幾種常見的拉曼技術(shù)
共振拉曼(RRS)
如果激光的波長和分子的電子吸收相吻合去完善，這一分子的某個或幾個特征拉曼譜帶強度將增至100-10,000 倍以上橋梁作用，并觀察到正常拉曼效應中難以出現(xiàn)的、其強度可與基頻相比擬的泛音及組合振動光譜求索。這種共振增強或共振拉曼效應非常有用讓人糾結，不僅能顯著降低檢測限，而且可引入電子選擇性穩定發展。由于共振拉曼能提供結(jié)構(gòu)及電子等信息基石之一，因此，共振拉曼也被用于物質(zhì)鑒定增持能力。
紫外共振拉曼(UVRRS)
熒光干擾問題和靈敏度較低嚴重阻礙了常規(guī)拉曼光譜的廣泛應用共同努力。但近年來發(fā)展起來的紫外拉曼光譜技術(shù)有效地解決了上述問題。紫外拉曼光譜技術(shù)的出現(xiàn)和發(fā)展大大地擴展了拉曼光譜的應用范圍追求卓越。右圖是紫外拉曼光譜避開熒光干擾的原理圖逐漸完善。熒光往往出現(xiàn)在300 nm-700 nm 區(qū)域，或者更長波長區(qū)域合理需求。而在紫外區(qū)的某個波長以下是目前主流，熒光極少出現(xiàn)充分發揮。因此，對于許多在可見拉曼光譜中存在強熒光干擾的物質(zhì)充分發揮，例如氧化物選擇適用、積碳等， 通過利用紫外拉曼光譜技術(shù)就可以成功的避開熒光從而得到信噪比較高的拉曼譜圖設計。從下圖磷酸鋁分子篩ALPO-5 示例可以看出業務指導，紫外共振拉曼光譜技術(shù)由于能避開熒光，可以成功用于微孔和介孔分子篩材料的表征信息化。
紫外拉曼光譜技術(shù)的另一個突出特點是形勢，拉曼信號可以通過共振拉曼信號得到增強。共振拉曼效應可以從拉曼散射截面公式得到解釋：根據(jù)Kramers-Heisenberg-Dirac 散射公式:
在公式 (1) 中取得明顯成效，ωri 是初始態(tài)i 到激發(fā)態(tài)r 的能量差頻率約定管轄，ωL 是入射激光頻率。當激發(fā)光源頻率靠近電子吸收帶時創新的技術，*項分母趨近于零發揮，因而其散射截面異常增大, 導致某些特定的拉曼散射強度增加104~106 倍。共振拉曼光譜的譜峰強度隨著激發(fā)線的不同而呈現(xiàn)出與普通拉曼不同的變化快速增長。
紫外拉曼光譜規(guī)避熒光成功表征AIPO-5 分子篩的信號
將紫外共振拉曼用于表征多組份體系時開放以來，可以選擇性的激發(fā)某些組分相應的信息，從而使與這些組分相關(guān)的拉曼信號大大增強高質量，得到共振拉曼光譜
這種共振增強或者共振拉曼效應是非常有用的一個技術(shù)提供了有力支撐，它不僅可以極大的降低拉曼測量的探測極限，而且還可以引入到電子選擇上面前景。這樣進一步意見，如果我們使用共振拉曼技術(shù)來研究樣品，不僅可以看到它的結(jié)構(gòu)特征共享應用，而且還可以得到它的電子結(jié)構(gòu)信息生產能力。金屬卟啉， 類胡蘿卜素以及其他一系列生物重要分子的電子能級之間躍遷能量差都處在可見光范圍之內(nèi)示範推廣，這使得它們成了共振拉曼光譜的理想研究材料堅持好。
拉曼散射和共振拉曼散射的能級圖以及它們對應拉曼譜圖示意圖
共振選擇技術(shù)還有一個非常實際的應用。那就是二分之一載色體的光譜由于這種共振作用會得到增強大幅增加，而它周圍的環(huán)境則不會特性。對于生物染色體來說這就意味著，我們使用可見光即可特定的探測到有源吸收中心交流研討，而它們周圍的蛋白質(zhì)陣列則不會對探測產(chǎn)生影響（這是因為這些蛋白質(zhì)需要紫外光才能使其產(chǎn)生共振增強作用）更加完善。共振拉曼光譜在化學上探測金屬中心合成物，富勒分子建設應用，聯(lián)乙醯以及其他的稀有分子上也是一種重要的技術(shù)支撐作用，因為這些材料對于可見光都有著很強的吸收。
其他更多的分子吸收光譜由于處于紫外動力，所以需要紫外激光進行共振激發(fā)同時，我們就稱之為紫外共振拉曼（Ultra Violet Resonance Raman Spectroscopy）; 紫外共振拉曼光譜技術(shù)是研究催化和復雜生物系統(tǒng)中分子分析的一個重要工具。大多數(shù)的生物系統(tǒng)都吸收紫外輻射自然條件， 所以它們都能提供紫外的共振拉曼增強設計標準。這樣高的共振拉曼共振選擇效應使得像蛋白質(zhì)和DNA 等重要生物目標的拉曼光譜得到極大增強， 而其他物質(zhì)則不會互動互補，非常便于目標確認及分析發揮重要帶動作用。例如，200nm 的激發(fā)光能夠增強氨基化合物的振動峰意料之外；而220nm 的激發(fā)光則可以增強特定的芳香族殘留物的振動峰文化價值。水中的拉曼散射非常弱，這個技術(shù)使得與水有關(guān)的微弱系統(tǒng)的拉曼分析也變成了可能置之不顧。
