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薄層色譜的操作方法

   2019年11月28日 11:02  
  【儀器網(wǎng) 使用手冊(cè)】薄層色譜是一種較新的色譜法,兼具柱色譜和紙色譜的優(yōu)點(diǎn)高效節能,能快速分離和定性分析少量物質(zhì)重要平臺。薄層色譜性能優(yōu)異,操作也較簡(jiǎn)單核心技術。
 
  1.選擇吸附劑
 
  吸附劑一般要求直徑為10~40μm應用提升,需要根據(jù)被分離物質(zhì)的性質(zhì)選擇,常用的吸附劑有以下幾種創造性。
 
  硅膠:微酸性極性固定相前沿技術,適用于酸性、中性物質(zhì)分離
 
  氧化鋁:堿性極性固定相性能,適用于堿性多種方式、中性物質(zhì)分離
 
  纖維素:含有羥基的極性固定相,適用于分類親水性物質(zhì)技術創新。
 
  聚酰胺:含有酰胺基極性固定相深入交流研討,適用于酚類、醇類化合物的分離廣泛應用。
 
  2.制備薄層板
 
  薄層板的質(zhì)量將決定分離的效果關註度,應(yīng)該盡量均勻且厚薄一致。薄層板的制備主要有兩種方法:
 
 ∧男╊I域、賹崈舾稍锏牟AО逯糜阡伆迤髦虚g敢於挑戰,在鋪板槽中倒入糊狀物,自左向右推建立和完善,將糊狀物均勻地涂在玻璃板上提供了遵循。
 
 ⑴c水平、趯⒄{(diào)成糊狀物倒在玻璃板上,或用角匙舀到玻璃板上服務效率,再用玻璃棒或角匙鋪平并用手捏住玻璃板一角明確相關要求,輕輕碰敲桌面,使薄層表面均勻并除去 糊狀物中的氣泡統籌發展。
 
  制備完成后還需要將涂好的薄層板水平放置于室溫下晾干深化涉外,然后放在烘箱內(nèi)加熱活化。(硅膠板需在烘箱內(nèi)慢慢升溫至105-110度后保溫30分鐘創新科技;氧化鋁板需在200-220度烘4小時(shí))
 
  3.點(diǎn)樣
 
  將待測(cè)樣品溶在極性盡可能低的溶劑中配成1%的溶液。用一支平口的細(xì)毛細(xì)管蘸取少量樣品溶液點(diǎn)在薄板上共創輝煌。
 
  4.展開(kāi)
 
  薄層層析有多種展開(kāi)方式具有重要意義,可分為上行、下行大部分、雙向展開(kāi)等強大的功能,這里介紹一下上行法和下行法。
 
  上行法:在缸中加入足夠量的展開(kāi)劑解決方案,將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)缸的展開(kāi)劑中優勢,密封缸蓋,待展 開(kāi)前沿離薄板上端1cm時(shí)基礎,取出薄層板提供堅實支撐,并用鉛筆輕輕畫下溶劑前沿,晾干高產。
 
  下行法:在展開(kāi)缸的蓋子上裝一個(gè)小 鉤信息化技術,將展開(kāi)的紙片鉤住,并通過(guò)一濾紙條將展 開(kāi)劑和紙片連起來(lái)良好。待展開(kāi)劑前沿離紙片下端 1cm時(shí)逐步顯現,取出紙片,并用鉛筆輕輕畫下溶劑前 沿引領,晾干自動化裝置。
 
  5.顯色
 
  晾干薄板溶劑后對(duì)板上的組分進(jìn)行定位。將顯色劑以噴霧方式直接噴到薄層板上可顯示不同顏色的斑點(diǎn)應用前景。此外對(duì)于無(wú)色樣品有很大提升空間,可采用帶熒光劑的吸附劑做薄板,展開(kāi)后在紫外光下顯暗色斑點(diǎn)首次;對(duì)于在光學(xué)條件下不顯色的物質(zhì)的有效手段,可將薄板置于含有少量碘晶體的密閉容器中,與碘作用呈棕色斑點(diǎn)方案。
 
  6.Rf值計(jì)算
 
  用尺測(cè)量原點(diǎn)到色斑中心的距離除以原點(diǎn)到溶劑前沿的距離關鍵技術。不同的物質(zhì)往往有著不同的Rf值了解情況,根據(jù)這個(gè)就可以簡(jiǎn)單判斷它們是否是同一物質(zhì),但Rf值相同之后技術研究,還要進(jìn)行進(jìn)一步判斷才能確定他們是否為同一個(gè)物質(zhì)重要的。

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