詳見說明書
CCK-8(細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒)
CCK-8(細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒) 使用說明：
一、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（測定細(xì)胞具體數(shù)量時 （測定細(xì)胞具體數(shù)量時）
1發揮、先用細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量顯著，然后接種細(xì)胞。
2開放以來、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細(xì)胞濃度梯度占，一般要做 3-5 個細(xì)胞濃度梯度，每組 3-6 個復(fù)孔結構不合理。
3動手能力、接種后培養(yǎng)至細(xì)胞貼壁，然后加 CCK-8 試劑培養(yǎng)一定時間后測定 OD 值意見征詢，制作出一條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)（X 軸）提升，OD 值為縱坐標(biāo)（Y 軸）的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可以測定出未知樣品的細(xì)胞數(shù)量（試用此標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是實驗的條件要一致的必然要求，便于確定細(xì)胞的接種數(shù)量以及加入 CCK-8 后的培養(yǎng)時間研究成果。）
二取得了一定進展、細(xì)胞活性檢測
1、在 96 孔板中接種細(xì)胞懸液（100µL/孔）大面積。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)（在 37℃,5% CO2 的條件下）積極參與。
2、向每孔加入 10µL CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成氣泡培養，它們會影響 OD 值的讀數(shù)）交流研討。
3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時形式。
4建設應用、用酶標(biāo)儀測定在 450nm 處的吸光度。
5日漸深入、如果暫時不測定 OD 值動力，打算以后測定的話，可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液互動式宣講，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下自然條件。在 24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。
三開展、細(xì)胞增值-毒性檢測
1互動互補、在 96 孔板中配置 100 µL 的細(xì)胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng) 24 小時（在 37 ℃意向，5% CO2 的條件下）成就。
2、向培養(yǎng)板加入 10µL 不同濃度的待測物質(zhì)開展面對面。在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r間（例如：6、12非常重要、24 或 48 小時）進一步提升。
3、向每孔加入 10 µL CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成氣泡營造一處，它們會影響 OD 值的讀數(shù)）改革創新。如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話，可在加 CCK-8 之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基取得顯著成效，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次新模式，然后加入新的培養(yǎng)基），去掉藥物影響不容忽視。
4組織了、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時。
5說服力、用酶標(biāo)儀測定在 450 nm 處的吸光度搶抓機遇。
6分析、如果暫時不測定 OD 值，打算以后測定的話全面闡釋，可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液非常激烈，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化引人註目。
