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小鼠白細(xì)胞介素17F(IL-17F)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

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  中文名:小鼠白細(xì)胞介素17F(IL-17F)ELISA試劑盒
 
  規(guī)格:48t/96t
 
  保存:2~8℃
 
  有效期:6個(gè)月
 
  樣本:血清、血漿深入闡釋、細(xì)胞上清液強化意識、尿液、體液深入開展、灌洗液更為一致、腦脊髓、心房水技術的開發、胸房水研究與應用、組織等。
 
  特點(diǎn):敏感性高更高效、特異性強(qiáng)全面協議、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定緊密協作、易保存越來越重要,操作簡(jiǎn)便。
 
  用途:用于測(cè)定血清發揮重要作用,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性醒悟。
 
  種屬:人、大鼠高質量、小鼠也逐步提升、兔子、豬註入了新的力量、犬重要的作用、猴、馬去創新、牛足夠的實力、羊、雞結構、鴨更適合、魚(yú)等。
 
  運(yùn)輸方式:現(xiàn)貨供應(yīng)溝通協調,一般為快遞運(yùn)輸擴大公共數據,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。
 
  檢測(cè)原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法核心技術體系。
 
  l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清開拓創新、血漿、組織必然趨勢、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠白細(xì)胞介素17F(IL-17F)的含量促進善治。
 
  l 有效期:6個(gè)月
 
  l 保存條件:2-8℃
 
  l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
 
  實(shí)驗(yàn)原理
 
  試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)多樣性。往預(yù)先包被小鼠白細(xì)胞介素17F(IL-17F)捕獲抗體的包被微孔中發揮效力,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品明顯、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體安全鏈,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色創新為先,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色進一步完善,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠白細(xì)胞介素17F(IL-17F)呈正相關(guān)競爭力。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值)調整推進,計(jì)算樣品濃度。
 
  樣本處理及要求
 
  1.  血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000g離心20分鐘機製性梗阻,取上清即可檢測(cè)機製,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融集成應用。
 
  2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑探討,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存高效流通,但應(yīng)避免反復(fù)凍融合規意識。
 
  3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果)有效性,稱(chēng)重后將*碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比機遇與挑戰,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS廣泛關註,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄集成技術。*在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中就能壓製,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞適應能力,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎更優美,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)成效與經驗。
 
  4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘適應性,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存稍有不慎,但應(yīng)避免反復(fù)凍融重要作用。
 
  注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)最為顯著。
 
  標(biāo)本處理
 
  1.  本公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé)尤為突出,不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量環境,預(yù)留充足的樣本進行部署。
 
  2.  實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過(guò)高應用情況,應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋?zhuān)瓜♂尯蟮臉?biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍保護好,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)解決問題。
 
  3.  若所檢樣本不包含在說(shuō)明書(shū)所列樣本之中系列,建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性,并注意留存樣本相互配合。
 
  4.  使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差慢體驗。
 
  5.  若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類(lèi)樣本干擾因素較多智能化,如:細(xì)胞狀態(tài)科技實力、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等建設,所以可能存在檢測(cè)不出的情況在此基礎上。
 
  6.  某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白前來體驗,可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配自主研發,而不被檢測(cè)出。
 
  7.  建議使用新鮮樣本更加廣闊,保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差損耗。
 
  需要而未提供的試劑和器材
 
  酶標(biāo)儀(450nm)
 
  高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL非常完善、20-200uL性能穩定、200-1000uL
 
  37℃恒溫箱
 
  蒸餾水或去離子水
 
  注意事項(xiàng)
 
  嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃作用。使用后立即冷藏保存試劑情況正常。
 
  洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果行業分類。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉提高鍛煉。
 
  消除板底殘留的液體和手指印發展邏輯,否則影響OD值。
 
  底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色也逐步提升,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用記得牢。
 
  避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
 
  在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射認為。
 
  平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上服務好。
 
  任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性反應能力。
 
  不能使用過(guò)期產(chǎn)品共謀發展。
 
  如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好結構重塑,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置聽得懂。
 
  試劑準(zhǔn)備
 
  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
 
  20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1:20稀釋?zhuān)?份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水高質量發展。
 
  操作步驟
 
  1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條全方位,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
 
  2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔影響力範圍,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL大局;
 
  3.  樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加邁出了重要的一步。
 
  4.  除空白孔外有序推進,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔需求,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min堅定不移。
 
  5.  棄去液體,吸水紙上拍干更讓我明白了,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL)迎難而上,靜置1min,甩去洗滌液探索,吸水紙上拍干堅持先行,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
 
  6.  每孔加入底物A競爭力、B各50μL,37℃避光孵育15min狀況。
 
  7.  每孔加入終止液50μL機製性梗阻,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
 
  實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
 
  以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)集成應用,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)探討,在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),并得到直線(xiàn)回歸方程服務效率,將樣品的OD值代入方程明確相關要求,計(jì)算出樣品的濃度。
 
  試劑盒性能
 
  1.  檢測(cè)范圍:1.5 pg/mL – 48 pg/mL統籌發展。
 
  2.  靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于0.1 pg/mL深化涉外。
 
  3.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。
 
  4.  重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% 生產製造,板間變異系數(shù)小于15% 開展試點。
 
  說(shuō)明
 
  1.  由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對(duì)所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)共同。
 
  2.  zui終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性推進一步、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān),請(qǐng)務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份簡單化。
 
  3.  不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì)有少許差別力度,如:檢測(cè)限、靈敏度以及顯色時(shí)間等系統性,請(qǐng)依據(jù)試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作勇探新路,電子版說(shuō)明書(shū)僅作參考。
 
  4.  只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測(cè)效果便利性,不能混用其他制造商的產(chǎn)品方法。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說(shuō)明才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果。
 

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