當我們要檢測目的蛋白在組織中表達情況的時候進行培訓，如何選擇適合我們實驗需要的抗體重要的角色，并恰當保存使用管理，是每個科研人員需要細心考慮的技術創新√幚矸椒?？贵w種類繁多，品牌眾 多持續向好，技術(shù)參數(shù)不一習慣，價格和質(zhì)量更是相差甚大，如何購買到高質(zhì)量價格合適的抗體進展情況，并準確地做出我們想要的結(jié)果的積極性，其中有很多細節(jié)需要注意。

一至關重要、怎樣選擇適合你實驗需要的抗體不久前？

1. 一抗選擇要點

（1）確定抗體的名字，注意中英文名字提升行動、它名綜合措施、亞型等信息。

（2）確定你的實驗類型自然條件，Elisa設計標準，WB，IHC互動互補，ICC發揮重要帶動作用，還是FACS。一般抗體的說明書都會列出該抗體經(jīng)驗證過適用于何種實驗的類型意料之外，如果抗體說明 書沒有提及的應用類型文化價值，并不意味著該抗體不適用于此種分析應用類型，而僅是說明尚未經(jīng)過此種實驗驗證置之不顧，請根據(jù)說明書列出的已驗證的類型來選擇適合你實驗的 抗體不斷完善。

（3）確定實驗樣本的種屬，Human方便，Mouse基礎上，還是Rat。一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗驗證過適用于何種物種實驗傳遞，請根據(jù)說明書列出已驗證的種屬來選擇適合你實驗的抗體融合。

（4）樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)。了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇zui合適的抗體相關性，待測樣本蛋白的結(jié)構(gòu)域和樣本在提取和處理過程中是否會變性完成的事情，蛋白空間構(gòu)象的改變，會影響抗體的免疫親和反應穩定。

（5）單多克隆抗體的選擇改造層面。市面上的抗體還是以多克隆抗體為主供給，一般單克隆抗體特異性強，但親和力相對小經驗分享，檢測抗原靈敏度相對就低可能性更大；而多克隆抗體特異性稍弱方案，但抗體的親和力強具體而言，靈敏度高進行探討，但易出現(xiàn)非特異性染色（可以通過封閉等避免）。

2. 二抗選擇要點

（1）種屬來源發展需要。主要根據(jù)一抗種屬來源來決定購買二抗來源攻堅克難，如一抗是小鼠來源，那二抗就買抗小鼠的即可（羊顯示、兔等均可）雙向互動。

（2）標記物的選擇。有HRP設計能力、Biotin品牌、熒光素等標記物。一般SP三步法二抗選擇Biotin標記的二抗更為一致，以與后面的SP結(jié)合反應等形式，而免疫熒光染色就需要購買不同熒光素標記的二抗，如羅丹明研究與應用、FITC飛躍、Cy3等常用熒光素。

二全面協議、抗體的穩(wěn)定性

1. 抗體的穩(wěn)定性是自然界*進化的結(jié)果重要部署。抗體是免疫系統(tǒng)中zui重要的分子之一工具，其穩(wěn)定性是自然進化篩選的結(jié)果線上線下。在眾多物種中，抗體分子形成了保守而穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)醒悟。

2. 抗體分子的高Tm值數據顯示。在室溫下，甚至短時間溫度達到50-60℃能運用，抗體分子都能維持正確折疊達到，保持應有的活性。

3. 抗體的純度不可缺少。采用*的抗體純化技術(shù)，確碧攸c？贵w產(chǎn)品的高純度積極回應，保障其抗體產(chǎn)品的穩(wěn)定性重要性。

4. 抗體的濃度。高濃度的抗體產(chǎn)品可減少容器表面吸附造成的物質(zhì)損失多種場景，高濃度的抗體穩(wěn)定性更好多元化服務體系，抗體產(chǎn)品中93%的濃度大于0.5mg/ml。

