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涂片及染色是微生物學(xué)的基本技術(shù)，也是觀察細(xì)菌Z簡單且行之有效的方法首要任務。通常情況下綠色化，由于細(xì)菌個體較小，較透明或半透明發展，如未經(jīng)染色往往不易觀察識別保持穩定。因此借助于染色法可使細(xì)菌著色，與視野背景形成鮮明對比面向，從而易于在顯微鏡下進(jìn)行觀察支撐作用。
簡單染色法即只用一種染料對涂片進(jìn)行染色，該法簡便易行建設項目，適用于菌體的一般形態(tài)觀察最為突出。通常情況下由于細(xì)菌菌體多帶負(fù)電荷落實落細，易和帶正電荷的堿性染料結(jié)合而被染色，因此常用堿性染料進(jìn)行簡單染色高效化，如美藍(lán)製高點項目、堿性復(fù)紅、結(jié)晶紫範圍和領域、孔雀綠有所增加、番紅等。所有的苯胺染料新趨勢，均可用來做簡單染色法的染色劑反應能力。在進(jìn)行染色之前的制片過程是影響染色結(jié)果好壞的關(guān)鍵性步驟。
制備細(xì)菌染色片一般要經(jīng)過涂片學習、固定奮戰不懈、染色、水洗措施、干燥等步驟(見下圖),然后用顯微鏡大大縮短，甚至油鏡觀察。
(一)涂片
取一干凈的載玻片緊密相關，滴加一小滴蒸餾水于載玻片*更默契了。按無菌操作要求，接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌培訓，待冷卻后用接種環(huán)從菌種試管斜面上(培養(yǎng)皿表面)挑取少量培養(yǎng)物(不要挑破培養(yǎng)基),置于載玻片上的水滴中不合理波動，與水混合并輕輕涂布成直徑約1cm左右的均勻薄層。操作完成后重要工具，接種環(huán)要再經(jīng)灼燒滅菌積極拓展新的領域，放歸原處。
(二)干燥
將涂片于室溫中自然干燥或者置于酒精燈火焰高處更優質，微熱烘干相對開放。切記不能直接在火焰上烘烤，以免菌體烤焦變形脫穎而出，影響對菌體的觀察拓展應用。
(三) 固定
涂片標(biāo)本面向上，快速通過酒精燈火焰外焰2次~3次結構，進(jìn)行標(biāo)本固定管理。固定的目的在于殺死細(xì)菌以固定其細(xì)胞結(jié)構(gòu)；保證菌體牢固地粘附在載玻片上能力建設，染色或水洗時不至于脫落模樣；同時改變菌體對染料的通透性，有利于著色，增強(qiáng)染色效果提供了遵循。固定時，以載玻片背面加熱處觸及皮膚而不覺過燙為宜(一般不超過60 ℃ )大型。
(四)染色
標(biāo)本玻片水平放置服務效率，滴加1滴~2滴染色液，使染色液*覆蓋涂片區(qū)域重要意義，染色時間視不同標(biāo)本和染料的性質(zhì)而定統籌發展。
(五)水洗
染色到一定時間后，傾去染液追求卓越，斜置玻片逐漸完善， 自玻片上端用自來水沖洗至流下的水無色為止；或?qū)⒉Ｆ糜诓Ｆ苌虾侠硇枨?，用洗瓶傾注水流進(jìn)行水洗是目前主流。注意沖洗水流不宜過急、過大高質量，同時要避免直接沖在涂片處充分發揮，導(dǎo)致涂片受損。
(六)干燥管理、鏡檢
自然晾干設計，或用吸水紙吸去玻片上的多余水分后再晾干，但要注意勿將菌體抹掉改進措施。*干燥后就此掀開，用顯微鏡甚至油鏡檢查。
注意事項(xiàng)：
(1)載玻片要清潔無油污今年，否則菌液不易涂開穩步前行。涂片時取培養(yǎng)物宜少，培養(yǎng)物涂層宜薄良好，涂層過厚則不易觀察細(xì)菌形態(tài)逐步顯現。
(2)干燥和固定時，玻片不能直接在離火焰很近的位置上烘烤引領，否則會破壞細(xì)菌形態(tài)并使之變形自動化裝置，影響觀察結(jié)果。
(3)觀察時如需用到油鏡應用前景，油鏡檢查前玻片應(yīng)*干燥有很大提升空間，觀察后要將油鏡用擦鏡紙等*擦拭干凈。
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