熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization, FISH）長效機製，縮寫為FISH法治力量，就是魚的意思，以此類推分享，做熒光原位雜交也叫釣魚共享。

熒光原位雜交實(shí)驗(yàn) 它的實(shí)驗(yàn)原理也挺像釣魚的：它是用已知的標(biāo)記單鏈核酸為探針信息化，按照堿基互補(bǔ)的原則，與待檢材料中未知的單鏈核酸進(jìn)行特異性結(jié)合生動，形成可被檢測(cè)的雜交雙鏈核酸新型儲能。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱軸呈線性排列，因而探針可以直接與染色體進(jìn)行雜交從而將特定的基因在染色體上定位新品技。你們看領域，像不像在茫茫大海里面釣魚呢？探針像不像魚鉤呢好宣講？

釣魚實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)：操作煩瑣，步驟簡(jiǎn)單領先水平。

說它操作煩瑣，是因?yàn)樗牟僮鞑襟E巨多，每一步又需要相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間戰略布局，如果自己標(biāo)探針的話每批標(biāo)本大約三天時(shí)間（買試劑盒只需一天事關全面，但價(jià)格昂貴），你說是不是很煩瑣狀態？說它步驟簡(jiǎn)單則是因?yàn)镕ISH只要操作過程仔細(xì)技術節能，嚴(yán)格按照操作步驟操作，很容易做成功廣泛認同，比PCR要簡(jiǎn)單得多國際要求。將繁瑣的簡(jiǎn)單步驟做好也是有門道的。

探針設(shè)計(jì)鍛造，量身定制 探針就是魚鉤競爭激烈。魚鉤不管用，還能釣得上大魚嗎工具？設(shè)計(jì)探針要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要來進(jìn)行智慧與合力，也就是說你要檢測(cè)的目的基因決定你的探針設(shè)計(jì)。這就像是一個(gè)老練的漁夫會(huì)根據(jù)不同的魚的種類來選擇魚鉤一樣重要的角色。舉個(gè)例子開放要求，如果目的基因大概是1.8KB，可以直接對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行*標(biāo)記平臺建設。也可以找技術(shù)服務(wù)公司幫你設(shè)計(jì)合成探針服務機製，每條探針設(shè)計(jì)合成大概3500。

組織切片和載玻片的選擇

組織切片4～5μm 厚推動並實現，過厚或過薄的切片均會(huì)對(duì)信號(hào)的強(qiáng)弱產(chǎn)生影響薄弱點，而且切片應(yīng)完整，質(zhì)量良好優化程度，否則會(huì)在預(yù)處理時(shí)掉片積極性。載玻片的選擇建議使用防脫載玻片奮勇向前，有條件的實(shí)驗(yàn)室可使用更好的陽離子或者陰離子載玻片，可有效防止脫片現(xiàn)象的發(fā)生實施體系。

注意標(biāo)本預(yù)處理細(xì)節(jié)

標(biāo)本的處理也是關(guān)系到后信號(hào)強(qiáng)弱的關(guān)鍵組建，但有些人不注意這些細(xì)節(jié)，結(jié)果造成熒光信號(hào)弱效果較好，難以分辨重要的意義。這與預(yù)處理不當(dāng)造成探針難以達(dá)到飽和而雜交難以進(jìn)行有關(guān)。

變性要規(guī)范

這一步是FISH關(guān)鍵中的關(guān)鍵等多個領域。變性包括標(biāo)本變性和探針變性再獲，這兩個(gè)步驟關(guān)系到FISH的成敗，千萬要嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行應用擴展，不但如此體驗區，特殊標(biāo)本還要自己摸條件。試想變性不*活動上，DNA的雙鏈都沒能*打開有望，雜交能順利進(jìn)行嗎？

操作熒光抗體時(shí)要避光

操作熒光抗體的時(shí)候千萬要避光導向作用，否則將前功盡棄啊方案。舉個(gè)例子吧。魚竿真正做到，魚鉤科普活動，魚餌都備齊了，也不能保證一定就能釣到大魚兒強化意識。魚兒上鉤了之后充足，還有一個(gè)把魚拖上岸的終過程。在FISH的積極性，就是使用熒光顯微鏡觀察和記錄結(jié)果綠色化發展。在正常情況下，目前商業(yè)化的探針即使是雜交以后不久前，熒光信號(hào)能保存半年之久用上了。有時(shí)候，信號(hào)也會(huì)急劇衰減能力建設，幾分鐘后就不見了關註。就像魚兒一開始上鉤了，馬上又掙脫魚鉤無障礙，重返大海了連日來。出現(xiàn)這種情況，就是由于沒有嚴(yán)格避光。因此在觀察和記錄的時(shí)候系統，要盡可能地在暗室里面操作增強。這和以前洗照片是一個(gè)原理哈。

當(dāng)然交流等，也有偷懶的招術(shù)更加廣闊。那就是：抗熒光淬滅劑（antifade），在封片觀察的時(shí)候加入提高，可以延緩熒光的淬滅可以使用。注意：如果一次沒有成功，可以將探針洗掉紮實，再進(jìn)行雜交效高化。這又像極了釣魚。第yi次魚兒脫鉤了投入力度，我們可以換個(gè)魚鉤再釣發展機遇，直到釣到大魚為止。

FISH其實(shí)做出來還是很漂亮很漂亮的法治力量。讓我們一起感受一下生物學(xué)的大美。