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上海古朵生物科技有限公司
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雞睪酮(T)ELISA試劑盒使用說明書

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中文名:雞睪酮(TELISA試劑盒
規(guī)格:48t/96t
保存:2~8
有效期:6個月
樣本:血清表現、血漿大部分、細(xì)胞上清液事關全面、尿液責任製、體液背景下、灌洗液帶來全新智能、腦脊髓持續創新、心房水重要意義、胸房水技術交流、組織等便利性。
特點:敏感性高結構重塑、特異性強(qiáng)聽得懂、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定高質量發展、易保存便利性,操作簡便。
用途:用于測定血清重要平臺,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性新技術。
種屬:人、大鼠順滑地配合、小鼠深入、兔子、豬前沿技術、犬基礎、猴、馬多種方式、牛對外開放、羊、雞深入交流研討、鴨資料、魚等。
運(yùn)輸方式:現(xiàn)貨供應(yīng)關註度,一般為快遞運(yùn)輸橫向協同,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時間到貨敢於挑戰。
檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法不斷創新。

 

 

本試劑盒用于體外定量檢測血清建立和完善、血漿、組織參與水平、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中雞睪酮(T)的含量大型。

有效期:6個月

保存條件:2-8

本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

 

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)明確相關要求。往預(yù)先包被雞睪酮(T)捕獲抗體的包被微孔中可持續,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品體製、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌創新科技。用底物TMB顯色服務延伸,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色具有重要意義。顏色的深淺和樣品中的雞睪酮(T)呈正相關(guān)進一步。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度強大的功能。

 

樣本處理及要求

1.  血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4過夜后于1000g離心20分鐘提高,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20-80保存的特性,但應(yīng)避免反復(fù)凍融交流。
2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘提供堅實支撐,或?qū)?biāo)本放于-20-80保存還不大,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織信息化技術,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果)發揮作用,稱重后將*碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比逐步顯現,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mLPBS銘記囑托,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄自動化裝置。*在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中示範,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞有很大提升空間,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎製度保障,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘的有效手段,取上清檢測統籌推進。

4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘方案,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20-80保存了解情況,但應(yīng)避免反復(fù)凍融深入。
注:標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測重要的。


標(biāo)本處理

1.  本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé)開展研究,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量相互融合,預(yù)留充足的樣本首要任務。

2.  實驗前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過高不同需求,應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行稀釋發展,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)支撐作用。標(biāo)本使用0.01mol/LPBS稀釋(PH=7.0-7.2)日漸深入。

3.  若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進(jìn)行預(yù)實驗驗證其有效性同時,并注意留存樣本互動式宣講。

4.  使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差。

5.  若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清模式,因該類樣本干擾因素較多自動化,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量高品質、采樣時間等落地生根,所以可能存在檢測不出的情況。

6.  某些天然蛋白或重組蛋白健康發展,包括原核及真核重組蛋白有效保障,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出長效機製。

7.  建議使用新鮮樣本講實踐,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實驗結(jié)果偏差。

 

需要而未提供的試劑和器材

酶標(biāo)儀(450nm
高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL奮戰不懈、2-20uL市場開拓、20-200uL200-1000uL
37
恒溫箱
蒸餾水或去離子水

 

注意事項

嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果大大縮短。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25要落實好。使用后立即冷藏保存試劑。
洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體先進技術。溫育過程中不要讓微孔干燥掉培訓。
消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值宣講手段。
底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色重要工具,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果配套設備。
在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射更優質。
平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體推進高水平。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性領域。
不能使用過期產(chǎn)品。
如果可能傳播疾病好宣講,所有的樣品都應(yīng)管理好註入新的動力,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

 

試劑準(zhǔn)備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用新產品。

20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按120稀釋,即120×洗滌緩沖液加19份蒸餾水橋梁作用。

 

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條長遠所需,剩余板條用自封袋密封放回4

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔讓人糾結,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL規模;

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加基石之一。

4.  除空白孔外聯動,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔共同努力,37水浴鍋或恒溫箱溫育60min行業內卷。

5.  棄去液體,吸水紙上拍干逐漸完善,每孔加滿洗滌液(350μL)參與能力,靜置1min,甩去洗滌液是目前主流,吸水紙上拍干充分發揮,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.  每孔加入底物A充分發揮、B50μL選擇適用,37避光孵育15min

7.  每孔加入終止液50μL設計,15min內(nèi)業務指導,在450nm波長處測定各孔的OD值改進措施。

 

實驗結(jié)果計算

以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)還不大,在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線高產,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程發揮作用,計算出樣品的濃度數據。

 

試劑盒性能

1.  檢測范圍:25 pg/mL – 800 pg/mL

2.  靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL發揮。

3.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)顯著。

4.  重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 開放以來。

 

說明

1.  由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析占,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。

2.  zui終的實驗結(jié)果與試劑的有效性提供了有力支撐、實驗者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān)激發創作,請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。

3.  不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別進一步意見,如:檢測限增幅最大、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進(jìn)行實驗操作生產能力,電子版說明書僅作參考標準。

4.  只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品堅持好。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到zui好佳的檢測結(jié)果即將展開。

 

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