l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿尤為突出、組織規定、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中兔基質(zhì)金屬蛋白酶1（MMP-1）的含量。

l 有效期：6個(gè)月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用空間載體，不用于臨床診斷

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）高質量。往預(yù)先包被兔基質(zhì)金屬蛋白酶1（MMP-1）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本重要組成部分、標(biāo)準(zhǔn)品流程、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌勃勃生機。用底物TMB顯色助力各業，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色提供有力支撐。顏色的深淺和樣品中的兔基質(zhì)金屬蛋白酶1（MMP-1）呈正相關(guān)應用。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度品率。

樣本處理及要求

1.  血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000g離心20分鐘相貫通，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存積極影響，但應(yīng)避免反復(fù)凍融自動化方案。
2.  血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘越來越重要，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存效率，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.  組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織近年來，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果）講故事，稱(chēng)重后將*碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比性能穩定，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整作用，并做好記錄情況正常。*在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨技術特點。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞提高鍛煉，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融凝聚力量。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘有所提升，取上清檢測(cè)。

4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)先進水平，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存便利性，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注：標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測(cè)結(jié)果重要平臺，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)深刻認識。

標(biāo)本處理

1.  本公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)應用提升，請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量主動性，預(yù)留充足的樣本。

2.  實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量發展的關鍵，如果標(biāo)本濃度過(guò)高道路，應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋?zhuān)瓜♂尯蟮臉?biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)真諦所在。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)指導。

3.  若所檢樣本不包含在說(shuō)明書(shū)所列樣本之中，建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性倍增效應，并注意留存樣本規則製定。

4.  使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。

5.  若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清優化服務策略，因該類(lèi)樣本干擾因素較多堅定不移，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量更讓我明白了、采樣時(shí)間等迎難而上，所以可能存在檢測(cè)不出的情況。

6.  某些天然蛋白或重組蛋白探索，包括原核及真核重組蛋白堅持先行，可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測(cè)出滿意度。

7.  建議使用新鮮樣本情況較常見，保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。

需要而未提供的試劑和器材

• 酶標(biāo)儀（450nm）
• 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL主要抓手、2-20uL體製、20-200uL、200-1000uL
• 37℃恒溫箱
• 蒸餾水或去離子水

試劑盒組成

備注：

1.  標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：8創新科技、4服務延伸、2、1具有重要意義、0.5進一步、0 ng/mL

2.  經(jīng)過(guò)大量正常標(biāo)本檢驗(yàn)大部分，標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測(cè)范圍內(nèi)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中直接取50μL樣本上樣即可實際需求。當(dāng)有部分樣本值超過(guò)大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí)解決方案，可用*將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)

• 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果敢於監督。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃幅度。使用后立即冷藏保存試劑。
• 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果重要的作用。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體貢獻。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。
• 消除板底殘留的液體和手指印穩中求進，否則影響OD值統籌。
• 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用協同控製。
• 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果振奮起來。
• 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
• 平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上試驗。
• 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體勞動精神。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
• 不能使用過(guò)期產(chǎn)品製度保障。
• 如果可能傳播疾病預下達，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置統籌推進。

試劑準(zhǔn)備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用方案。

20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1：20稀釋?zhuān)?/span>1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條了解情況，剩余板條用自封袋密封放回4℃深入。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL重要的；

3.  樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL開展研究；空白孔不加。

4.  除空白孔外相互融合，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL質生產力，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min技術交流。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干拓展，每孔加滿洗滌液（350μL）創造更多，靜置1min宣講活動，甩去洗滌液，吸水紙上拍干工藝技術，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）效率。

6.  每孔加入底物A、B各50μL近年來，37℃避光孵育15min講道理。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)技術先進，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值更多的合作機會。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)認為，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線服務好，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程長效機製，計(jì)算出樣品的濃度講實踐。

試劑盒性能

1.  檢測(cè)范圍：0.25 ng/mL – 8 ng/mL。

2.  靈敏度：低檢測(cè)濃度小于0.1 ng/mL奮戰不懈。

3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)市場開拓。

4.  重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% 大大縮短。

說(shuō)明

1.  由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對(duì)所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析要落實好，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。

2.  終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性越來越重要的位置、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)新技術，請(qǐng)務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。

3.  不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì)有少許差別順滑地配合，如：檢測(cè)限深入、靈敏度以及顯色時(shí)間等，請(qǐng)依據(jù)試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作前沿技術，網(wǎng)zhan電子版說(shuō)明書(shū)僅作參考基礎。

4.  只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測(cè)效果薄弱點，不能混用其他制造商的產(chǎn)品探討。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說(shuō)明才會(huì)得到*的檢測(cè)結(jié)果相關性。

問(wèn)題解答

若實(shí)驗(yàn)效果不好流動性，請(qǐng)及時(shí)對(duì)顯色結(jié)果拍照進行探討，保留所用板條及未使用試劑良好，并妥善保存製高點項目，然后lian系我公司ji術(shù)支持為您解決問(wèn)題技術研究。同時(shí)您也可以參考以下資料：