金屬卟啉不斷完善、類胡蘿卜素以及其他幾類重要的生物分子在可見光區(qū)域內(nèi)有強烈的電子躍遷，因此他們成了理想的共振拉曼光譜檢測對象方便。
表面增強拉曼（SERS）
自1974 年Fleischmann 等人發(fā)現(xiàn)吸附在粗糙化的Ag 電極表現(xiàn)的吡啶分子具有巨大的拉曼散射現(xiàn)象基礎上，加之活性載體表面選擇吸附分子對熒光發(fā)射的抑制，激光拉曼光譜分析的信噪比大大提高應用領域，這種表面增強效應被稱為表面增強拉曼散射(SERS)保持競爭優勢。
拉曼散射由化合物（或離子）的散射吸附，或在結(jié)構(gòu)化金屬表面發展機遇，可達到溶液中散射的103 倍到106 倍長效機製。這種表面增強拉曼散射在銀表面表現(xiàn)得zui強，在金或銅表面也比較強服務體系。其他金屬則沒有這么強的增強效應說服力。
表面增強效應產(chǎn)生的兩個機制：
*種是在貴金屬表面產(chǎn)生一種增強的電磁場。當入射光的波長接近金屬等離子體波長時分析，金屬表面?zhèn)鲗щ娮颖患ぐl(fā)到一個擴展表面的電子激發(fā)態(tài)表示，稱為表面等離子體共振。分子吸附在表面或接近表面經(jīng)過一個異常大的電磁場非常激烈。垂直于表面的振動模式帶來的增強zui強烈競爭力所在。
第二種是是在表面和分析物分子之間形成電荷轉(zhuǎn)移絡合物。許多電荷轉(zhuǎn)移絡合物帶來的電子躍遷會產(chǎn)生可見光領域，以便發(fā)生增強諧振溝通機製。
顯微共聚焦拉曼（Confocal）
共焦：從一個點光源發(fā)射的探測光通過透鏡聚焦到被觀測物體上，如果物體恰在焦點上，那么反射光通過原透鏡應當匯聚回到光源領先水平， 這就是所謂的共聚焦雙向互動，簡稱共焦。共焦指的是空間濾波的能力和控制被分析樣品的體積的能力設計能力，通常是利用顯微鏡系統(tǒng)來實現(xiàn)的品牌。只有顯微鏡系統(tǒng)的無限遠光路才可以實現(xiàn)良好的共焦性能。
顯微拉曼光譜技術(shù)是將拉曼光譜分析技術(shù)與顯微分析技術(shù)結(jié)合起來的一種應用技術(shù)更為一致。與其他傳統(tǒng)技術(shù)相比等形式，更易于直接獲得大量有價值信息，共聚焦顯微拉曼光譜不僅具有常規(guī)拉曼光譜的特點研究與應用，還有自己的*優(yōu)勢飛躍，樣品區(qū)接近衍射極限（約1 微米）；成像和光譜可以被組合以產(chǎn)生“拉曼立方體”三維數(shù)據(jù)全面協議，在二維圖像的每個像素對應一個拉曼頻譜信息重要部署。
從光學結(jié)構(gòu)來說，顯微共聚焦拉曼光譜儀主要有針孔共聚焦和“狹縫-CCD”共聚焦兩種設計結(jié)構(gòu)新的動力。
先進的“狹縫+CCD 焦平面共焦”技術(shù)的過程中，具有較高通光效率，高靈敏度廣泛關註，操作簡單促進進步。
原理：顯微鏡頭聚焦到樣品上，將顯微鏡頭收集的樣品信號聚焦到光譜儀狹縫入口優勢領先，通過狹縫對焦平面的一維（X 方向）限制進入光譜儀迎來新的篇章； 經(jīng)光譜儀分光，光譜成像在CCD 上推動並實現；在通過對CCD 上像元的提取薄弱點， 對另一維（Y 方向）的信號的限制，提取出樣品上的信號優化程度，實現(xiàn)共焦作用積極性。“狹縫+CCD 焦平面共焦”技術(shù)特點：
1、 共焦區(qū)域任意設置（狹縫寬度不斷豐富，CCD 像元區(qū)域任意設定）實施體系。
2、 全部信號進入光譜儀各有優勢，沒有信號損失效果較好。
采用“狹縫+CCD焦平面共焦”技術(shù)的Finder Vista（“微曼”共聚焦拉曼顯微鏡）空間分辨率指標：
X，Y方向空間分辨率：1um
Z方向空間分辨：2um
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