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植物激素脫落酸(ABA)elisa試劑盒使用方法
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    2020年06月28日
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植物激素脫落酸,ABA,試劑盒
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上海一研生物科技有限公司
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資料簡(jiǎn)介

植物激素脫落酸(ABA)elisa試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品名:植物激素脫落酸(ABA)elisa試劑盒
Elisa kit規(guī)格:48孔配置/96孔配置

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶

酶標(biāo)試劑:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)

植物激素脫落酸(ABA)試劑盒】本試劑僅供研究使用

實(shí)驗(yàn)原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中植物激素脫落酸(ABA)水平深入。用純化的植物激素脫落酸(ABA)抗體包被微孔板,制成固相抗體前沿技術,往包被單抗的微孔中依次加入激素脫落酸(ABA)全會精神,再與HRP標(biāo)記的激素脫落酸(ABA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物拓展基地,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色集中展示。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色體系流動性。顏色的深淺和樣品中的激素脫落酸(ABA)呈正相關(guān)探索創新。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物激素脫落酸(ABA)濃度實現了超越。

 

試劑盒組成:

封板膜:2片(48)/2片(96)                       

說(shuō)明書(shū):1份                                                   

密封袋:1個(gè)

標(biāo)準(zhǔn)品:   2700ng/L  0.5ml×1瓶    0.5ml×1瓶  2-8℃保存            

酶標(biāo)包被板:  1×48         1×96             2-8℃保存

樣品稀釋液: 3ml×1瓶       6 ml×1瓶         2-8℃保存

顯色劑A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶         2-8℃保存

顯色劑B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶         2-8℃保存

終止液:     3ml×1瓶       6ml×1瓶          2-8℃保存

濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶   (20ml×30倍)×1瓶   2-8℃保存


目的:本試劑盒用于測(cè)定植物血清新產品,血漿及相關(guān)液體樣本中激素脫落酸(ABA)的含量。

保存條件及有效期:

試劑盒保存:2-8℃| 有效期:6個(gè)月

計(jì)算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)橋梁作用,OD值為縱坐標(biāo)長遠所需,在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度讓人糾結;再乘以稀釋倍數(shù)規模;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式基石之一,計(jì)算出樣品濃度聯動,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度共同努力。
植物激素脫落酸(ABA)試劑盒】樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘行業內卷,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清很重要,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀能力和水平,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑異常狀況,混合10-20分鐘后研究,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清應用創新,保存過(guò)程中如有沉淀形成提高,應(yīng)該再次離心機構。

3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)交流。仔細(xì)收集上清基礎,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心形勢。胸腹水實踐者、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí)約定管轄,用無(wú)菌管收集數據。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清發揮。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)顯著,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右開放以來。通過(guò)反復(fù)凍融占,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)提供了有力支撐。仔細(xì)收集上清激發創作。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心意見征詢。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后提升,稱取重量。加入一定量的PBS的必然要求,PH7.4研究成果。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度完善好。加入一定量的PBS(PH7.4)大面積,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)問題分析。仔細(xì)收集上清培養。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用更加完善。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取形式,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)支撐作用。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)日漸深入,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品同時,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性互動式宣講。
植物激素脫落酸(ABA)試劑盒操作步驟:

標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔自然條件,在、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl開展,然后在互動互補、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻意向;然后從孔意料之外、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三開展面對面、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl系統,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉進一步提升,再各取50μl分別加到第五、第六孔中營造一處,再在第五改革創新、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻取得顯著成效;混勻后從第五新模式、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中不容忽視,再在第七組織了、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七說服力、第八孔中分別取50μl加到第九搶抓機遇、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl表示,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉全面闡釋。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為150μg/L競爭力所在,100μg/L 引人註目,50μg/L,25μg/L溝通機製,12.5μg/L)好宣講。
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)領先水平、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)創新能力。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部新品技,盡量不觸及孔壁範圍,輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘紮實做。
配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用空間廣闊。
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體提供深度撮合服務,甩干服務品質,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去組成部分,如此重復(fù)5次影響,拍干。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl的過程中,空白孔除外發展契機。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5促進進步。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl發力,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻迎來新的篇章,37℃避光顯色15分鐘. 
終止:每孔加終止液50μl共創美好,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
測(cè)定:以空白空調(diào)零薄弱點,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)覆蓋範圍。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
 

注意事項(xiàng):

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用積極性,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完奮勇向前,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出約定管轄,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶數據,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
各步加樣均應(yīng)使用加樣器發揮,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性顯著,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間建議控制在5分鐘內(nèi)與時俱進,如標(biāo)本數(shù)量多性能,*使用排槍加樣。
請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線綜合運用,建議做復(fù)孔供給。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定實事求是,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)進行探討。
封板膜只限一次性使用落到實處,以避免交叉污染。
底物請(qǐng)避光保存最新。
嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行技術創新,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理重要作用。
本試劑不同批號(hào)組分不得混用持續向好。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)充足。

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