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【儀器網(wǎng) 使用手冊(cè)】圓二色光譜研究蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)、構(gòu)象變化以及其他手性化合物結(jié)構(gòu)的常用方法覆蓋範圍,用圓二色光譜檢測(cè)蛋白質(zhì)二級(jí)構(gòu)象的操作方法是研究人員都需要掌握的優化程度。下面就簡(jiǎn)單介紹一下應(yīng)該如何操作圓二色光譜儀。
1.準(zhǔn)備
為避免圓二色光譜儀強(qiáng)度隨溫度而發(fā)生變化的變化,應(yīng)安裝在空調(diào)室中不斷豐富,而且還需要光源(Xe燈)的冷卻用水(流量為2.0L/min)
為了防護(hù)由氙燈所產(chǎn)生的臭氧化光學(xué)系統(tǒng)的腐蝕,還得需要流動(dòng)干燥的氮?dú)?2-5L/min)
需要透光率好實施體系、應(yīng)變小的高品質(zhì)石英玻璃樣品池。
2.樣品制備
樣品制備需要保證蛋白的純度和透明度各有優勢,避免含有光吸收的雜質(zhì)效果較好。
緩沖液可選擇透明度較高的溶液。
3.開(kāi)機(jī)
打開(kāi)高純氮?dú)獬掷m,通入光路等多個領域。打開(kāi)計(jì)算機(jī),進(jìn)入操作界面產品和服務,設(shè)置相關(guān)參數(shù)開(kāi)啟氙燈應用擴展,等約30 min,待儀器充分預(yù)熱后增多,方可使用活動上。
4.測(cè)試
將光路徑為1 cm的樣品池放入樣品室中,進(jìn)入測(cè)試界面進一步推進,輸入測(cè)試參數(shù):靈敏度1000 mdeg生產能力;掃面范圍350-200 nm;掃速50 nm/min技術創新;響應(yīng)時(shí)間2s處理方法;響應(yīng)波長(zhǎng)寬度1.0 nm;掃描次數(shù)1次持續向好。先測(cè)試蒸餾水背景習慣,再分別測(cè)試配制的兩份溶液。然后進(jìn)行數(shù)據(jù)處理進展情況。
5.關(guān)機(jī)
打開(kāi)樣品室的積極性,取出樣品池;退出操作界面至關重要,關(guān)閉氙燈不久前;關(guān)閉氮?dú)猓P(guān)閉主機(jī)電源提升行動;關(guān)閉計(jì)算機(jī)和打印機(jī)能力建設;清洗樣品池。
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