MTT/細(xì)胞毒性/增殖檢測試劑盒產(chǎn)品簡介:
MTT 可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物 formazan,在特定溶劑存在的情況下最深厚的底氣,可以被溶解協同控製,然后通過酶標(biāo)儀可以測定 490nm 波長附近的吸光度。細(xì)胞增殖越多越快傳遞,則吸光度越高試驗;細(xì)胞毒性越大勞動精神,則吸光度越低。
使用說明:
1.收集對數(shù)期細(xì)胞製度保障,調(diào)整細(xì)胞懸液濃度預下達,分于 96 孔板,每孔 180μL統籌推進,3000-10000 個細(xì)胞/孔方案。
2.置 37℃、5%CO2 溫箱培養(yǎng)使細(xì)胞貼壁了解情況,培養(yǎng) 6-24 小時深入。
3.加入適當(dāng)濃度的受試化合物,繼續(xù)培養(yǎng)適當(dāng)時間特點。
4.小心吸去上清深刻變革,加入 90μL 新鮮培養(yǎng)液,再加入 10μL MTT 溶液和諧共生,繼續(xù)培養(yǎng) 4 h質生產力。
5.然后吸掉上清,每孔加入 110μL Formazan 溶解液技術交流,置搖床上低速振蕩 10 min先進的解決方案,使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀 490 nm 處測量各孔的吸光值創造更多。
6.同時設(shè)置調(diào)零孔(培養(yǎng)基宣講活動、MTT、 Formazan 溶解液)工藝技術,對照孔(細(xì)胞效率、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液近年來、MTT講道理、 Formazan 溶解液),每組設(shè)定 3 復(fù)孔技術先進。
MTT/細(xì)胞毒性/增殖檢測試劑盒注意事項:
1.由于使用 96 孔板進行檢測更多的合作機會,如果細(xì)胞培養(yǎng)時間較長,一定要注意蒸發(fā)的問題認為。一方面有效保障,由于96 孔板周圍一圈最容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法長效機製,改加 PBS講實踐,水或培養(yǎng)液;另一方面奮戰不懈,可以把 96 孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方為產業發展,以緩解蒸發(fā)範圍和領域。
2.MTT 溶液為黃色需避光保存,長時間光照會導(dǎo)致失效各項要求。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時,請勿使用越來越重要的位置。Formazan 溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時可以 37℃水浴孵育以促進溶解新技術,并且必須在全部溶解并混勻后使用。
3.為了您的安全和健康順滑地配合,請穿實驗服并戴一次性手套操作深入。