細(xì)胞培養(yǎng)是將細(xì)胞在體外進(jìn)行繁殖和培養(yǎng),該工作始于20世紀(jì)初機製,現(xiàn)在已經(jīng)成為生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域中*的工具建立和完善,并發(fā)展成為重要的基礎(chǔ)科學(xué)之一。細(xì)胞培養(yǎng)在基礎(chǔ)研究和應(yīng)用生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域如細(xì)胞生物學(xué)參與水平、生理學(xué)大型、藥理學(xué)和毒理學(xué)上的應(yīng)用日益廣泛,減少了試驗(yàn)動(dòng)物的使用數(shù)目明確相關要求,正符合3Rs理論重要意義,即對(duì)待動(dòng)物要有人性(refinement),減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用量(reduction)和盡量找到使用動(dòng)物的替代方法(replacement)的要求。
細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng):
1深化涉外、實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前體系,無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面開展試點,并開啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后攜手共進,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株推進一步,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基經過,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染簡單化。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)明確了方向,以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面系統性。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后,再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株之操作單產提升。
2傳遞、無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品勞動精神,例如試管架開展攻關合作、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置,其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出保供,以利于氣流之流通自行開發。實(shí)驗(yàn)用品以70%ethanol擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)進行部署。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之*無(wú)菌區(qū)域責任,勿在邊緣之非無(wú)菌區(qū)域操作。
3保護好、小心取用無(wú)菌之實(shí)驗(yàn)物品組建,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口特點,亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)首次。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身部署安排,傾斜約45°角取用搖籃,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
4推廣開來、工作人員應(yīng)注意自身之安全推動,須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于來(lái)自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作資源配置,并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)之無(wú)菌操作臺(tái)(至少ClassII)信息。操作過(guò)程中,應(yīng)避免引起aerosol之產(chǎn)生大力發展,小心毒性藥品豐富內涵,例如DMSO及TPA等,并避免尖銳針頭之傷害等產能提升。
5適應性、定期檢測(cè)下列項(xiàng)目:5.1CO2鋼瓶之CO2壓力5.2CO2培養(yǎng)箱之CO2濃度、溫度通過活化、及水盤是否有污染(水盤的水用無(wú)菌水面向,每周更換)支撐作用。5.3.無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)之a(chǎn)irflow壓力,定期更換紫外線燈管及HEPA過(guò)濾膜建設項目,預(yù)濾網(wǎng)(300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng)最為突出,3000小時(shí)/HEPA)。6.水槽可添加消毒劑(Zephrin1:750)相結合,定期更換水槽的水
6高效化、粉末培養(yǎng)基配制好后(加了血清),一般在4度盡量不要超過(guò)1個(gè)月為產業發展,如在-20度存放時(shí)間可長(zhǎng)一些範圍和領域,但也不要超過(guò)3-4個(gè)月,可能對(duì)于永生化細(xì)胞株來(lái)說(shuō)要求不是太高各項要求,細(xì)胞嬌弱更高要求,放置時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。
7新技術、開紫外線照射臺(tái)的時(shí)候共同學習,就將培養(yǎng)基、酶服務為一體、DHANKS液那到室外讓它自然升溫問題。這樣40分鐘后,溫度也升上來(lái)了全會精神。有很多人將他放到37度水浴鍋里加熱系統穩定性。一定要注意水浴鍋的衛(wèi)生,有的常年不清洗集中展示,里面很臟實力增強,容易在外面瓶身上吸附大量細(xì)菌。因此用它的也一定要勤換水探索創新。從水浴鍋那出后帶來全新智能,找個(gè)毛巾插干上面的水。
2025第十屆華南空氣壓縮機(jī)展覽會(huì)
展會(huì)城市:佛山市展會(huì)時(shí)間:2025-05-21