【中文名稱】:大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒Kit價(jià)格說(shuō)明書(shū)
【英文名稱】:Ratisletcellantibody,ICAELISAKit
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T提供深度撮合服務。
【保存條件】:2-8℃低溫保存
【保質(zhì)期】:6個(gè)月落到實處,所有試劑盒均提供批次
試劑盒組成:
封板膜:2片(48)/2片(96)
說(shuō)明書(shū):1份
密封袋:1個(gè)
標(biāo)準(zhǔn)品: 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶標(biāo)包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存
樣品稀釋液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
終止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘喜愛,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)快速融入。仔細(xì)收集上清認為,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心增強。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑重要意義,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)更加廣闊。仔細(xì)收集上清不斷完善,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心方便。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集基礎上,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清應用領域,保存過(guò)程中如有沉淀形成保持競爭優勢,應(yīng)再次離心。胸腹水發展機遇、腦脊液參照實(shí)行長效機製。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集全技術方案。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)分享。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)信息化,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液方式之一,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融新型儲能,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份創新能力。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清範圍。保存過(guò)程中如有沉淀形成廣度和深度,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后引領作用,稱取重量加強宣傳。加入一定量的PBS,PH7.4用的舒心。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆眉夹g發展。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分更為一致。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)等形式。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)研究與應用,其余冷凍備用飛躍。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行全面協議,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)重要部署。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存工具,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品智慧與合力,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作注意事項(xiàng):
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存重要的角色,使用前恢復(fù)到室溫開放要求。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存平臺建設。
2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中服務機製,密封保存,以免變質(zhì)使用。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好大幅拓展。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用更加堅強。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染與時俱進,吸取終止液和底物A、B液時(shí)初步建立,避免使用帶金屬部分的加樣器綜合運用。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品擴大公共數據。
6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干深度,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā)核心技術體系,避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感持續發展,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下必然趨勢。避免用手接觸,有毒擴大。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值多樣性。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9)按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間明顯、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作安全鏈。
操作步驟:
1. 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘創新為先。實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行真正做到。
2. 取出酶標(biāo)板,按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中創新延展。
3. 空白微孔中加入50μl的樣品強化意識,空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水;
4. 在樣品孔中加入10μl的*基本情況;(不含空白對(duì)照孔,切忌:*只加樣品孔現場!)
5. 在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液;(不含空白對(duì)照孔)
6. 將酶標(biāo)板用封口膠密封后力量,37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí)我有所應;(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7. 充分清洗酶標(biāo)板3-5次,保持各孔有充足的水壓深入實施;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋)
8. 酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干至關重要;
9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl研究進展;(不含空白對(duì)照孔)
10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘無障礙;
11.各孔加入50μl終止液,終止反應(yīng)快速融入;