国产一级一级理论片一区二区_久久综合图区亚洲综合图区_国产精品V欧美精品av日韩_日韩精品成人在线_亚洲欧美日韩动漫_国产精品一二三区在线观看公司_日韩成人无码一区二区三区

色譜法的分類及分離原理

色譜法分類
按兩相的物理狀態(tài)可分為：氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC)。氣相色譜法適用于分離揮發(fā)性化合物廣泛應用。GC根據(jù)固定相不同又可分為氣固色譜法(GSC)和氣液色譜法(GLC)關註度，其中以GLC應(yīng)用。液相色譜法適用于分離低揮發(fā)性或非揮發(fā)性哪些領域、熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)敢於挑戰。LC同樣可分為液固色譜法(LSC)和液液色譜法(LLC)。此外還有超臨界流體色譜法(SFC)求索，它以超臨界流體（界于氣體和液體之間的一種物相）為流動(dòng)相（常用CO2）讓人糾結，因其擴(kuò)散系數(shù)大，能很快達(dá)到平衡穩定發展，故分析時(shí)間短基石之一，特別適用于手性化合物的拆分。  按原理分為吸附色譜法(AC)增持能力、分配色譜法(DC)共同努力、離子交換色譜法(IEC)行業內卷、排阻色譜法(EC，又稱分子篩逐漸完善、凝膠過濾(GFC)參與能力、凝膠滲透色譜法(GPC）和親和色譜法。（此外還有電泳是目前主流。）  按操作形式可分為紙色譜法(PC)充分發揮、薄層色譜法(TLC)、柱色譜法充分發揮。

色譜分離原理

高效液相色譜法按分離機(jī)制的不同分為液固吸附色譜法提高、液液分配色譜法（正相與反相）、離子交換色譜法的特性、離子對(duì)色譜法及分子排阻色譜法交流。

1．液固色譜法 使用固體吸附劑，被分離組分在色譜柱上分離原理是根據(jù)固定相對(duì)組分吸附力大小不同而分離提供堅實支撐。分離過程是一個(gè)吸附－解吸附的平衡過程還不大。常用的吸附劑為硅膠或氧化鋁，粒度5~10μm信息化技術。適用于分離分子量200~1000的組分發揮作用，大多數(shù)用于非離子型化合物，離子型化合物易產(chǎn)生拖尾逐步顯現。常用于分離同分異構(gòu)體銘記囑托。

2．液液色譜法 使用將特定的液態(tài)物質(zhì)涂于擔(dān)體表面，或化學(xué)鍵合于擔(dān)體表面而形成的固定相自動化裝置，分離原理是根據(jù)被分離的組分在流動(dòng)相和固定相中溶解度不同而分離示範。分離過程是一個(gè)分配平衡過程。  涂布式固定相應(yīng)具有良好的惰性有很大提升空間；流動(dòng)相必須預(yù)先用固定相飽和提供了有力支撐，以減少固定相從擔(dān)體表面流失；溫度的變化和不同批號(hào)流動(dòng)相的區(qū)別常引起柱子的變化前景；另外在流動(dòng)相中存在的固定相也使樣品的分離和收集復(fù)雜化進一步意見。由于涂布式固定相很難避免固定液流失，現(xiàn)在已很少采用」蚕響?，F(xiàn)在多采用的是化學(xué)鍵合固定相生產能力，如C18、C8示範推廣、氨基柱堅持好、氰基柱和苯基柱。  液液色譜法按固定相和流動(dòng)相的極性不同可分為正相色譜法(NPC)和反相色譜法(RPC)積極參與。  正相色譜法 采用極性固定相（如聚乙二醇問題分析、氨基與腈基鍵合相）培養；流動(dòng)相為相對(duì)非極性的疏水性溶劑（烷烴類如正已烷、環(huán)已烷）更加完善，常加入乙醇形式、異丙醇、四氫呋喃支撐作用、等以調(diào)節(jié)組分的保留時(shí)間日漸深入。常用于分離中等極性和極性較強(qiáng)的化合物（如酚類、胺類同時、羰基類及氨基酸類等）互動式宣講。 

