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ELISA試劑盒固相載體采用免疫酶技術(shù)嗎?

時間:2018-8-2閱讀:314
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       免 疫酶技術(shù)的主要試劑為固相的抗原或抗體效率和安、酶標(biāo)記的抗原或抗體和與標(biāo)記酶直接關(guān)聯(lián)的酶反應(yīng)底物f同控製?勺鞴滔噍d體的物質(zhì)很多集成應用,常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有 較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能發展,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后保留原來的免疫活性保持穩定。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式面向,在測定過程中支撐作用,它作為載體和容器,不參與化學(xué) 反應(yīng)建設項目,加之它的價格低廉最為突出,所以被普遍采用。


       聚苯乙烯載體的形狀主要有三種:小試管相結合、小珠和微量反應(yīng)板高效化。小試管的特點是還能兼作反應(yīng)的容器,后放 入分光光度計中比色更多的合作機會。小珠一般為直徑0.6cm的圓球延伸,表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積大增加。如用特殊的洗滌器服務好,在洗滌過程中使圓珠滾動淋洗新趨勢,效果更好。常 用的載體為微量反應(yīng)板共謀發展,于ELISA測定的產(chǎn)品也稱為ELISA板學習,通用的標(biāo)準(zhǔn)板形是8×12的96孔式。為便于作少量標(biāo)本的檢測聽得懂,有制成8聯(lián)或 l2聯(lián)孔條的應用優勢,放入座架后,大小與標(biāo)準(zhǔn)ELISA板相同全方位。ELISA板的特點是可以同時進(jìn)行大量標(biāo)本的檢測高效節能,并可在特定的比色計上迅速讀出結(jié)果。現(xiàn)在已有 多種自動化儀器用于微量反應(yīng)板型的ELISA檢測大局,包括加樣新創新即將到來、洗滌邁出了重要的一步、保溫、比色等步驟設施,對操作的標(biāo)準(zhǔn)化極為有利需求。
       良好的ELISA板應(yīng)該是吸附性 能好,空白值低組合運用,孔底透明度高相對開放,各板之間和同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工藝的差別脫穎而出,各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大拓展應用。因此 每一批號的聚苯乙烯制品在使用前須檢查其性能。常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔后廣泛應用,每孔內(nèi)加入適當(dāng) 稀釋的酶標(biāo)抗人IgG抗體關註度,保溫后洗滌橫向協同,加底物顯色哪些領域,終止酶反應(yīng)后分別測每孔溶液的吸光度〔粩鄤撔??刂品磻?yīng)條件建立和完善,使各讀數(shù)在0.8左右。計算所有讀數(shù)的平均值參與水平。 所有單個讀數(shù)與平均讀數(shù)之差應(yīng)小于10%.與聚苯乙烯類似的塑料為聚氯乙烯大型。作為ELISA固相載體,聚氯乙烯板的特點為質(zhì)軟板薄明確相關要求,可切割重要意義,價廉、但光潔 度不如聚苯乙烯板深化涉外。聚氯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高體系,但空白值有時也略高。
       為比較不同固相在某一ELISA測定中的優(yōu)劣開展試點,可用以下方法加以檢驗:用其他免疫學(xué)測定方法選出一個典型的陽性標(biāo)本和一個典型的陰性標(biāo)本攜手共進。將它們分別進(jìn)行一系列稀釋后,ELISA試劑盒在不同的固相載體上按預(yù)定的ELISA操作步驟進(jìn)行測定推進一步,然后比較測定結(jié)果經過。在哪一種載體上陽性結(jié)果與陰性結(jié)果判別大,這種載體就是這一ELISA測定的合適的固相載體力度。
       除 塑料制品外明確了方向,固相酶免疫測定的載體還有兩種材料:一是微孔濾膜,如**纖維素膜勇探新路、尼龍膜等單產提升,這類測定形式將在本章“膜載體的酶免疫測定"中介紹便利性。另一種載 體是以含鐵的磁性微粒制作的,反應(yīng)時固相微粒懸浮在溶液中行動力,具有液相反應(yīng)的速率信息化技術,反應(yīng)結(jié)束后用磁鐵吸引作為分離的手段,洗滌也十分方便良好,但需配備特殊的儀 器逐步顯現。

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