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GE常用填料及原理

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一行業內卷、離子交換層析

  離子交換層析根據(jù)化合物的凈電荷進(jìn)行分離。帶負(fù)電荷或正電荷的官能團(tuán)共價結(jié)合于固相載體基質(zhì)逐漸完善,分別成為陽離子交換劑和陰離子交換劑參與能力。當(dāng)一個帶電荷的分子加入到帶有相反電荷的交換劑時,它就會被吸附是目前主流,同時充分發揮,帶相同電荷的離子和中性分子則被洗脫到層析柱的外水體積里。帶電荷分子的結(jié)合是可逆的充分發揮,通尺x擇適用?捎名}或PH梯度洗脫吸附的分子管理。

 離子交換層析可以有多種應(yīng)用,包括分離和純化生物分子業務指導,分離無機(jī)離子改進措施,試劑和水的去離子化,鹽轉(zhuǎn)換以及去除金屬離子長足發展、溴化乙錠和SDS今年。

 兩性化合物的分離策略。如果分子在PH高于其等電點時穩(wěn)定結構不合理,可使用陰離子交換樹脂動手能力。如果分子在PH低于其等電點時穩(wěn)定,則使用陽離子交換樹脂意見征詢。

美國GE(原安瑪西亞)層析填料(常用型號)
離子交換填料: 規(guī)格
17-0510-01QSepharoseF.F 300ml
17-0510-04QSepharoseF.F 5L
17-0510-05QSepharoseF.F 10L
17-0729-01SPSepharoseF.F 300ml
17-0729-04SPSepharoseF.F 5L
17-0729-05SPSepharoseF.F 10L
17-0709-01DEAESepharoseF.F 500ml
17-0709-05DEAESepharoseF.F 10L
17-0719-01CMSepharoseF.F 500ml
17-0719-05CMSepharoseF.F 10L
17-1275-02SOURCE30Q 200ml
17-1275-03SOURCE30Q 1L
17-1014-03QSepharoseH.P. 1L
17-1087-03SPSepharoseH.P. 1L

二提升、親和層析

  親和層析過程中,配體與待分離分子具有特定的親和力示範,共價結(jié)合于固體之上應用前景。樣品混合液加入到這些基質(zhì)形成的層析柱載體時,目標(biāo)分子(如蛋白運行好、多肽首次、DNA片段等)與固定在基質(zhì)上的配體結(jié)合,而混合液中不具親和力的組分則析出部署安排。通過改變PH值搖籃、濃鹽度、使用有機(jī)溶劑或加入與配體競爭性結(jié)合的分子生產能力,則可以將目標(biāo)分子洗脫下來標準。

美國GE(原安瑪西亞)層析填料(常用型號)
親和層析填料:
17-0575-02ChelatingSepharoseFastFlow 500ml
17-0575-04ChelatingSepharoseFastFlow 5L
17-1279-03rProteinASepharoseFastFlow 200ml
17-1279-04rProteinASepharoseFastFlow 1L
金屬螯合填料:

17-0920-07填料名稱:IMACSepharoseHighPerformance

17-0921-09填料名稱:IMACSepharose6FF

三、分子量排阻層析(又名分子篩層析堅持好、凝膠過濾層析)

分子量排阻層析(SEC)又稱凝膠過濾層析即將展開,它根據(jù)分子量大小來分離分子。凝膠基質(zhì)由特定大小孔隙的球形小珠組成不同分子量的分子從孔中排阻通過特性,發(fā)生分離傳承。小分子進(jìn)入孔內(nèi),會延滯它們通過層析柱建言直達,而大分子避開孔多種,洗脫入層析柱外水體積。因此充分發揮,樣品根據(jù)分子量大小進(jìn)行分離發展成就,并依照分子量遞減順序洗脫。

依據(jù)層析目的和所需的分辨率來選擇操作條件和介質(zhì)。分子量排阻層析中一種常規(guī)的方法為基團(tuán)分離開展面對面,包括:

