大腸埃希菌(大腸O157)stx1(282bp)和stx2(584bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒中含有聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)所需要各種試劑組分改進措施,如:引物就此掀開、dNTPs、緩沖液今年、Taq酶等穩步前行,PCR反應(yīng)液混合液中加入檢測樣品,即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)動手能力。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖電泳染色判斷逐步改善,陽性樣本將在相應(yīng)大小的片段處出現(xiàn)特異性條帶。
規(guī)格: 50T/100T
分類:pcr-熒光試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存提升,避免反復(fù)凍融持續。
運(yùn)輸:低溫、避光再獲,快遞免費(fèi)送貨上門產品和服務。
大腸埃希菌(大腸O157)stx1(282bp)和stx2(584bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增體驗區;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝增多;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測有望;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒進一步推進。
大腸埃希菌(大腸O157)stx1(282bp)和stx2(584bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒需要注意什么:
PCR反應(yīng)液請(qǐng)?jiān)诒信渲疲缓笾糜赑CR反應(yīng)儀上進(jìn)行PCR反應(yīng)方案。這種冷啟動(dòng)法(Cool Start Method)與熱啟動(dòng)法(Hot Start Method)相結(jié)合應用的選擇,更能有效地減少PCR過程中的非特異性反應(yīng),增強(qiáng)PCR擴(kuò)增的特異性即將展開,能得到良好的PCR結(jié)果大幅增加。
PCR的反應(yīng)條件:
因擴(kuò)增片段的大小、反應(yīng)體積傳承、使用擴(kuò)增儀器的不同而不同等特點。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴(kuò)增片段的大小,設(shè)定25~30個(gè)循環(huán)多種。
如果循環(huán)次數(shù)太少將進一步,擴(kuò)增量不足充分發揮;如果循環(huán)次數(shù)太多,則會(huì)出現(xiàn)Smear成就。
◇ Anneal以及Extension
大腸埃希菌(大腸O157)stx1(282bp)和stx2(584bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預(yù)備實(shí)驗(yàn)可2℃間隔進(jìn)行)重要方式。另外,由于在60~68℃間系統,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進(jìn)行2 Step PCR非常重要。Anneal-Extension溫度為68℃ 時(shí),每kbp大體可設(shè)定30秒~1分鐘空間廣闊;當(dāng)溫度設(shè)定在68℃以下時(shí), 時(shí)間設(shè)定可稍長一些營造一處。通常,Anneal溫度太高知識和技能,有時(shí)會(huì)得不到擴(kuò)增產(chǎn)物取得顯著成效;Anneal溫度太低時(shí),容易發(fā)生非特異性反應(yīng)更加廣闊。另外規劃,Extension時(shí)間太短時(shí),會(huì)得不到擴(kuò)增產(chǎn)物或者會(huì)有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成可以使用;而Extension時(shí)間太長時(shí)進入當下,會(huì)出現(xiàn)Smear。
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