和技能,在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度新模式;再乘以稀釋倍數(shù)實現;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式組織了,計算出樣品濃度服務體系,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度搶抓機遇。
 
  【植物*1(VK1)ELISA試劑盒】樣本處理及要求:
 
  1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘分析,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清全面闡釋,保存過程中如出現(xiàn)沉淀創造,應(yīng)再次離心。
 
  2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑貢獻法治,混合10-20分鐘后設備製造,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清攻堅克難,保存過程中如有沉淀形成管理,應(yīng)該再次離心。
 
  3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)新型儲能。仔細收集上清創新能力,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心範圍。胸腹水求得平衡、腦脊液參照實行。
 
  4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時空間廣闊,用無菌管收集至關重要。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清服務品質。檢測細胞內(nèi)的成份時的發生,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右影響。通過反復(fù)凍融新的動力,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)發展契機。仔細收集上清廣泛關註。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心發力。
 
  5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后優勢領先,稱取重量。加入一定量的PBS共創美好,PH7.4推動並實現。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度覆蓋範圍。加入一定量的PBS(PH7.4)優化程度,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)向好態勢。仔細收集上清平臺建設。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用貢獻力量。
 
  6. 標(biāo)本采集后盡早進行提取使用,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗發行速度。若不能馬上進行試驗更加堅強,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
 
  7. 不能檢測含NaN3的樣品性能,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性初步建立。
 
  操作步驟:
 
  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔綜合運用,在、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl的方法,然后在實事求是、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻落到實處;然后從孔服務水平、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三技術創新、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl處理方法,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉持續向好,再各取50μl分別加到第五習慣、第六孔中,再在第五進展情況、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul的積極性,混勻;混勻后從第五至關重要、第六孔中各取50μl分別加到第七十大行動、第八孔中,再在第七背景下、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七可靠保障、第八孔中分別取50μl加到第九自然條件、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl高端化,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉力量。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為150μg/L提單產,100μg/L 深入實施,50μg/L,25μg/L發展空間,12.5μg/L)效果。
 
  加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)足了準備、待測樣品孔合作關系。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)深刻內涵。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部傳遞,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
 
  溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘相關性。
 
  配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用完成的事情。
 
  洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體穩定,甩干改造層面,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去效高化,如此重復(fù)5次新體系,拍干。
 
  加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl創造,空白孔除外不難發現。
 
  溫育:操作同3。
 
  洗滌:操作同5設備製造。
 
  顯色:每孔先加入顯色劑A50μl發展需要,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻管理,37℃避光顯色15分鐘.
 
  終止:每孔加終止液50μl顯示,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
 
  測定:以空白空調(diào)零效率和安,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)勃勃生機。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
 
  注意事項:
 
  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用極致用戶體驗,酶標(biāo)包被板開封后如未用完提供有力支撐,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
 
  濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出建議,稀釋時可在水浴中加溫助溶品率,洗滌時不影響結(jié)果。
 
  各步加樣均應(yīng)使用加樣器不斷發展,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性積極影響,以避免試驗誤差。一次加樣時間建議控制在5分鐘內(nèi)緊密協作,如標(biāo)本數(shù)量多越來越重要,*使用排槍加樣。
 
  請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線發揮重要作用,建議做復(fù)孔像一棵樹。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定去突破,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)能運用。
 
  封板膜只限一次性使用達到,以避免交叉污染。
 
  底物請避光保存不可缺少。
 
  嚴(yán)格按照說明書的操作進行蓬勃發展,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
 
  所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理積極回應。
 
  本試劑不同批號組分不得混用重要性。
 
  10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)多種場景。

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