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BL523B 超敏ECL化學發(fā)光底物

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ECL超敏發(fā)光液用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶HRP的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。 用于HRP標記抗體的Western Blot和HRP標記探針的核酸雜交

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ECL化學發(fā)光底物(超敏)

產(chǎn)品簡介:

 ECL超敏發(fā)光液用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶HRP的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原製高點項目。 

用途:用于HRP標記抗體的Western BlotHRP標記探針的核酸雜交推進一步。

產(chǎn)品特點:

1經過、靈敏度高:可檢測低皮克級的蛋白;

2力度、信號持續(xù)時間長:光信號持續(xù)時間長達5小時明確了方向;

3、穩(wěn)定試劑:工作液在24小時內(nèi)保持穩(wěn)定勇探新路;

4單產提升、成像方法:適用于X射線膠片、CCD或激光凝膠成像儀試驗;

5勞動精神、價格經(jīng)濟:針對稀釋的抗體濃度條件進行了優(yōu)化,節(jié)省抗體:

一抗:以1 mg/mL儲存液稀釋1:1,0001:4,000

二抗:以1 mg/mL儲存液稀釋1:2,0001:5,000

6製度保障、簡單易用:可替代其它公司的ECL發(fā)光底物預下達,操作步驟無需進行特別優(yōu)化;

使用方法:

1統籌推進、執(zhí)行常規(guī)SDS-PAGE方案、轉(zhuǎn)膜和Western Blot步驟。注意用HRP標記IgG或用一抗-鏈親和素-*-HRP夾法。

2研究成果、 Western Blot*后一次洗膜的同時新鮮配制發(fā)光工作液:分別取等體積的溶液AB取得了一定進展,放入干凈容器中混合。建議立即使用工作液大面積,室溫放置數(shù)小時后仍可使用但靈敏度略有降低積極參與。

3、 用鑷子取出膜搖籃,搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜*干燥技術。將膜*浸入發(fā)光工作液(0.125mL發(fā)光工作液/cm2膜)中,與發(fā)光工作液充分接觸推動。室溫孵育3分鐘相對較高,準備立即壓片曝光。孵育時間過長不會增加靈敏度信息,有時還會導(dǎo)致曝光條帶異常相關。發(fā)光過程的本質(zhì)是酶促反應(yīng),使用過少的發(fā)光工作液不利反應(yīng)進行豐富內涵,也會導(dǎo)致膜上條帶曝光不均和明顯降低靈敏度生產效率。為達節(jié)約目的可將膜剪小但勿降低發(fā)光液用量。

4適應性、 用鑷子夾起膜節點,搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液。但勿洗去發(fā)光液落地生根。

5的特點、 打開X光膠片暗盒,在暗盒內(nèi)表面鋪一張面積大于膜的保鮮膜有效保障。將Western Blot膜貼在保鮮膜上大數據,將保鮮膜折起來*包裹Western Blot膜,去除氣泡和皺褶講實踐,可剪去邊緣部多余的保鮮膜數字技術。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液。用膠帶將覆蓋Western Blot膜的保鮮膜固定在暗盒內(nèi)市場開拓,蛋白帶面向上措施。

6、 暗房內(nèi)壓X光膠片要落實好,分別曝光不同的時間更高要求,如數(shù)秒到數(shù)分鐘。顯影沖洗講理論。建議第*次曝光 60 秒,之后可調(diào)整曝光時間以達到*佳結(jié)果》諡橐惑w;瘜W發(fā)光反應(yīng)在底物孵育后的前 5-30 min期間是*強烈的問題。這一反應(yīng)可以持續(xù)幾個小時,但強度會隨時間下降全會精神,如有底物孵育后較長時間后曝光系統穩定性,曝光時間可能需要延長以獲得較強信號。          

注意事項:

1)步驟15可在日光燈下操作集中展示;但發(fā)光液曝露于強光下時間過久靈敏度可能略有降低實力增強,移到暗房操作可避免之。

2)長時間曝光或蛋白過量探索創新,將加深背景并使條帶強弱變化失去線性關(guān)系帶來全新智能。曝光不足則條帶模糊。

3)發(fā)光工作液孵育約3分鐘后膜上的條帶發(fā)光新產品。強條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見去完善,低豐度蛋白條帶發(fā)光較弱甚至肉眼不可見但可使X光膠片曝光。肉眼不可見的熒光實際上可持續(xù)數(shù)小時并使X光膠片感光長遠所需,因而弱帶可曝光1-10小時求索。如果曝光后條帶不佳,可用洗膜緩沖液洗膜規模,重新孵育二抗穩定發展,然后重新用ECL發(fā)光和曝光。

4)由于超敏發(fā)光液極其靈敏聯動,建議按照推薦比例稀釋抗體增持能力。抗體濃度過高將造成高背景或沒有條帶生產體系,導(dǎo)致失敗服務。

5)某些保鮮膜包裹印跡膜時可能會淬滅熒光,應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜能力和水平。

6)使用肉眼可見的預(yù)染色蛋白Marker和熒光-放射自顯影曝光標簽可精確確定膠片上條帶的位置和大小覆蓋。

7)疊氮鈉是 HRP 的抑制物,不要使用疊氮鈉作為緩沖液的防腐劑研究。

保存條件:

  室溫運輸高效,℃密封避光保存一年,短期可放置室溫競爭激烈。


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