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1)菌種試管斜面(活化)培養(yǎng)基及母種擴(kuò)大培養(yǎng)基
馬鈴薯瓊脂糖培養(yǎng)基:馬鈴薯(去皮)200 g 、葡萄糖20 g統籌發展、瓊脂15~20g深化涉外、蒸餾水1000 ml , pH自然生產製造。試驗(yàn)用量為1/5開展試點。
① 稱量 取去皮馬鈴薯40g,葡萄糖兩份共同,每份2g充分發揮,瓊脂1.5-2.0g。瓊脂加入的量取決于瓊脂的質(zhì)量充分發揮,質(zhì)量差的應(yīng)適當(dāng)增加選擇適用。
② 將馬鈴薯切成小塊,放入鍋中設計,加水200mL交流,煮沸30 min。用雙層紗布濾去馬鈴薯殘?jiān)峁﹫詫嵵?,濾液加蒸餾水定容到200mL還不大,攪拌均勻。
③ 取100mL濾液信息化技術,裝入250mL的錐形瓶?jī)?nèi)發揮作用,加入2g葡萄糖良好,攪拌使糖溶解,然后加塞包扎銘記囑托,等待滅菌引領。該培養(yǎng)基即為酵母菌擴(kuò)大培養(yǎng)的液體PDA培養(yǎng)基。
④ 將剩余100mL馬鈴薯濾液放回鍋中示範,加入瓊脂應用前景,加熱熔化。在瓊脂熔化的過(guò)程中運行好,需要用玻璃棒不斷攪拌首次,并控制火力不要使培養(yǎng)基溢出或燒焦。
⑤ 加入2g葡萄糖部署安排,葡萄糖溶解后搖籃,加入適量的水以補(bǔ)充加熱過(guò)程中損失的水分,定容到100mL推廣開來。
⑥ 分裝 將煮好的培養(yǎng)基分裝于試管中推動,其量為管高的1/5,滅菌后制成斜面資源配置。分裝三角瓶的容量以不超過(guò)三角瓶容積之一半為宜信息。
⑦ 加塞 在管口塞上棉塞。棉塞可過(guò)濾空氣大力發展,防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)豐富內涵。
⑧ 包扎 加塞后,將試管用線繩捆好更加完善,再在棉塞外包一層報(bào)紙形式,以防止滅菌時(shí)冷凝水潤(rùn)濕棉塞,其外再用一道線繩扎好支撐作用。用記號(hào)筆注明培養(yǎng)基名稱日漸深入。
⑨ 滅菌 將上述培養(yǎng)基以0.1MPa,121℃同時,高壓蒸汽滅菌20 min互動式宣講。
⑩ 擱置斜面 將滅菌的試管培養(yǎng)基豎直放置,冷至50℃左右(以防斜面上冷凝水太多)模式,將試管口端擱在玻棒或其他合適高度的器具上自動化,擱置的斜面長(zhǎng)度以不超過(guò)試管總長(zhǎng)的一半為宜。
2)進(jìn)行恒溫?fù)u床培養(yǎng)的PDA液體培養(yǎng)基
① 稱量 取去皮馬鈴薯180g高品質,分別稱取葡萄糖1g不折不扣、2g、3g各三份。
② 將馬鈴薯切成小塊高效利用,放入鍋中特征更加明顯,加水900mL,煮沸30 min講理論。用雙層紗布濾去馬鈴薯殘?jiān)目赡苄?,濾液加蒸餾水定容到900mL,攪拌均勻服務為一體。
③ 分裝 將煮好的培養(yǎng)基分裝于9個(gè)錐形瓶中問題,每支錐形瓶100mL培養(yǎng)基,編號(hào)(1)-(9)全會精神,用記號(hào)筆注明置于恒溫?fù)u床系統穩定性。
④ 加葡萄糖,利用1mol/L的氫氧化鈉溶液或1mol/L的鹽酸溶液按照下表調(diào)節(jié)pH 先進技術,并向?qū)?yīng)PDA液體培養(yǎng)基(每瓶100mL)中加入相應(yīng)量的葡萄糖 培訓。
⑤ 加塞 攪拌充分后不合理波動,在瓶口塞上棉塞宣講手段。棉塞可過(guò)濾空氣,防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)積極拓展新的領域。
⑧ 包扎 加塞后配套設備,再在棉塞外包一層報(bào)紙,以防止滅菌時(shí)冷凝水潤(rùn)濕棉塞競爭力所在,其外再用一道線繩扎好引人註目。
⑨ 滅菌 將上述培養(yǎng)基以0.1MPa,121℃溝通機製,高壓蒸汽滅菌20 min好宣講,冷卻待用。
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