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細胞培養(yǎng)常見問題及其解決 @古朵新聞

時間:2020-4-13閱讀:416
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細胞培養(yǎng)實驗中用量zui多的就是細胞培養(yǎng)基效高,雖然細胞培養(yǎng)試驗基本技術(shù)大同小異交流,但是每種細胞的培養(yǎng)條件卻相差甚遠拓展應用。若偏離某種細胞所需的培養(yǎng)條件,則會導致細胞表達不同的表型

因此推動,在實驗前相對較高,需要熟悉自己所使用的細胞系,并在實驗中嚴格遵守所有產(chǎn)品的操作說明信息。

在實驗過程中相關,作為實驗小白,我們應該如何應對相關(guān)問題呢豐富內涵?
 


shou先生產效率,我們要如何挑選適合自己細胞生長的培養(yǎng)基呢?

選擇培養(yǎng)基沒有確切的標準適應性,有幾點建議可供參考:

建立某種細胞株所用的培養(yǎng)基應該是培養(yǎng)這種細胞shou選的培養(yǎng)基節點。可以查閱ATCC或在購買細胞株時咨詢供應商面向。

根據(jù)細胞株的特點支撐作用、實驗的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細胞株多選RPMI1640建設項目。

其他實驗室慣用的培養(yǎng)基不妨一試最為突出,許多培養(yǎng)基可以適合多種細胞。

也可用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞相結合,觀察其生長狀態(tài)提升,可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷不折不扣,根據(jù)實驗室結(jié)果選擇*培養(yǎng)基支撐能力,這是zui客觀的方法,但比較繁瑣高效利用。

如何正確地保存培養(yǎng)基特征更加明顯?

普通的培養(yǎng)基放置在2-8℃冰箱避光保存,若已開封建議3周內(nèi)使用講理論。未開封的培養(yǎng)基的可能性,一般可穩(wěn)定保存1年。

培養(yǎng)基中酚紅的作用是什么服務為一體?導致培養(yǎng)基顏色變化的原因有哪些問題?

酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為pH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色全會精神,堿性時為紫色系統穩定性。

培養(yǎng)基顏色變黃,原因有:培養(yǎng)基中細胞代謝產(chǎn)物為酸性集中展示,培養(yǎng)瓶受污染實力增強,細菌代謝產(chǎn)酸等導致。

培養(yǎng)基顏色偏暗紅色,原因有:培養(yǎng)基保存在4℃冰箱中重要工具,培養(yǎng)基內(nèi)的二氧化碳逐漸溢出積極拓展新的領域,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性,而培養(yǎng)基中的酸堿指示劑酚紅會隨著堿性增加而更偏暗紅更優質。

我感覺自己的培養(yǎng)基污染了,這要怎么進行測試呢推進高水平?

取0.1ml液體培養(yǎng)基涂布到無菌蛋白棟牛肉膏培養(yǎng)基上37℃培養(yǎng)24h脫穎而出,觀察有無雜菌生長(肉眼即可觀察到)。

如果我的培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后生產創效,可*保存嗎結構?

一旦培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素,建議避光保存在4℃冰箱且在2周內(nèi)用完優化上下。因為一些抗生素和血清的基本成分在解凍后就開始降解了能力建設。

哇!我的培養(yǎng)基怎么有沉淀了生產體系,這是怎么回事表現明顯更佳?怎么預防處理沉淀?

首先判斷培養(yǎng)基是否已經(jīng)污染技術節能,其次指導,若沉淀為絮狀沉淀則可能是加入血清引起的,此沉淀對細胞培養(yǎng)無影響國際要求。若沉淀為結(jié)晶流動性,有可能是因為向培養(yǎng)基里加入的輔助試劑降低了培養(yǎng)基的溶解度,使一些無機鹽析出競爭激烈。

可應用離心持續創新、過濾的方法去除這些沉淀,盡可能地減少血清凍融次數(shù)空白區。

那我什么情況下可以使用不加酚紅的培養(yǎng)基呢協調機製?

研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素(特別是雌激素)的作用充分發揮。為避免固醇類反應高質量,培養(yǎng)細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基選擇適用;一些研究人員在做流式細胞檢測時管理,為了避免酚紅干擾檢測,也使用不加酚紅的培養(yǎng)基業務指導。

為什么培養(yǎng)基中會含有L-*和丙酮酸鈉改進措施,它們的作用是什么?

L-*脫掉氨基后可作為培養(yǎng)細胞的能量來源參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源今年。盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源穩步前行,但是如果沒有葡萄糖的話,細胞也可以代謝丙酮酸鈉動手能力。

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