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SRM 968f血清的超高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法分析

閱讀:815      發(fā)布時(shí)間:2022-6-10
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方法精密度

將低明確了方向、中、高三個(gè)濃度SRM 968f血清標(biāo)準(zhǔn)品溶液 加入 4% BSA混合血清樣本經(jīng)本法處理后進(jìn)行檢測(cè)勇探新路, 每個(gè)濃度重復(fù)6次單產提升,連續(xù)檢測(cè)三天,計(jì)算日內(nèi)精密度 為 0.9% ~ 9.6% 試驗,日間精密度為 3.0% ~ 9.3% (見表 3)勞動精神。 該方法同時(shí)測(cè)定6種脂溶性.維生素的日內(nèi)精密 度和日間精密度均在 15% 以內(nèi),方法精密度滿足檢 測(cè)需求。

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方法準(zhǔn)確度

將低保供、中自行開發、高濃度的SRM 968f血清標(biāo)準(zhǔn)品溶液加入混合血清樣本中按本法進(jìn)行前處理后進(jìn)行檢測(cè),每 個(gè)濃度重復(fù)6次責任,計(jì)算加標(biāo)回收率應用情況,3個(gè)水平的加標(biāo) 回收率為86.6% ~ 107.7% ,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.46% ~ 9.39% (見表 4)組建。 該方法加標(biāo)回收率均在80% ~ 120% 以內(nèi)表現,方法準(zhǔn)確度高滿足檢測(cè)需求。

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方法驗(yàn)證

采用建立的UPLC-MS / MS方法對(duì) 美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所(NIST)制定的標(biāo)準(zhǔn)參照品SRM 968f血清 進(jìn)行檢測(cè)深刻變革,每個(gè)水平重復(fù) 2 次取平均值結論,驗(yàn)證方法準(zhǔn)確度。 結(jié)果表明質生產力,除25-OH-VD2含量較 低未能檢出外適應性強,其它檢測(cè)結(jié)果與靶值偏差均在 5% 以內(nèi),該方法檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠(表 5)先進的解決方案。

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結(jié)論

研究建立了超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí) 測(cè)定微量血清樣本中多種脂溶性.維生素的方法拓展,并對(duì) 前處理過程中的蛋白沉淀試劑、萃取液用量宣講活動,復(fù)溶液 等進(jìn)行了優(yōu)化不斷進步,以減少色譜圖中噪音干擾,改善色譜 峰形效率,提高檢測(cè)靈敏度規模。 并比較了不同色譜柱對(duì)多種 脂溶性.維生素尤其是不同類型維生素.E 的分離效果, 最終選擇 Phenomenex Kinetex F5 色譜柱講道理,該色譜柱可 以實(shí)現(xiàn) β - 生育酚和 γ - 生育酚的有效分離節點。 本研究 中只需 20 μl 血清就能夠快速完成 6 種脂溶性.維生素 的測(cè)定。 該方法測(cè)定樣本需求量少面向、操作簡(jiǎn)單支撐作用、檢測(cè) 結(jié)果準(zhǔn)確快速可實(shí)現(xiàn)大量臨床樣本的同時(shí)檢測(cè),尤其 對(duì)采血較為困難的嬰幼兒可以實(shí)現(xiàn)少量血液樣本檢 測(cè)多數(shù)項(xiàng)目的需求建設項目。


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