三擴大公共數據、怎樣確定抗體購買渠道和品牌深度？

國外抗體品牌的質(zhì)量一般沒問題，但價格較貴核心技術體系，而且很多抗體品牌本身不生產(chǎn)抗體開拓創新，所以能找到OEM抗體生產(chǎn)商生產(chǎn)的*抗體，隨著網(wǎng)絡技術(shù)的越來越普及必然趨勢，我們自己就可以通 過國內(nèi)外的相關(guān)來檢索促進善治，國外zui大的生物試劑查詢：biocompare，大的生物試劑查詢：丁香通多樣性，來查找我們所需要的產(chǎn)品資料發揮效力。

四、怎樣保存已獲得的抗體明顯？

抗體無論是保存還是運輸都應盡可能地避免反復凍融安全鏈，收到抗體后請根據(jù)實驗的需要，對抗體進行分裝創新為先，避免同一管抗體反復凍融（反復凍融會導致抗體空間結(jié)構(gòu)變 性處理方法，導致多聚體形成，從而降低抗體的結(jié)合能力）持續向好￡P規定？贵w保存得當與否，直接決定了抗體的活性和使用效果兩個角度入手，如果抗體保存得當建強保護，抗體活性大部分都可以維持數(shù)年。 請謹記生產效率，無論何時請按照說明書*的保存條件正確處理和保存抗體使命責任。

1. 收到抗體后，請務必在4℃使用，12000rpm合規意識，離心3分鐘，（無論是液體還是凍干粉狀態(tài)）有效性，再打開管蓋進行分裝和保存（如果抗體體積小于50ul創新內容，請延長 離心時間至5分鐘，以保證全部抗體均離心下來）∩旗侗O督？贵w一般使用特制的儲存管集成技術，只有在12000rpm離心3分鐘，才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下 來（即使是在10000rpm離心也會離心不*更合理，導致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象）適應能力。

2. 對于ProSci大部分抗體，比較合適的保存方式是各方面，分裝后保存在-20℃或者-80℃防控。

（1）對絕大多數(shù)抗體來說，保存在-20℃就*足夠了適應性，沒有任何證據(jù)顯示保存在-80℃會更好堅實基礎。

（2）分裝可以zui大程度的降低反復凍融對抗體活性的損害，同時也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性融合。

（3）分裝的量以一次實驗用完為好深入闡釋，zui少不能少于10ul每份。因為分裝體積越小完成的事情，抗體的濃度越可能會受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響物聯與互聯。

（4）復融后的分裝抗體如果一次用不完，將剩余母液保存在4℃改造層面，避免再凍起來供給。

（5）抗體工作液應該當天配制當天用完，4℃保存盡量不要超過1天利用好。

（6）避免將抗體保存在自動除霜冰箱中深入各系統，將抗體保存在冰箱里層，避免溫度變化造成反復凍融系列。

3. 大部分抗體收到后4℃短暫保存1~2周對抗體活性沒有影響作用。

4. 大部分抗體的運輸條件：一般的運輸過程需要1~2周的時間，所以是在低溫4℃的條件下來完成的慢體驗。

4℃運輸zui主要的目的是為了避免反復凍融對抗體活性的損害（如果使用干冰運輸著力增加，那么收到時抗體是凍起來的，為了分裝就需要解凍科技實力，這就多了一次凍融的過程）處理，所以運輸過程中避免干冰運輸。

關(guān)于*（sodium azide）的使用：

為了防止微生物污染在此基礎上，*經(jīng)常被加入到抗體中（終濃度0.02% (w/v)）助力各行。ProSci的絕大部分抗體已經(jīng)含有了0.02％-0.05%的*，在說明書的儲存緩沖液中有標明自主研發。

注：*的去除方式

可以通過凝膠電泳或過濾的方式去除確定性，IgG的分子量是150kDa（IgM約600kDa）更加廣闊；*的分子量只有65Da，使用截留分子量為14kDa的濾膜即可將*從抗體中去除相貫通。