在細(xì)胞培養(yǎng)過程中資源優勢，經(jīng)常少不了HEPES緩沖液積極參與。那么，HEPES緩沖液的配制和使用方法怎樣呢?上海古朵生物有限公司為您詳細(xì)介紹.

HEPES緩沖液是一種弱勢長遠所需，在開放式的培養(yǎng)條件中求索，若加入HEPES，可防止培養(yǎng)基內(nèi)pH氧化升高規模，從而將PH維持在7.0左右穩定發展。 HEPES分子量為238.31，化學(xué)名：4-羥yi基哌嗪乙磺酸聯動，分子式: C8H18N2O4S能力建設。 HEPES常用于生物緩沖劑，pH值緩沖范圍：6.8-8.2生產體系，用在生化診斷試劑盒服務、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中能力和水平，經(jīng)常少不了HEPES緩沖液覆蓋。那么，HEPES緩沖液的配制和使用方法怎樣呢?HEPES緩沖液是一種弱勢研究，在開放式的培養(yǎng)條件中高效，若加入HEPES，可防止培養(yǎng)基內(nèi)pH氧化升高提高，從而將PH維持在7.0左右機構。

HEPES分子量為238.31，化學(xué)名：4-羥yi基哌嗪乙磺酸空白區，分子式: C8H18N2O4S協調機製。

HEPES常用于生物緩沖劑，pH值緩沖范圍：6.8-8.2形勢，用在生化診斷試劑盒實踐者、DNA/rna提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。對細(xì)胞無毒性作用約定管轄。它是一種氫離子緩沖劑數據，能較長時間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L。

HEPES使用方法有兩種：

(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中顯著，再過濾除菌快速增長。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES，待溶后用lN NaOH 調(diào)pH至7.2占，濾過除菌后使用高質量。此時HEPES的使用濃度為10 mmol/L。

(2)亦可配成 100 x 貯存液(l mol/L)動手能力，使用前取 99ml培養(yǎng)液加入 lml貯存液逐步改善，終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。l mol/L(100 x)HEPES貯存液配制方法：取23.8g HEPES溶于90ml雙蒸水中提升，用lN NaOH調(diào)pH至7.5一8.0大大提高，然后用水定容至100ml，過濾除菌研究成果，分裝小瓶(2ml/瓶)取得了一定進展，4℃或-20℃保存。

關(guān)于HEPES 緩沖溶液的配制大面積，不同的文獻(xiàn)資料有不同的說法積極參與。根據(jù)用途，一種是單純的HEPES+NaOH培養，另一種是HEPES+鹽交流研討。各種配制方法總結(jié)如下：

一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制

119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸餾水中形式，加0.5~1M 的NaOH水溶液調(diào)節(jié)至少所需pH(HEPES的有效pH 范圍是6.8~8.2)建設應用，然后用蒸餾水定容至500ml，于4攝氏度保存日漸深入。

二背景下、加少量鹽的HEPES Buffer配方(500ml)

HEPES 6.5g、NaCl 8.0g可靠保障、Na2HPO4.7H2O 0.198g自然條件、用0.5M NaOH 水溶液調(diào)節(jié)pH值，后定容開展。

三互動互補、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制

將1.6g NaCl、0.074g KCl發展成就、0.027g Na2HPO4.2H2O成就、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸餾水，用0.5M NaOH調(diào)節(jié)至所需pH值開展面對面，再用蒸餾水定容至100ml即可。

需要注意的是非常重要，HEPES緩沖液的使用終濃度為10-50mmol/L進一步提升，對細(xì)胞無毒性作用空間廣闊。一般情況下，濃度為20mmol/L的HEPES即可達(dá)到緩沖能力「母飫撔?，F(xiàn)在市售HEPES為約10g包裝的小瓶知識和技能，大家根據(jù)實際情況正確靈活配制就OK了。