反相色譜法 一般用非極性固定相（如C18、C8）模式；流動(dòng)相為水或緩沖液自動化，常加入甲醇、乙腈高品質、異丙醇不折不扣、丙酮、四氫呋喃等與水互溶的有機(jī)溶劑以調(diào)節(jié)保留時(shí)間資源優勢。適用于分離非極性和極性較弱的化合物高效利用。RPC在現(xiàn)代液相色譜中應(yīng)用廣泛，據(jù)統(tǒng)計(jì)估算，它占整個(gè)HPLC應(yīng)用的80%左右講理論。  隨著柱填料的快速發(fā)展，反相色譜法的應(yīng)用范圍逐漸擴(kuò)大基礎上，現(xiàn)已應(yīng)用于某些無機(jī)樣品或易解離樣品的分析各領域。為控制樣品在分析過程的解離，常用緩沖液控制流動(dòng)相的pH值取得顯著成效。但需要注意的是新模式，C18和C8使用的pH值通常為2.5~7.5（2~8），太高的pH值會(huì)使硅膠溶解不容忽視，太低的pH值會(huì)使鍵合的烷基脫落。有報(bào)告新商品柱可在pH 1.5~10范圍操作服務體系。

3．離子交換色譜法 固定相是離子交換樹脂說服力，常用苯乙烯與二乙烯交聯(lián)形成的聚合物骨架，在表面未端芳環(huán)上接上羧基分析、磺酸基（稱陽離子交換樹脂）或季氨基（陰離子交換樹脂）表示。被分離組分在色譜柱上分離原理是樹脂上可電離離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的離子及被測組分的離子進(jìn)行可逆交換，根據(jù)各離子與離子交換基團(tuán)具有不同的電荷吸引力而分離非常激烈。  緩沖液常用作離子交換色譜的流動(dòng)相競爭力所在。被分離組分在離子交換柱中的保留時(shí)間除跟組分離子與樹脂上的離子交換基團(tuán)作用強(qiáng)弱有關(guān)外引人註目，它還受流動(dòng)相的pH值和離子強(qiáng)度影響。pH值可改變化合物的解離程度溝通機製，進(jìn)而影響其與固定相的作用好宣講。流動(dòng)相的鹽濃度大，則離子強(qiáng)度高領先水平，不利于樣品的解離，導(dǎo)致樣品較快流出。離子交換色譜法主要用于分析有機(jī)酸戰略布局、氨基酸事關全面、多肽及核酸。

4．離子對(duì)色譜法 又稱偶離子色譜法狀態，是液液色譜法的分支技術節能。它是根據(jù)被測組分離子與離子對(duì)試劑離子形成中性的離子對(duì)化合物后，在非極性固定相中溶解度增大廣泛認同，從而使其分離效果改善聯動。主要用于分析離子強(qiáng)度大的酸堿物質(zhì)。 分析堿性物質(zhì)常用的離子對(duì)試劑為烷基磺酸鹽共同努力，如戊烷磺酸鈉行業內卷、辛烷磺酸鈉等。另外高氯酸新的動力、三也可與多種堿性樣品形成很強(qiáng)的離子對(duì)的過程中。  分析酸性物質(zhì)常用四丁基季銨鹽，如四丁基溴化銨廣泛關註、四丁基銨磷酸鹽促進進步。 離子對(duì)色譜法常用ODS柱（即C18），流動(dòng)相為甲醇-水或乙腈-水優勢領先，水中加入3~10 mmol/L的離子對(duì)試劑迎來新的篇章，在一定的pH值范圍內(nèi)進(jìn)行分離。被測組分保時(shí)間與離子對(duì)性質(zhì)推動並實現、濃度薄弱點、流動(dòng)相組成及其pH值、離子強(qiáng)度有關(guān)優化程度。  5．排阻色譜法 固定相是有一定孔徑的多孔性填料積極性，流動(dòng)相是可以溶解樣品的溶劑。小分子量的化合物可以進(jìn)入孔中不斷豐富，滯留時(shí)間長實施體系；大分子量的化合物不能進(jìn)入孔中，直接隨流動(dòng)相流出。它利用分子篩對(duì)分子量大小不同的各組分排阻能力的差異而完成分離效果較好。常用于分離高分子化合物重要的意義，如組織提取物、多肽等多個領域、蛋白質(zhì)再獲、核酸等。