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資料簡(jiǎn)介
衣氏放線(xiàn)菌PCR進(jìn)口試劑盒說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品名稱(chēng)：衣氏放線(xiàn)菌PCR進(jìn)口試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增十分落實，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增倍增效應，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合製造業；
灮詹呗?、趬A基配對(duì)原則；
“l展基礎、跿aq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性兩個角度入手；
④靶基因的特異性與保守性同期。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品生產效率。
具有下列特點(diǎn)：
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)效果。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個(gè)數(shù)量級(jí)使用，可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開(kāi)即用密度增加，用戶(hù)只需要提供樣品模板有效性，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速機遇與挑戰。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)廣泛關註，避免后續(xù)污染善於監督。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研就能壓製，不能用于臨床診斷更合理。
規(guī)格及成分 成分
2×qPCR MagicMix 500 μL(裝 A 袋)
微量核酸稀釋液(熒光 PCR )1 mL(裝 A 袋)
PCR 引物混合物 100 μL(裝 A 袋)
基因陽(yáng)性對(duì)照 50 μL(裝 B 袋)
DNA 病毒裂解液(試用裝) 15 次(9 mL)
使用手冊(cè) 1 份
運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸、-20℃保存(A 袋試劑放樣品準(zhǔn)備區(qū)更優美、B 袋的陽(yáng)性對(duì)照好分開(kāi)放置)實際需求，
自備試劑DNA 模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定預期，具體見(jiàn)使用方法)敢於監督。
應(yīng)用案例
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容結構。重要的作用。也可以選購(gòu)本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)規模最大。
稀釋陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例穩中求進。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行最深厚的底氣，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)協同控製。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照品質，只提供可以直接使用的長(zhǎng)為 86bp 的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照利用好。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7解決問題，6系列，5，4相互配合，3慢體驗，2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(好用帶芯槍頭智能化，下同)科技實力。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘建設，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照在此基礎上。放冰上待用。5.換槍頭前來體驗，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)提供有力支撐，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照建議。放冰上待用品率。
6.換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中拓展，充分震蕩 1 分鐘創造更多，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用不斷進步。
7.換槍頭工藝技術，在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 4 號(hào)管中，得1×10E4 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照規模。放冰上待用近年來。8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用發展目標奮鬥。
設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20 μL 體系技術先進，在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測(cè)樣品需要做三次重復(fù)，下表只列出一次延伸。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照認為，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后后加)：
注:僅 ABI7500、7700 和 7900 儀器需要使用 ROX 作為對(duì)照新趨勢，其他熒光 PCR 儀器(如 iCycler IQ反應能力、MJ Option、MJ Chromo4學習、MX3000結構重塑、MX4000、RotorGene3000應用優勢、RotorGene 6000 和 LightCycler480)不需要使用 ROX高質量發展，則用水替代。
10. 蓋上蓋子后上機(jī)全面展示，按下面參數(shù)進(jìn)行 PCR(具體 PCR 參數(shù)可以根據(jù)儀器不同而自行
優(yōu)化)重要平臺。
過(guò)程溫度時(shí)間
預(yù)變性95℃1 分鐘
PCR 反應(yīng)95℃15 秒
(30 個(gè)循環(huán))60℃15 秒
72℃15 秒
11. 數(shù)據(jù)采集
具體操作按所用儀器*的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合 DNA 時(shí)核心技術，
大吸收光譜在 471 nm應用提升，結(jié)合 DNA 時(shí)的大吸收光譜在 500 nm，大發(fā)射光
譜在 530 nm創造性。
四發展的關鍵、數(shù)據(jù)處理
12. 以陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸規模設備，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)真諦所在。再以待測(cè)樣品
的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上推算出樣品 DNA 濃度的 log 值，再推算出其濃度技術創新。
組成及試劑配制:
1深入交流研討、酶標(biāo)板：一塊(96孔)
2資料、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制關註度。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml橫向協同，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解敢於挑戰，其濃度為200 U/L不斷創新，然后做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)，分別配制成200 U/L提供了遵循，100 U/L參與水平，50 U/L，25 U/L服務效率，12.5 U/L明確相關要求，6.25 U/L，3.12 U/L主要抓手，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L體製。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可創新科技，其余濃度以此類(lèi)推服務延伸。
3、 樣品稀釋液：1×20ml具有重要意義。
4進一步、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5強大的功能、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml實際需求。
注意事項(xiàng)：
1.基礎(chǔ)程序；
2.擴(kuò)增溫度和延伸溫度優勢；
3.反應(yīng)時(shí)間善謀新篇；
4.循環(huán)次數(shù)；
5.PCR 反應(yīng)液的配制便利性；
6.PCR技術(shù)的基本原理方法；
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物提供有力支撐；
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件發揮作用。
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融逐步顯現，有效期6個(gè)月銘記囑托。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480示範、iCycleriQ5應用前景、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀製度保障。
【樣本采集預下達、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h統籌推進，-70℃以下可*保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次)關鍵技術；
u 運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸了解情況。
【自備試劑】:產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)
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第四屆全國(guó)光譜大會(huì)
展會(huì)城市：株洲市展會(huì)時(shí)間：2025-05-08