蛋白質(zhì)作為生命活動中起重要作用的生物大分子提供有力支撐，與一切揭開生命奧秘的重大研究課題都有密切的關(guān)系相結合。蛋白質(zhì)是人類和其他動物的主要食物成分了解情況，高蛋白膳食是人民生活水平提高的重要標(biāo)志之一。以下針對純化蛋白與人血清蛋白分子量不一樣作分析：
 

　　客戶問：
 

　　用大腸桿菌表達(dá)純化的蛋白廣泛應用，和人血清中這種蛋白的分子量不同，western顯示血清中這種蛋白的分子量高于純化的蛋白橫向協同，請問如何解釋呢哪些領域？
 

　　技術(shù)答：
 

　　1  可能人血清中的蛋白是被修飾了的，如糖基化以及其他可以影響分子量的修飾不斷創新。不知道血清中的分子量比你純化的大多少KD建立和完善？
 

　　2  檢查一下蛋白序列中有沒有糖基化位點(diǎn)提供了遵循。大腸桿菌不能糖基化。
 

　　3  不知道如何確定是否用糖基化位點(diǎn)呢大型？血清中分子量比純化的高個2~3kd吧服務效率，這是糖基化么？
 

　　4  N即Asparagine Asp
 

　　X即任意氨基酸
 

　　T即Threonine Thr
 

　　S即Serine Ser
 

　　NXT NXS即在氨基酸一級結(jié)構(gòu)中有Asp-X-Thr或Asp-X-Ser序列則會被糖基化重要意義。
 

　　查文獻(xiàn)我建議可查其蛋白質(zhì)性質(zhì)研究方面的文獻(xiàn)統籌發展，或以蛋白+糖基化作關(guān)鍵詞嘗試查詢。你關(guān)注生物活性時可不能忽略糖基化這一點(diǎn)哦體系，往往糖基化是很多蛋白折疊和實(shí)現(xiàn)活性的重要因素生產製造。
 

　　5  糖基化分三種，N糖基化有特殊識別序列N-X-S/T攜手共進，O糖基化發(fā)生位點(diǎn)迄今尚無明確規(guī)律共同，糖基磷脂酰肌醇錨定一般是定位在細(xì)胞膜上，可能血清中的蛋白是沒有的經過。由于糖基化不是由模板合成簡單化，表現(xiàn)出微觀不均一性，因此其分子量是有一定變化明確了方向。
 

　　一般可預(yù)測N糖基化位點(diǎn)優勢，如果存在N-X-S或N-X-T序列，則基本上都是要被糖基化的增產。能查找一下相關(guān)文獻(xiàn)便利性，如果你做的蛋白是已知的，一般都會有文獻(xiàn)報道糖基化分三種行動力，N糖基化有特殊識別序列N-X-S/T提供有力支撐，O糖基化發(fā)生位點(diǎn)迄今尚無明確規(guī)律，糖基磷脂酰肌醇錨定一般是定位在細(xì)胞膜上良好，可能血清中的蛋白是沒有的逐步顯現。由于糖基化不是由模板合成，表現(xiàn)出微觀不均一性引領，因此其分子量是有一定變化自動化裝置。
 

　　一般可預(yù)測N糖基化位點(diǎn)，如果存在N-X-S或N-X-T序列應用前景，則基本上都是要被糖基化的有很大提升空間。能查找一下相關(guān)文獻(xiàn)，如果你做的蛋白是已知的首次，一般都會有文獻(xiàn)報道可能性更大。。
 

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