脫鹽-目標(biāo)分子洗脫出來系統,而小分子保留在凝膠孔內(nèi)。為了獲得理想的分離自動化,基質(zhì)的分子量排阻限度應(yīng)比目標(biāo)分子小提升。

分級分離-一定分子量范圍的分子在凝膠基質(zhì)內(nèi)分離高品質。使用這種方法時不折不扣,目標(biāo)分子應(yīng)當(dāng)在凝膠的分級分離范圍以內(nèi)。

分子量排阻層析常規(guī)應(yīng)用包括蛋白分級分離及分子量確定資源優勢、核酸分離高效利用、質(zhì)粒純化和多糖分級分離。

層析分辨率取決于顆粒大小估算,孔徑大小講理論、流速、層析柱尺寸和樣品體積不要畏懼。通常服務為一體,低流速(2-10cm/hr)、細(xì)長柱逐漸顯現、小顆粒凝膠進行培訓、小樣品體積(總床體積的1-5%)、2倍的分子量差異以及相同的溶液粘度長效機製,可以獲得分辨率法治力量。如果用于脫鹽,様品體積則可達(dá)總床體積的30-40%分享,并可使用短粗柱共享。

美國GE(原安瑪西亞)層析填料(常用型號)
凝膠過濾填料:
17-0612-01SephacrylS-100HR 750ml
17-0612-05SephacrylS-100HR 10L
17-0584-01SephacrylS-200HR 750ml
17-0584-05SephacrylS-200HR 10L
17-0149-01Sepharose4FastFlow 1L
17-0149-05Sepharose4FastFlow 10L
17-0033-01SephadexG-25Medium 100g
17-0033-02SephadexG-25Medium 500g
17-1044-01Superdex75prepgrade 150ml
17-1044-02Superdex75prepgrade 1L
17-1043-01Superdex200prepgrade 150ml
17-1043-02Superdex200prepgrade 1L

四、疏水作用層析

疏水作用層析(HIC)根據(jù)化合物的疏水性進(jìn)行分離方式之一;帶有疏水和親水基團(tuán)的樣品分子在高鹽緩沖液中加入到HIC層析柱生動,緩沖液中的鹽降低了樣品的溶解度。由于總?cè)芙舛认陆祫撔履芰?,裸露在外的疏水基團(tuán)就被介質(zhì)吸附新品技。化合物的疏水性越強(qiáng)溝通機製,需要加入用來提高結(jié)合力的鹽就越少好宣講。通常依照疏水性的遞增次序,用遞減鹽梯度來洗脫層析柱內(nèi)的樣品領先水平,也可以在洗脫中加入溫和的有機(jī)調(diào)節(jié)物或洗滌劑來完成。

美國GE(原安瑪西亞)層析填料(常用型號)
疏水層析填料:
17-0980-01ButylSepharose4FastFlow 200ml
17-0946-02OctylSepharose4FastFlow 200ml
17-0965-05PhenylSepharose6FastFlow(lowsub) 200ml
17-0965-03PhenylSepharose6FastFlow(lowsub) 1L
17-0973-05PhenylSepharose6FastFlow(highsub) 200ml
17-0973-03PhenylSepharose6FastFlow(highsub) 1L

五、羥基磷灰石層析

羥基磷灰石(Ca5(PO4)3OH)2是磷酸鈣的一種,對分離一些其它層析和電泳技術(shù)無法區(qū)分的蛋白具有*的選擇性和分辨率事關全面。羥基磷灰石層析適應(yīng)從初捕獲到完善的任何步驟表現明顯更佳。應(yīng)用于以下分離和純化:

·不同種類的單克隆和多克隆抗體·區(qū)分超螺旋與線性DNA

·輕鏈組成不同的抗體·區(qū)分雙鏈DNA與單鏈DNA

·抗體片斷·病毒·同工酶


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