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胎牛血清中的病毒檢查

來(lái)源: 上海威正翔禹生物科技有限公司    2017年10月25日 13:08  
  胎牛血清是實(shí)驗(yàn)室常用的天然培養(yǎng)基狀態。它富含各種營(yíng)養(yǎng),但也容易因母牛存在的病毒感染而攜帶有病毒指導,從而給細(xì)胞培養(yǎng)帶來(lái)潛在的干擾。因此國際要求,不但要從源頭上保證懷孕的母牛是健康的流動性,沒(méi)有各種傳染病(包括沒(méi)有瘋牛病疫情),屠宰場(chǎng)需在政府注冊(cè)過(guò),而且在胎牛血清的質(zhì)檢中持續創新,也要進(jìn)行各種病毒檢查改善,以保證胎牛血清的品質(zhì)。而胎牛血清的批號(hào)協調機製,則保證了每個(gè)批次的生產(chǎn)都是可以追溯的信息化。
 
  在美國(guó),胎牛血清的病毒檢查遵循著9 CFR 113.52 實踐者、9 CFR 113.53聯(lián)邦法令取得明顯成效,并以獸藥委員會(huì)(CVMP)關(guān)于免疫性獸藥生產(chǎn)中應(yīng)用牛血清的指南文件(EMEA/CVMP/743/00-Rev.2)、藥委員會(huì)(CPMP)關(guān)于生物藥生產(chǎn)中牛血清應(yīng)用指南的文件(EMEA/CPMP/BWP/1793/02)為參考貢獻力量,并在美國(guó)藥典(USP)中有所描述使用。而我國(guó)在藥典中目前只有有關(guān)新生牛血清的質(zhì)檢規(guī)定,還沒(méi)有胎牛血清的內(nèi)容發行速度。
 
  在USP提到病毒檢查中更加堅強,建議使用兩種或兩種以上的細(xì)胞系作為檢測(cè)細(xì)胞,其中一種細(xì)胞系應(yīng)為牛源性能。檢測(cè)時(shí)初步建立,添加15%的待測(cè)牛血清培養(yǎng)細(xì)胞至少21天,期間細(xì)胞至少傳代兩次供給。之后觀察是否存在病毒的擴(kuò)增的方法。
 
  如用顯微鏡觀察是否存在細(xì)胞病變效應(yīng)(例如由牛鼻支氣管炎病毒導(dǎo)致)、細(xì)胞染色和鏡下包涵體檢查重要的意義、血吸附檢查((牛副流感3型病毒)持續,并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行針對(duì)如下病毒的特異性的免疫熒光抗體檢查:
 
  Ø牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)
 
  Ø牛細(xì)小病毒
 
  Ø牛腺病毒
 
  Ø牛蘭舌病毒
 
  Ø牛呼吸道合胞病毒
 
  Ø呼腸弧病毒
 
  Ø狂犬病病毒
 
  在其他牛血清的應(yīng)用中,可能還需要檢測(cè)一些其他的病毒再獲。如:
 
  牛赤羽病產品和服務,牛皰疹病毒1(BHV-1)、副流感-3病毒(PI-3)體驗區、牛白血病增多、牛輪狀病毒、牛圓環(huán)病毒有望、牛多瘤病毒進一步推進、冠狀病毒、牛環(huán)曲病毒方案、牛腸道病毒應用的選擇、牛星狀病毒、口蹄疫病毒(FMDV)左右、牛瘟病毒背景下。
 
  總之綜合措施,確定牛血清沒(méi)有病毒感染,無(wú)論對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)自然條件,還是疫苗生產(chǎn)設計標準,都具有非常重要的意義。

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