低熔點瓊脂糖 細胞培養(yǎng)
低熔點瓊脂糖 細胞培養(yǎng)
正確的加熱方式對瓊脂糖的充分溶解和凝結(jié)至關(guān)重要取得明顯成效,在此,我們提供以下幾點作為正確制備瓊脂糖凝膠的操作參考數據。
? 瓊脂糖加熱溶解所需時間短創新的技術。
? 瓊脂糖在 TAE 或者 TBE 緩沖液中不溶解,加熱時顯著,瓊脂糖顆粒水化形成溶液快速增長,水化是時間依賴的,不同的瓊脂糖水化點不同占。瓊脂糖純度高高質量,超微顆粒,非常適合作為電泳實驗載體動手能力。對比于其他的瓊脂糖逐步改善,瓊脂糖水化速度快,使用者無需煮沸過長時間提升,否則易導致膠液濃稠大大提高,不利于混勻,凝膠后易破損研究成果。
瓊脂糖凝膠制備
用 1×TBE 溶液配制 1%濃度瓊脂糖凝膠
1. 用于制備膠液的錐形瓶體積應為膠液體積的 2-4 倍取得了一定進展,緩慢向緩沖液中加入瓊脂糖,邊加邊攪拌體驗區,防止瓊脂糖聚集增多。記錄瓶體和溶液總重量。
2. 微波爐高火加熱 30s有望,根據(jù)配制的溶液體積調(diào)整加熱時間進一步推進。加熱時間與微波爐、瓶體大小和瓊脂糖濃度有關(guān)方案。
3. 搖勻瓊脂糖溶液應用的選擇。
4. 再次高火加熱 30s,搖勻瓊脂糖溶液左右。
5. 將溶液再次放回微波爐背景下,高火加熱至沸騰(大約 10-35s)綜合措施。接觸移動時瓊脂糖膠液可能會劇烈沸騰,小心操作自然條件,避免燙傷設計標準。從微波爐拿出后,室溫冷卻 1-2min互動互補,輕輕搖晃使液體里的氣泡溢出發揮重要帶動作用。
6. 重新放回微波爐,高火加熱成就,使之沸騰約 15s重要方式,觀察瓊脂糖的溶解狀態(tài),如果仍有顆粒存在系統,重復該步驟直至所有晶體全部溶解非常重要。
7. 待瓊脂糖溶解成液體,重新稱量總重量空間廣闊,計算蒸發(fā)液體量營造一處,用水補齊至原始重量,搖勻液體知識和技能。
8. 建議膠液冷卻至 50-55℃時灌膠取得顯著成效,有利于凝膠孔徑均勻一致,不至于損傷制膠儀實現。灌膠前輕輕搖晃瓊脂糖溶液不容忽視,釋放膠液中殘存的氣泡。
9. 向制膠槽中灌膠服務體系,一般膠的厚度 3-5mm進入當下,灌膠后盡量排除梳孔之間或底部的氣泡。
10. 在室溫放置(30-45min)使膠充分凝結(jié)效高化。