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分選型流式細(xì)胞儀

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日本On-chip無損傷分選無污染分選

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產(chǎn)品描述

傳統(tǒng)的細(xì)胞分選通過Jet-in-Air方式高速分離細(xì)胞空白區,但會對細(xì)胞產(chǎn)生一定的損害,對研究細(xì)胞原本的性能及特性造成很大的不便信息化。 例如形勢,在干細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞的研究中,分選后得到的細(xì)胞無法進(jìn)行培養(yǎng)的案例時有發(fā)生取得明顯成效。

日本On-chip生物技術(shù)有限公司針對以往傳統(tǒng)流式分選的弊端約定管轄,于2012年推出了一款對細(xì)胞無損傷,確保臨床應(yīng)用的無污染推動並實現,可以無菌處理操作的流式細(xì)胞儀(On-Chip Sort)薄弱點。 這款小型的儀器使用微流控芯片模塊,利用空氣壓力控制優化程度,對模塊內(nèi)的樣品流進(jìn)行細(xì)胞分離積極性,最多配置3激光6熒光。以低壓對細(xì)胞進(jìn)行分選不斷豐富,從而實現(xiàn)無損傷分離實施體系。對于易損傷的神經(jīng)細(xì)胞,在使用此裝置進(jìn)行分選以后各有優勢,仍然可以充分保持分化功能效果較好。另外,由于使用一次性交換型模塊,各個樣品間保證無污染等多個領域,也無需清洗流路通道再獲,即使長時間不使用的狀態(tài)貢獻,只要拿一個新的篩選模塊互動式宣講,就立即可以開始使用結構重塑,簡單方便廣泛關註。

其創(chuàng)新性和實用性O(shè)n-chip Sort在2013年10月獲得了東京都創(chuàng)新技術(shù)優(yōu)勝獎解決問題。


產(chǎn)品特點

使用一次性交換型微流控芯片模塊分選

分選時對鞘液沒有要求(可使用海水效高化、培養(yǎng)液等)

對細(xì)胞進(jìn)行無損傷分選

無污染分選(可放置在生物安全柜中)

最多可配置3激光6熒光(405nm,488nm,561nm,637nm,785nm)

操作簡單薄弱點,免校正光路和液流

易維護(hù)求得平衡,無需清洗保養(yǎng)

從On-chip Flow(分析型)可直接升級為On-chip Sort(分選型)


產(chǎn)品參數(shù)


On-chip Flow

On-chip Sort

光學(xué)系統(tǒng)

激光器

最多配置3激光(405nm導向作用、488nm方案、561nm637nm十大行動、785nm

檢測參數(shù)

前向散射光(FSC)左右,側(cè)向散射光(SSC),6PMT(最多10參數(shù))

檢測靈敏度

FSC < 0.5um特性,SSC < 1.0um

熒光靈敏度

< 200 MESF FITC

數(shù)據(jù)分析

4個動態(tài)范圍傳承,18bit

脈沖分析

高度、面積建言直達、寬度

檢測波長

FL1(445/20nm), FL2(543/22nm), FL3(591.5/43nm) FL4(607/24nm), FL5(676/37nm), FL6( >710nm)

液流系統(tǒng)

流動室芯片

可更換的微流控芯片

芯片材料

丙烯酸樹脂

液流通道大小

80μm × 50μm

80μm × 80μm

流速

500~2000 mm/sec

500mm/sec

鞘液

含有FBS的培養(yǎng)基也可

樣品體積

10~300ul

10~100ul

鞘液體積

1~3ml

分析和分選

分選方法

模塊內(nèi)流體推送方式

純度

>95%(取決于細(xì)胞濃度)

得率

>80%

細(xì)胞損傷

交叉污染

是否無菌

壓力

0.3~3PSI

0.3PSI

檢測速度

4000 events/sec

分選速度

20targets/s

開機

幾分鐘

5min

關(guān)機

10s (清洗不是必要程序)

安全性

氣溶膠產(chǎn)生

大小和重量

大小

(W*H*W多種,mm

520*330*390

620*330*390

重量(kg)

35kg

45kg

PC和軟件

PC

筆記本

OS

Windows7,64bit

數(shù)據(jù)格式

自有格式以及FCS 3.0



應(yīng)用領(lǐng)域

包括,但不限于血液中的癌細(xì)胞CTC充分發揮,神經(jīng)細(xì)胞用上了,細(xì)菌的存活數(shù)量,微生物能力建設,霉菌關註,精子,蛋白質(zhì)無障礙,淋巴腺連日來,系統(tǒng)單元(乳齒的齒髓),再生細(xì)胞(iPS ES細(xì)胞)認為。

※獲得諾貝爾醫(yī)學(xué)獎的京都大學(xué)iPS研究院等多數(shù)客戶在使用


1. 神經(jīng)干細(xì)胞無損傷分選培養(yǎng)再驗證對比

傳統(tǒng)分選與on-chip分選的神經(jīng)細(xì)胞系統,經(jīng)過7天的培養(yǎng)對比觀察,on-chip分選出的神經(jīng)細(xì)胞的生理特性與未分選之前保持高度一致重要意義。



