實驗原理
 

　　試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)稍有不慎。往預(yù)先包被豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本高效、標(biāo)準(zhǔn)品溝通協調、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌體系。用底物TMB顯色高效節能，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色大局。顏色的深淺和樣品中的豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)呈正相關(guān)新創新即將到來。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值)，計算樣品濃度有序推進。
 

　　樣本處理及要求
 

　　1.血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜設施，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可堅定不移，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存組合運用，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
 

　　2.血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本迎難而上，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘積極，取上清即可檢測探索，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融集聚。
 

　　3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織競爭力，去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果)，稱重后將*碎狀況。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比機製性梗阻，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整全過程，并做好記錄集成應用。*在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨不負眾望。為了進一步裂解組織細(xì)胞高效流通，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復(fù)凍融精準調控。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘功能，取上清檢測。
 

　　4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000×g離心20分鐘解決，取上清即可檢測預期，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融幅度。
 

　　注：標(biāo)本溶血會影響后檢測結(jié)果結構，因此溶血標(biāo)本不宜進行此項檢測。
 

　　需要而未提供的試劑和器材
 

　　酶標(biāo)儀(450nm)
 

　　高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL經過、2-20uL簡單化、20-200uL、200-1000uL
 

　　37℃恒溫箱
 

　　蒸餾水或去離子水