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上海古朵生物科技有限公司
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質(zhì)譜免疫組化對抗體有什么要求嗎?

時間:2018-12-25閱讀:1114
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年初《Nature》雜志展望 2018 年生物醫(yī)學(xué)技術(shù)突破可以使用,作為「technology to watch in 2018」——質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)(CyTOF),很多國內(nèi)外大咖已經(jīng)聚焦這項技術(shù)。質(zhì)譜流式技術(shù)(CyTOF)可以對數(shù)百萬細(xì)胞進(jìn)行超過 40 個參數(shù)的單細(xì)胞分析發揮效力,讓研究更加全面、深入明顯。

質(zhì)譜流式

與傳統(tǒng)流式技術(shù)相比安全鏈,質(zhì)譜流式采用非放射性的穩(wěn)定重金屬同位素作為抗體的標(biāo)簽,達(dá)到同時測量單細(xì)胞中多個靶點(diǎn)的目標(biāo)創新為先,高純度金屬同位素確保了低的背景以及小的信號重疊真正做到。

 

質(zhì)譜流式原理

 

質(zhì)譜流式技術(shù)需要用到金屬偶聯(lián)標(biāo)記的抗體撔卵诱??贵w質(zhì)量強化意識,尤其是特異性是后續(xù)實驗成功的關(guān)鍵。使用經(jīng)過嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)驗證的抗體進展情況,能大大提高實驗成功率的積極性。


質(zhì)譜免疫組化

 

基于 CyTOF 技術(shù),質(zhì)譜流式成像技術(shù) Imaging Mass Cytometry™ 將質(zhì)譜流式(CyTOF)超高檢測通道數(shù)量的優(yōu)勢在組織成像研究中大化至關重要,其性能遠(yuǎn)遠(yuǎn)超越了傳統(tǒng)的免疫組化或者免疫熒光技術(shù)不久前。目前通過單次掃描即可獲得組織切片樣本上 4-37 種蛋白標(biāo)記物的圖像數(shù)據(jù),準(zhǔn)確反映了蛋白及對應(yīng)的細(xì)胞在組織微環(huán)境中的表型和相互關(guān)系等多方面綜合全面的信息提升行動,特別是針對一些珍貴的 FFPE 樣本或冰凍組織切片能力建設,可以在亞細(xì)胞水平進(jìn)行更深入的分析。

 

1研究進展、這么牛的技術(shù)對抗體有什么要求嗎無障礙?

一般而言,常規(guī)的一抗廣泛關註,儲存液中都包含BSA善於監督、甘油、等可能會干擾部分偶聯(lián)標(biāo)記化學(xué)反應(yīng)的成分就能壓製。這些干擾成分在常規(guī)的無需對抗體進(jìn)行改造的實驗中能提高抗體的穩(wěn)定性更合理、降低移液損失和冰凍造成的效價降低。但是在抗體偶聯(lián)標(biāo)記類實驗(包含金屬標(biāo)記反應(yīng))中可能會造成標(biāo)記效率降低的問題更優美。所以各方面,CyTOF 需要無載體緩沖液的抗體形式防控,不包含 BSA、甘油適應性、疊氮鈉等可能干擾重金屬標(biāo)記反應(yīng)的抗體緩沖液堅實基礎。

 

2、CST 是否可以提供 CyTOF 定制抗體重要作用?

CST 可以提供這種定制形式的抗體可直接儲存在 PBS 緩沖液中等地,并且可以定制成更高抗體濃度(部分可能以 >1 mg/ml 濃度提供)的產(chǎn)品,便于后續(xù)進(jìn)行偶聯(lián)標(biāo)記反應(yīng)尤為突出。

 

3物聯與互聯、如何提高 CST 的抗體做 CyTOF 的成功率?

雖然目前質(zhì)譜流式技術(shù)不在 CST 標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)部應(yīng)用驗證流程中改造層面,如果您遵循以下建議,很有可能提高該實驗的成功率優勢與挑戰。

 

若采用 Helios™ 平臺進(jìn)行實驗經驗分享,可優(yōu)先考慮從 CST 的 Flow 驗證過的抗體目錄中進(jìn)行選擇。

 

若采用 Imaging Mass Cytometry™ 平臺趨勢,您選擇的抗體應(yīng)與樣品制備方法相匹配有力扭轉。對于石蠟切片樣品,可優(yōu)先考慮從 CST 的 IHC-P 或 IF-P 應(yīng)用驗證的抗體目錄中進(jìn)行選擇一站式服務。對于冷凍組織切片廣度和深度,可優(yōu)先考慮從 CST 的 IF-F 或 IHC-F 應(yīng)用驗證的抗體目錄中進(jìn)行選擇。

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