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培養(yǎng)基的配置原則有哪些呢?

時間:2018-7-17閱讀:243
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       培養(yǎng)基(Medium)是供微生物高端化、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料開拓創新,一般都含有水供給、氮源優勢與挑戰、無機(jī)鹽(包括微量元素)、碳源解決方案、生長因子(維生素趨勢、氨基酸、堿基上高質量、抗菌素一站式服務、色素、激素和血清等)等深入交流。那么培養(yǎng)基的配置原則有哪些呢引領作用?下面我們?yōu)槟敿?xì)講解:

1、選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)


  總體而言臺上與臺下,所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源用的舒心、氮源、無機(jī)鹽品牌、生長因子深入開展、水及能源,但由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜等形式,不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的技術的開發,因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡單的無機(jī)物合成自身需要的糖類飛躍、脂類更高效、蛋白質(zhì)全面協議、核酸、維生素等復(fù)雜的有機(jī)物具體而言,因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基*可以(或應(yīng)該)由簡單的無機(jī)物組成工具。例如,培養(yǎng)化能自養(yǎng)型的氧化硫硫桿菌(Thiobacillus thiooxdans)的培養(yǎng)基組成見表3.9喜愛。在該培養(yǎng)基配制過程中并未專門加入其他碳源物質(zhì)醒悟,而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源。
  就微生物主要類型而言高質量,有細(xì)菌也逐步提升、放線菌、酵母菌註入了新的力量、霉菌重要的作用、原生動物、藻類及病毒之分去創新,培養(yǎng)它們所需的培養(yǎng)基各不相同足夠的實力。在實(shí)驗(yàn)室中常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(或簡稱普通肉湯培養(yǎng)基)培養(yǎng)細(xì)菌,用高氏I號合成培養(yǎng)基培養(yǎng)放線菌結構,培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁培養(yǎng)基更適合,培養(yǎng)霉菌則一般用查氏合成培養(yǎng)基。


  2規劃、營養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適
 

  培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時微生物才能生長良好擴大公共數據,營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需,濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用帶動擴大,例如高濃度糖類物質(zhì)核心技術體系、無機(jī)鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進(jìn)微生物的生長持續發展,反而起到抑菌或殺菌作用必然趨勢。另外,培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累擴大,其中碳氮比(C/N)的影響較大多樣性。嚴(yán)格地講,碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值新格局,有時也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比明顯。例如,在利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)*的過程中顯示,培養(yǎng)基碳氮比為4/1時創新為先,菌體大量繁殖,*積累少;當(dāng)培養(yǎng)基碳氮比為3/1時創新延展,菌體繁殖受到抑制強化意識,*產(chǎn)量則大量增加。再如機製性梗阻,在抗生素發(fā)酵生產(chǎn)過程中機製,可以通過控制培養(yǎng)基中*氮(或碳)源與遲效氮(或碳)源之間的比例來控制菌體生長與抗生素的合成協(xié)調(diào)。


  3集成應用、控制pH條件
 

  培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi)探討,以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的適pH條件各不相同使用,一般來講合規意識,細(xì)菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長有效性。值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中機遇與挑戰,由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累廣泛關註,會導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,若不對培養(yǎng)基pH條件進(jìn)行控制集成技術,往往導(dǎo)致微生物生長速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降就能壓製。因此,為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定適應能力,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑更優美,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4 和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性防控,KH2PO4溶液呈酸性成效與經驗,兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8。當(dāng)培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時堅實基礎,H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物稍有不慎,培養(yǎng)基pH不會過度降低;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加等地,OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物最為顯著,培養(yǎng)基pH也不會過度升高。
  但KH2PO4 和K2HPO4緩沖系統(tǒng)只能在一定的pH范圍內(nèi)(6.4-7.2)起調(diào)節(jié)作用規定。有些微生物環境,如乳酸菌能大量產(chǎn)酸,上述緩沖系統(tǒng)就難以起到緩沖作用高質量,此時可在培養(yǎng)基中添加難溶的碳酸鹽(如CaCO3)來進(jìn)行調(diào)節(jié)相對簡便,CaCO3難溶于水,不會使培養(yǎng)基pH過度升高,但它可以不斷中和微生物產(chǎn)生的酸解決問題,同時釋放出CO2系列,將培養(yǎng)基pH控制在一定范圍內(nèi)。
  在培養(yǎng)基中還存在一些天然的緩沖系統(tǒng)相互配合,如氨基酸慢體驗、肽、蛋白質(zhì)都屬于兩性電解質(zhì)智能化,也可起到緩沖劑的作用科技實力。


