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蛋白質(zhì)含量的檢測等事項

來源: 南京信帆生物技術有限公司    2020年11月17日 22:18  
  蛋白質(zhì)含量的檢測等事項
 
  一體系流動性、注意事項
 
  1 樣品應是均勻的,若是固體樣品應事先研細過篩帶來全新智能,液體樣要混合均勻實現了超越。
 
  2 樣品放入凱氏燒瓶時,不要黏附瓶頸上,萬一黏附可用少量水緩慢沖下相對開放,以免被檢樣消化不*,使結(jié)果偏低領域。
 
  3 如果稱1g以上的樣品溝通機製,就需要K氏燒瓶小500ml,800~1000ml的更好註入新的動力,這樣的K氏燒瓶對于縮短氨化時間領先水平,加熱的均勻性和*氨化效果較好。
 
  4 有機物分解需要H2SO4量雙重提升,H2SO4應根據(jù)有機物種類不同而加的量就不同戰略布局,如果試樣含脂類高,則加H2SO4多表現明顯更佳,為了提高分解溫度狀態,要大量添加K2SO4,但不能太多指導,也不能太少廣泛認同,太少則氨化不充分。K2SO4和H2SO4的添加比例是:
 
  1g樣品  K2SO4:H2SO4=7g:12ml 這種比例在國內(nèi)外都使用流動性,是*的鍛造。
 
  還有一種比例: K2SO4:H2SO4=10 g:20ml
 
  5 消化時,如不容易呈透明溶液持續創新,可將凱氏燒瓶放冷后改善,加入30%過氧化氫催化劑2~3ml,促使氧化協調機製。
 
  6 在整個消化過程中信息化,不要用強火,保持和緩的沸騰實踐者,使火力集中在凱氏燒瓶底部充分發揮,以免附在壁上的蛋白質(zhì)在無硫酸存在的情況下,使氮有損失管理。
 
  7 如硫酸缺少設計,過多的硫酸鉀會引起氨的損失,這時會形成硫酸氫鉀改進措施,而不與氨作用就此掀開,因此當硫酸過多底物被消耗掉或樣品中脂肪含量過高時,要添加硫酸量今年。
 
  8 消化劑綠色后繼續(xù)消化30分鐘即可
 
  9 混合指示劑在堿性溶液中呈綠色穩步前行,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈紅色,如果沒有溴甲酚綠各有優勢,可單獨使用0.1%甲醛紅乙醇溶液效果較好。
 
  10 氨是否*蒸餾出來,PH試紙檢查餾出液是否為堿性持續。
 
  11 向蒸餾瓶中加入濃堿時等多個領域,往往出現(xiàn)褐色沉淀。這時由于分解促進劑與加入的硫酸銅反應產品和服務,生成氫氧化銅應用擴展,經(jīng)加熱后又分解生成氧化銅的沉淀,有時Cu離子與氨作用生成深蘭色的絡合物增多。
 
  12 蒸餾加NaOH是50%活動上,加的量為H2SO4量的4倍,硫酸量為12ml進一步推進,則NaOH為12×4=48ml導向作用,而且一般高于這個理論值,即加到50~55ml應用的選擇,如果NaOH量加的不夠就變成H2S堅持好, H2S是強酸,使顏色變紅大幅增加。
 
  13 目前都用硼酸吸收液特性,用硼酸代替H2SO4,這樣可省略了反滴定等特點,H2SO4是強酸建言直達,要求較嚴,而硼酸是弱酸將進一步,在滴定時充分發揮,不影響指示劑變色范圍,另外硼酸為吸收液濃度在3%以上可將氨*吸收成就,為保險期間一般用4%重要方式。
 
  二、蛋白質(zhì)的組成及結(jié)構(gòu)
 
  蛋白質(zhì)是由C(碳)系統、H(氫)非常重要、O(氧)、N(氮)組成空間廣闊,一般蛋白質(zhì)可能還會含有P(磷)認為、S(硫)、Fe(鐵)增強、Zn(鋅)重要意義、Cu(銅)交流等、B(硼)、Mn(錳)規劃、I(dian)提高、Mo(鉬)等。這些元素在蛋白質(zhì)中的組成百分比約為:碳50% 進入當下,氫7% 紮實,氧23% ,氮16% 保持競爭優勢,硫0~3% 及其他微量元素進行培訓。一切蛋白質(zhì)都含N元素發展機遇,且各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近長效機製,平均為16%。蛋白質(zhì)系數(shù):任何生物樣品中每1gN的存在全技術方案,就表示大約有100/16=6.25g蛋白質(zhì)的存在分享, 6.25常稱為蛋白質(zhì)常數(shù)。
 
  蛋白質(zhì)是以氨基酸為基本單位構(gòu)成的生物高分子信息化。蛋白質(zhì)分子上氨基酸的序列和由此形成的立體結(jié)構(gòu)構(gòu)成了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的多樣性方式之一。蛋白質(zhì)具有一級、二級新型儲能、三級創新能力、四級結(jié)構(gòu),蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)決定了它的功能範圍。
 
