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豬白細(xì)胞介素-2（IL-2）酶聯(lián)免疫分析

試劑盒使用說(shuō)明書

本試劑盒僅供研究使用事關全面。

檢測(cè)范圍：                                                          96T

20pg/ml-480pg/ml

使用目的：

本試劑盒用于測(cè)定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素-2（IL-2）含量狀態。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬白細(xì)胞介素-2（IL-2）水平技術節能。用純化的豬白細(xì)胞介素-2（IL-2）抗體包被微孔板，制成固相抗體廣泛認同，往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素-2（IL-2）國際要求，再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素-2（IL-2）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物全面協議，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色重要部署。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色工具。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素-2（IL-2）呈正相關(guān)智慧與合力。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬白細(xì)胞介素-2（IL-2）濃度重要的角色。

試劑盒組成

標(biāo)本要求

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取開放要求，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)平臺建設。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)服務機製，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品使用，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性大幅拓展。

操作步驟

1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋更加堅強。

2.         加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑積極性，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔不斷豐富、待測(cè)樣品孔實施體系。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl各有優勢，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）效果較好。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁持續，輕輕晃動(dòng)混勻等多個領域。

3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  

4.         配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.         洗滌：小心揭掉封板膜產品和服務，棄去液體應用擴展，甩干體驗區，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去活動上，如此重復(fù)5次有望，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl導向作用，空白孔除外方案。

7.         溫育：操作同3。

8.         洗滌：操作同5真正做到。

9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl科普活動，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻強化意識，37℃避光顯色15分鐘.

10.     終止：每孔加終止液50μl長期間，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.     測(cè)定：以空白空調(diào)零現場，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）高端化。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

操作程序總結(jié)：

計(jì)算

  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)不久前，OD值為縱坐標(biāo)用上了，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度能力建設；再乘以稀釋倍數(shù)關註；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式無障礙，計(jì)算出樣品濃度連日來，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度認為。

注意事項(xiàng)

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用系統，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存重要意義。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出交流等，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果規劃。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器提高，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差進入當下。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)紮實，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣新體系。

4．  請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線投入力度，做復(fù)孔創造。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定規定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）環境。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染供給。

6．底物請(qǐng)避光保存優勢與挑戰。

7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行經驗分享，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品解決方案，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用有力扭轉。

10. 如與英文說(shuō)明書有異上高質量，以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：廣度和深度；2-8℃深入交流。

2．有效期：6個(gè)月