iTRAQ定量蛋白質組學:iTRAQ (isobaric tags for relative and absolute quantitation)技術是由美國應用生物系統公司ABI 研發(fā)的一種多肽體外標記技術線上線下。該技術采用4種或8種同位素編碼的標簽發揮重要作用,通過特異性標記多肽的氨基基團,爾后進行串聯質譜分析數據顯示,可同時比較4種或8種不同樣品中蛋白質的相對含量或含量高質量。
iTRAQ定量蛋白質組學:iTRAQ (isobaric tags for relative and absolute quantitation)技術是由美國應用生物系統公司ABI 研發(fā)的一種多肽體外標記技術。該技術采用4種或8種同位素編碼的標簽記得牢,通過特異性標記多肽的氨基基團註入了新的力量,爾后進行串聯質譜分析,可同時比較4種或8種不同樣品中蛋白質的相對含量或含量更多可能性。
iTRAQ定量蛋白質組學iTRAQ和tmt的技術原理*一樣去創新,所不同的是二者的分子結構有差異。與SILAC相比(標記蛋白質)緊迫性,iTRAQ和TMT是對肽段進行標記的結構。依據iTRAQ/TMT標簽的質量數差異,通過MS實現對多組樣品中的蛋白質進行相對定量:
SILAC是通過一級MS( MSl)對蛋白質進行定量高效,而iTRAQ/TMT是通過二級MS( MS/MS.MS2)進行定量的iTRAQ/TMT幾乎能兼容所有來源的蛋白質樣品溝通協調,并且能同時分析多達8-10組的樣品要素配置改革,分析通量高。
iTRAQ定量蛋白質組學
1保障性、分別提取蛋白質并定量帶動產業發展;
2、Trypsin分別對蛋白進行酶解十分落實,提取肽段倍增效應;
3、用不同質量數的iTRAQ/TMT標簽分別對肽段樣品進行標記:
4製造業、標記完成后多樣性,混合樣品,用SCX進行組分分離(15-20組分)新格局;
5、對每個組分進行LC-MS分析:
6安全鏈、蛋白質鑒定與定量分析競爭力,篩選差異表達的蛋白;
7進一步完善、生物學實驗驗證(Western blot集聚,EUSA等):
iTRAQ定量蛋白質組學技術優(yōu)勢
1、高通量調整推進,能同時進行多達8-10組樣品蛋白質組的定性與定量分析狀況;
2、幾乎兼容所有來源的樣品(動植物組織機製、細菌全過程、血液等);
3探討、實驗周期短不負眾望。
iTRAQ定量蛋白質組學
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