  氨基酸是構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單元求得平衡,蛋白會約含有20種氨基酸,在細胞質(zhì)中的核糖體上空間廣闊,將氨基酸分子互相連接成肽鏈至關重要。一個氨基酸分子的氨基和另一個氨基酸分子的羧基,脫去一分子水而連接起來服務品質,這種結(jié)合方式叫做脫水縮合的發生。通過縮合反應,在羧基和氨基之間形成的連接兩個氨基酸分子的那個鍵叫做肽鍵影響。由肽鍵連接形成的化合物稱為肽重要手段。
 
  三、蛋白質(zhì)的檢測原理
 
  不論常量穩定性、半微量以及微量定氮法它們的原理都是一樣的研究與應用。
 
  1 消化:
 
  樣品與硫酸一起加熱消化,硫酸使有機物脫水更高效。并破壞有機物全面協議,使有機物中的C重要部署、H氧化為CO2和H2O蒸汽逸出,而pro則分解氮工具,與硫酸結(jié)合成硫酸銨智慧與合力,留在酸性溶液中。
 
  2 消化過程中:
 
  在消化過程中添加硫酸鉀可以提高溫度加快有機物分解重要的角色,它與硫酸反應生成硫酸氫鉀開放要求,可提高反應溫度,一般純硫酸加熱沸點330℃平臺建設,而添加硫酸鉀后服務機製,溫度可達400℃,加速了整個反應過程使用。此外大幅拓展,也可以加入硫酸鈉,氫化鉀鹽類來提高沸點更加堅強。其理由隨著消化過程硫酸的不斷地被分解與時俱進,水分的逸出而使硫酸鉀的濃度增大,沸點增加初步建立。加速了有機的分解綜合運用。但硫酸鉀加入量不能太大,否則溫度太高的方法,生成的硫酸氫銨也會分解實事求是,放出氨而造成損失。
 
  為了加速反應過程落到實處,還加入硫酸銅服務水平,氧化gong或硒粉作為催化劑以及加入少量過氧化氫,次氯酸鉀作為氧化劑產品和服務。但為了防止污染通常使用硫酸銅應用擴展。所以有機物全部消化后,出現(xiàn)硫酸銅的蘭綠色多樣性,它具有催化功能發揮效力,還可以作為堿性反應指示劑。
 
  3 蒸餾:
 
  樣液中的硫酸銨在堿性條件下釋放出氨明顯,在這操作中安全鏈,一是加入氫氧化鈉溶液要過量,二是要防止樣液中氨氣逸出創新為先。
 
  4 吸收與滴定:
 
  蒸餾過程中放出的氨可用一定量的標準硫酸或標準鹽酸溶液進行氨的吸收真正做到,然后再用標準氫氧化鈉溶液反滴定過剩的硫酸或鹽酸溶液,從而計算出總氮量創新延展。
 
  半微量或微量定氮通常用硼酸溶液吸收后強化意識,再用標準鹽酸直接滴定長期間,硼酸呈微弱酸性,用酸滴定不影響指示劑變色反應現場,它有吸收氨的作用高端化。
 
  四、步驟
 
  準確稱取樣品中0.50-2.00g→于500ml凱氏瓶中→加10g無水K2SO4→加0.5gCuSO4→加20ml H2SO4→在通風櫥中先以小火加熱我有所應,待泡沫消失后提單產,加大火力,消化至透明無黑粒后至關重要,將瓶子搖動一下使瓶壁炭粒溶于硫酸中→繼續(xù)消化30分鐘→至到樣液呈綠色狀態(tài)發展空間,停止消化,冷卻→加200ml水→連接蒸餾裝置→用硼酸作吸收液→在凱氏瓶中加波動珠數(shù)粒和80ml50% NaOH→立即接好定氮球→加熱→至凱氏瓶內(nèi)殘液減少到三分之一時有所應,取出用水沖洗→用0.1N HCl滴定足了準備。
 
  五、食品中蛋白含量測定的意義
 
  蛋白質(zhì)(protein)是生命的物質(zhì)基礎認為,是有機大分子系統,是構(gòu)成細胞的基本有機物增強,是生命活動的主要承擔者重要意義。沒有蛋白質(zhì)就沒有生命。人體內(nèi)酸堿平衡更加廣闊、水平衡的維持規劃,遺傳信息的傳遞、物質(zhì)的代謝及轉(zhuǎn)運都與蛋白質(zhì)有關可以使用。人及動物只能從食物中得到蛋白質(zhì)及其分解產(chǎn)物來構(gòu)成自身的蛋白質(zhì)進入當下,因此蛋白質(zhì)是人體的重要營養(yǎng)物質(zhì),也是食品中重要營養(yǎng)指標稍有不慎。
 
  在各種食品中重要作用,蛋白質(zhì)的含量各不相同。測定食品中蛋白含量最為顯著,對評價食品的營養(yǎng)價值尤為突出,合理開發(fā)利用食品資源、提高產(chǎn)品質(zhì)量環境、優(yōu)化食品配方空間載體、知道經(jīng)濟核算及生產(chǎn)過程控制均具有極其重要的意義。
 

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