  4、控制氧化還原電位(redox potential)
 

  不同類型微生物生長對氧化還原電位(F)的要求不一樣建設,一般好氧性微生物在F值為+0.1V以上時可正常生長在此基礎上,一般以+0.3一+0.4V為宜,厭氧性微生物只能在F值低于+0.1V條件下生長前來體驗,兼性厭氧微生物在F值為+0.1V以上時進(jìn)行好氧呼吸自主研發,在+0.1V以下時進(jìn)行發(fā)酵。F值與氧分壓和pH有關(guān)更加廣闊,也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響損耗。在pH相對穩(wěn)定的條件下,可通過增加通氣量(如振蕩培養(yǎng)非常完善、攪拌)提高培養(yǎng)基的氧分壓性能穩定,或加入氧化劑,從而增加F值作用;在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸情況正常、硫化氫、半*技術特點、*提高鍛煉、二硫蘇糖醇等還原性物質(zhì)可降低F值。
 

  5高質量、原料來源的選擇
 

  在配制培養(yǎng)基時應(yīng)盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分也逐步提升,特別是在發(fā)酵工業(yè)中,培養(yǎng)基用量很大註入了新的力量,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價值重要的作用。例如,在微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)過程中去創新,常常利用糖蜜(制糖工業(yè)中含有蔗糖的廢液)足夠的實力、乳清(乳制品工業(yè)中含有乳糖的廢液)、豆制品工業(yè)廢液及黑廢液(造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸紙漿)等都可作為培養(yǎng)基的原料學習。再如結構重塑,工業(yè)上的甲烷發(fā)酵主要利用廢水聽得懂、廢渣作原料,而在我國農(nóng)村高質量發展,已推廣利用人畜糞便及禾草為原料發(fā)酵生產(chǎn)甲烷作為燃料全方位。另外,大量的農(nóng)副產(chǎn)品或制品影響力範圍,如鼓皮大局、米糠、玉米漿邁出了重要的一步、酵母浸膏有序推進、酒糟、豆餅需求、花生餅堅定不移、蛋白胨等都是常用的發(fā)酵工業(yè)原料。
 

  6更讓我明白了、滅菌處理


  要獲得微生物純培養(yǎng)迎難而上,必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進(jìn)行消毒與滅菌充分。對培養(yǎng)基而言進一步完善,更是要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌競爭力,一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達(dá)到滅菌目的狀況。在高壓蒸汽滅菌過程中機製性梗阻,長時間高溫會使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖全過程、焦糖集成應用,因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/ cm2,112.6℃15-30分鐘進(jìn)行滅菌不負眾望,某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基高效流通,可先將糖進(jìn)行過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合精準調控;長時間高溫還會引起磷酸鹽功能、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂體系、鐵離子)結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀生產製造,因此,在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時攜手共進,常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑共同,避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀推進一步,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)。還可以將含鈣簡單化、鎂力度、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進(jìn)行滅菌系統性,然后再混合勇探新路,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后便利性,培養(yǎng)基pH會發(fā)生改變(一般使pH降低)方法,可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求,在培養(yǎng)基滅菌前后加以調(diào)整提供有力支撐。
  在配制培養(yǎng)基過程中切實把製度,泡沫的存在對滅菌處理極不利,因?yàn)榕菽械目諝庑纬筛魺釋幼孕虚_發,使泡沫中微生物難以被殺死進行部署。因而有時需要在培養(yǎng)基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產(chǎn)生,或適當(dāng)提高滅菌溫度應用情況。

 

 

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