詳見說(shuō)明書
預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker(3.3kD-31.0kD)
預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker 染色液
預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker 染色液產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品包含預(yù)染的3種多肽和2種低分子量蛋白質(zhì)組成,分子量范圍為3. 3kD-31. 0kD力度∶鞔_了方向?梢杂糜谥苯佑^察蛋白質(zhì)電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)膜效果。經(jīng)Tricine-甘油SDS-PAGE凝膠電泳時(shí)以及轉(zhuǎn)移到PVDF或NC膜上可看到清晰的5條藍(lán)色的蛋白條帶業務指導。本品為蛋白質(zhì)和多肽混合物的凍干粉改進措施,每種預(yù)染蛋白含量約為40μg,配有一支1×上樣緩沖液長足發展。
使用說(shuō)明:
1. 開封后高產,溶于200 μ1 1×上樣緩沖液,可根據(jù)需要進(jìn)行小量分裝發揮作用,每管10 μl良好,-20℃貯存,每次取一管使用銘記囑托,避免反復(fù)凍融引領。
2. 使用前取分裝后的小管室溫融化后即可上樣電泳。
凝膠制備及染色注意事項(xiàng):
1. 先配制分離膠示範,聚合后再配制夾層膠應用前景,最后配制濃縮膠,3種膠的制膠體積比為4:1.5:1運行好。電泳時(shí)首次,30V跑1-2h后,待指示前沿到達(dá)分離膠上沿時(shí)部署安排,把電壓調(diào)至100V搖籃,至電泳結(jié)束,整個(gè)電泳過(guò)程大約需要6-8h推廣開來。
2. 電泳之后可將膠置于固定液中固定20min推動,再進(jìn)行染色相對較高,能得到較好的蛋白條帶;如時(shí)間不允許信息,也可不進(jìn)行固定直接染色相關。如果使用配方7進(jìn)行染色時(shí)效果不好或考慮其毒性,請(qǐng)選擇本公司的考馬斯亮藍(lán)蛋白膠快速染色液(貨號(hào):P1300)豐富內涵,該產(chǎn)品具有染色快生產效率,無(wú)毒,靈敏性高等特點(diǎn)適應性,是常規(guī)染色液的替代品保持穩定。
3. 由于多肽所含的氨基酸數(shù)目較少,因此如該多肽含有過(guò)多的極性氨基酸(堿性或酸性)面向,則會(huì)影響其在SDS-PAGE圖上的條帶遷移率支撐作用,即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離。
4. 由于SDS-PAGE的圖譜上互動式宣講,蛋白質(zhì)對(duì)數(shù)分子量和遷移率成正比直線關(guān)系的分子量范圍為15,000-200,000效高性,因此對(duì)于分子量小于10000的蛋白質(zhì)或多肽的分子量,只能根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)分子量進(jìn)行估計(jì)自動化,推斷其是否落入預(yù)測(cè)的分子量范圍提升。
5. 由于超低分子量多肽(3000及3000以下),極易從凝膠上浸出不折不扣,因此染色及脫色時(shí)間不宜太長(zhǎng)支撐能力,脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過(guò)久,否則條帶會(huì)消失高效利用。