本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷規劃。
雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒 試劑盒名稱】雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒
【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒 試劑盒用途】定量雞血清提高、血漿及相關(guān)液體樣本中微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)的含量
【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理】
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品進入當下、待測(cè)樣本加入到預(yù)先包被微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)透明酶標(biāo)包被板中紮實,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分新體系,再加入酶標(biāo)工作液投入力度,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分不難發現。依次加入底物A貢獻法治、B,底物(TMB)在辣根過(guò)氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物發展需要,在酸的作用下變成黃色攻堅克難,顏色的深淺與樣品中微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)濃度呈正相關(guān),450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值方式之一,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值生動,計(jì)算樣本中微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)含量。
【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒需要而未提供的試劑和器材】
1創新能力、37℃恒溫箱
標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
精密移液器及一次性吸頭
蒸餾水
一次性試管
吸水紙
【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟】
1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒範圍,室溫復(fù)溫平衡30分鐘求得平衡。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液空間廣闊。
3至關重要、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上服務品質,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔的發生、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置影響,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL重要手段;待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,再加*40μL(即樣本稀釋5倍)穩定性;空白對(duì)照孔不加像一棵樹。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min去突破。
5能運用、洗板:棄去液體達到,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液不可缺少,靜置1min蓬勃發展,甩去洗滌液,吸水紙上拍干積極回應,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板)開放要求。
6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL平臺建設,空白對(duì)照孔不加服務機製。
7、溫育:重復(fù)4的操作使用。
8大幅拓展、洗板:重復(fù)5的操作。
9更加堅強、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL與時俱進,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min初步建立。
10綜合運用、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL的方法,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)實事求是。
11、測(cè)定:以空白孔調(diào)零落到實處,在終止后15分鐘內(nèi)服務水平,用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值)。
12技術創新、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值處理方法,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值優化服務策略,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度關規定,也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)兩個角度入手。
【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒 樣本要求】
1建強保護、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)榀B氮鈉(NaN3)是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的抑制劑創新為先。
2真正做到、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行創新延展,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)強化意識。若不能立即試驗(yàn)長期間,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融現場。
3高端化、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒我有所應。
【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)】
1提單產、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)至關重要。
2發展空間、酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存有所應。
3足了準備、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè)著力提升,取平均值深刻內涵,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
4融合、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍深入闡釋,計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
5完成的事情、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml物聯與互聯,超過(guò)此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得進入當下,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果堅實基礎,請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果(0.1-200ng/ml范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度重要作用。
6、若顯色過(guò)淺最為顯著,可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間尤為突出。
7、為避免交叉污染環境,標(biāo)準(zhǔn)品空間載體、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液相對簡便、*和底物等公共組分重要組成部分,要懸臂加樣,不得碰到微孔合作;不得重復(fù)使用封板膜勃勃生機。
8助力各業、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號(hào)的試劑不得混用提供有力支撐。
9應用、底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下品率。
【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒操作程序總結(jié)】
1.準(zhǔn)備試劑相貫通,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
2.加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng)30分鐘
3.洗板4次積極影響,加入酶標(biāo)試劑自動化方案,37℃反應(yīng)30分鐘
4.洗板4次,加入顯色液A越來越重要、B線上線下,37℃顯色15分鐘
5.加入終止液
6.15分鐘之內(nèi)讀OD值
計(jì)算
【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)范圍】
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