2. 牙髓干細(xì)胞無損傷分選

來源于退出齒的牙髓(DPSC)交流等,牙周韌帶(PDLSC),牙囊(DFSC)規劃,和根尖乳頭(APSC)提高,比骨髓干細(xì)胞(BMSC)的四種間充質(zhì)干細(xì)胞,相對于骨髓干細(xì)胞來說具有更強的增殖能力和多能干性因此是一種被證明的更適于再生醫(yī)學(xué)的干細(xì)胞紮實,通過On-chip sort分選儀獲取來源于硬組織的細(xì)胞效高化,之后移植了從撤出齒與骨髓來源的人類間質(zhì)干細(xì)胞的四種干細(xì)胞。所得到的細(xì)胞仍然保持干細(xì)胞的特性進行培訓,驗證了on-chip對干細(xì)胞無損傷分選的應(yīng)用發展機遇。



3. 無以倫比的循環(huán)腫瘤細(xì)胞 CTC精確分選

On-chip分選儀因其的性能,可被用于細(xì)胞治療及細(xì)胞診斷法治力量, 能夠精確檢測和分離循環(huán)腫瘤細(xì)胞;用on-chip對各種癌癥病人超低量血液中的CTC進(jìn)行分離分享,分選后的細(xì)胞可用于培養(yǎng)跟蹤及優(yōu)化選擇的藥物和分析基因變異共享,區(qū)別于CellSearchisoflux等分選方式方式之一,On-chip采用CD45-陰性排除法生動,不依賴于EpCAM,綜合CK標(biāo)記 創新能力,對 KATO-III,A549,PC-14CTC識別及捕獲新品技,準(zhǔn)確率分別高達(dá)93.8±5.5%82.4±8.5%廣度和深度,96.0±8.5%深入交流,相對Cellsearch74.7%28.8%0.0%加強宣傳,on-chip的無損分選技術(shù)對CTC的分選精確度有了質(zhì)飛躍性 臺上與臺下。


4. 精子分選無損傷分選

用常規(guī)的流式細(xì)胞儀檢測,在通過噴嘴時技術發展,精子的尾巴易纏繞集聚效應,無法達(dá)到單細(xì)胞檢測;而且溫度的變化重要手段,精子易失活互動講;分選時,精子頭和尾方向不一致像一棵樹,有可能無法包裹在同一個液滴中過程中,電荷分選受影響較大。On-chip無損傷分選技術(shù)全面協議,采用微流控低壓分選重要部署,可精確無損傷分選活性精子。

精子經(jīng)PI(只能染死細(xì)胞)和SYTO9(可以染活細(xì)胞和死細(xì)胞)染色后分選工具。分選活的精子(PI-SYTO9+)可在收集槽中觀測智慧與合力。



5. 血細(xì)胞分選----形態(tài)保存完好比較

On-chip分選出的粒細(xì)胞相對傳統(tǒng)分選方式,細(xì)胞形態(tài)保留完好,進(jìn)一步證實On-chip的在血細(xì)胞臨床領(lǐng)域的無損傷分選的可靠性開放要求。





6. 高鹽濃度培養(yǎng)的牡蠣派琴蟲分選

牡蠣派琴蟲適合在高鹽濃度下生存向好態勢,改變環(huán)境,活性大受影響服務機製,利用On-chip無損分選技術(shù)及多種鞘液可選的特性貢獻力量,對比原始培養(yǎng)液及PBS做鞘液分選結(jié)果,培養(yǎng)后1hPI染色做活性鑒定大幅拓展,結(jié)果顯示原始培養(yǎng)液分選獲得細(xì)胞無損傷發行速度,而PBS分選活性極大降低。驗證了on-chip在海洋及水質(zhì)監(jiān)測領(lǐng)域的應(yīng)用與時俱進。

Collaboration with Dr. Hirokazu SAKAMOTO, the Univ. of Tokyo



7. 酵母細(xì)胞的活/死細(xì)胞進(jìn)行鑒定和分選

酵母細(xì)胞以不同的加熱時間進(jìn)行處理性能,經(jīng)SYTO-9PI染色后,在on-ship sort上檢測與分選綜合運用,On-chip Sort 能夠清楚的識別活細(xì)胞和死細(xì)胞群供給;對經(jīng)加熱處理40min的細(xì)胞樣品分選活和死的細(xì)胞群,并且在培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)體系。死細(xì)胞沒有長出克隆保障性,而活細(xì)胞長出了40個克隆。充分證實了On-chip Sort分選的準(zhǔn)確性責任製。




應(yīng)用舉例

1  分選老鼠的胎兒腦部海馬神經(jīng)細(xì)胞

使用傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀和On-chip Sort對分選前后的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)十分落實,分選后使用PI染色發(fā)現(xiàn)細(xì)胞沒有什明顯差別,但3天后細(xì)胞的分化增值出現(xiàn)差異化促進善治。

圖1 神經(jīng)細(xì)胞的無損傷分選

傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀分選的細(xì)胞在后續(xù)培養(yǎng)中沒有形成軸突擴大,Onchip Sort處理過的細(xì)胞和未做分選處理的細(xì)胞一樣形成軸突 。

本研究是和東京工科大學(xué)的鈴木郁郎先生共同研究的成果發揮效力。

2   精子分選

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