基因編輯技術(shù)是指能夠?qū)δ繕嘶蜻M行定點“編輯”體系,例如片段插入、缺失開展試點,堿基定點編輯等攜手共進,實現(xiàn)對特定DNA|片段的修飾。
基因編輯工具
目前的基因編輯工具主要有鋅指核酸酶(ZFN)推進一步、轉(zhuǎn)錄因子激活樣效應(yīng)物核酸酶(TALEN)和規(guī)律間隔成簇短回文重復(fù)序列(CRISPR/Cas)等技術(shù)經過。CRISPR/Cas系統(tǒng)由于其精準、簡單力度、快速明確了方向、成本低的特點,成為目前基因編輯使用較為廣泛的技術(shù)勇探新路。
以CRISPR系統(tǒng)為例增產,在使用CRISPR/Cas系統(tǒng)進行基因編輯過程中提供堅實支撐,需要gRNA來引導(dǎo)Cas蛋白對基因組進行切割,然后再通過供體兩端的同源片段進行同源重組高產,或利用生物體自身的非同源末端連接進行修復(fù)信息化技術。
CRISPR/CAS基因編輯技術(shù)
基因編輯流程
無論使用哪種工具進行基因編輯,都需要構(gòu)建載體良好,將基因編輯工具導(dǎo)入到細胞中逐步顯現,然后對細胞進行驗證,篩選出被正確編輯的細胞引領。
以酵母細胞基因編輯為例:
構(gòu)建載體過程包含了基因合成或擴增自動化裝置、基因組裝、質(zhì)粒轉(zhuǎn)化應用前景、大腸桿菌培養(yǎng)有很大提升空間、質(zhì)粒驗證、測序等步驟首次。然后將構(gòu)建好的載體轉(zhuǎn)入酵母細胞中可能性更大,其中包含酵母轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)搖籃、克隆驗證等步驟技術。
基因編輯流程長、步驟多推動、需要熟練的操作相對較高,耗費了科研工作者大量的時間和精力,往往是抬頭看文獻信息、低頭做實驗相關,實驗虐我千百遍,我待實驗如初戀豐富內涵。
如果可以將基因編輯使用的質(zhì)粒像工業(yè)化生產(chǎn)線上的產(chǎn)品一樣自動化生產(chǎn)綠色化,輸入不同的基因片段,產(chǎn)出相應(yīng)的質(zhì)粒發展,然后再將其轉(zhuǎn)入宿主細胞中進行基因編輯,將極大的提高科研以及研發(fā)效率總之,并且可以使科研人員從實驗中解放出來面向,專注于實驗的設(shè)計和數(shù)據(jù)分析。
自動化基因編輯
基因編輯自動化流水線需要完成基因擴增研學體驗、組裝建設項目、大腸桿菌轉(zhuǎn)化、克隆驗證模式、質(zhì)粒提取自動化、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染提升、宿主驗證等多種實驗操作,其中涉及多種儀器設(shè)備不折不扣,如自動化液體工作站支撐能力、酶標儀、克隆挑選機器人高效利用、培養(yǎng)箱特征更加明顯、PCR儀、離心機講理論、封膜機的可能性、撕膜機等。同時服務為一體,需要一款強大的整合軟件問題,進行儀器調(diào)度、資源分配全會精神、耗材統(tǒng)籌系統穩定性、數(shù)據(jù)管理,使實驗過程更加的流暢先進技術。
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