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菌落計(jì)數(shù)儀逐步改善、菌落計(jì)數(shù)器

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技術(shù)文章

全自動菌落計(jì)數(shù)儀應(yīng)用領(lǐng)域介紹

點(diǎn)擊次數(shù):979 發(fā)布時間:2014-11-18

     在現(xiàn)今的高薪科學(xué)技術(shù)下,全自動菌落計(jì)數(shù)儀因其使用的自動化程度高問題分析、分析結(jié)果可核對培養、樣品信息可留存等更加完善,已逐漸被越來越多的科研院所、衛(wèi)生疾控部分所喜愛支撐作用。迅數(shù)科技有限公司是專業(yè)從事微生物分析測試技術(shù)研究與儀器裝備生產(chǎn)的高科技公司。目前主要生產(chǎn)自動菌落計(jì)數(shù)儀同時、螺旋接種微生物菌落分析儀互動式宣講、抑菌圈測量儀設計標準、β_內(nèi)酰胺測定儀、抗生素效價分析儀充分發揮、藻類計(jì)數(shù)儀、藻類輔助鑒定系統(tǒng)重要方式、浮游動物計(jì)數(shù)儀開展面對面、生物顯微分析系統(tǒng)等產(chǎn)品非常重要。產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于科學(xué)研究、檢驗(yàn)檢疫營造一處、質(zhì)量監(jiān)督、環(huán)境監(jiān)測取得顯著成效、疾控中心新模式、藥品與生物制品檢定、食品藥品日化生產(chǎn)不容忽視、以及鋼鐵石化化工電力等領(lǐng)域。

簡單介紹幾類應(yīng)用領(lǐng)域:

菌落計(jì)數(shù)

在常規(guī)的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中說服力,不管是食品 衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢測分析,還是藥品微生物限度檢查,還是研究活性物質(zhì)的抑菌性能實(shí)驗(yàn)全面闡釋,都常常需要對樣品中的微生物進(jìn)行定量或者濃度計(jì)算;眾多微生物定量方法中zui常用的就是對培養(yǎng)后的皮氏培養(yǎng)皿上所生長菌落進(jìn)行總數(shù)統(tǒng)計(jì)的菌落總數(shù)統(tǒng)計(jì)定量方法引人註目。
菌落總數(shù)統(tǒng)計(jì)定量方法因?yàn)樗臏?zhǔn)確性、靈敏性好宣講、簡便經(jīng)濟(jì)和可產(chǎn)生純培養(yǎng)等優(yōu)點(diǎn)而自19世紀(jì)末KochPetri先后發(fā)明固體培養(yǎng)基和雙層培養(yǎng)皿后沿用至今。100多年以來新產品,這種方法在新型培養(yǎng)基配方方面產(chǎn)生了很多改進(jìn)和發(fā)明創新能力,然而在zui耗費(fèi)人力和影響準(zhǔn)確性的菌落計(jì)數(shù)環(huán)節(jié)進(jìn)展不大。
目前求得平衡,大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室仍采用傳統(tǒng)的人工肉眼結(jié)合菌落計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)方法:借助放大鏡的觀察紮實做,用計(jì)數(shù)筆點(diǎn)擊每一個菌落至關重要,計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)每一個點(diǎn)擊產(chǎn)生的壓力電子脈沖得出總數(shù)。這樣雖然成本低廉的發生,但有以下幾大缺點(diǎn):
 1.識別和記數(shù)錯漏:所有的計(jì)數(shù)都依靠對壓力脈沖產(chǎn)生次數(shù)的記錄,不同人員的操作產(chǎn)生的壓力不同就難免產(chǎn)生漏記新的動力,而且計(jì)數(shù)的結(jié)果也因操作人員對菌落的識別經(jīng)驗(yàn)不同而產(chǎn)生差異的過程中,系統(tǒng)偏差較大廣泛關註。
2. 標(biāo)記和修正不便:肉眼計(jì)數(shù)和菌落計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)都依靠計(jì)數(shù)筆在被統(tǒng)計(jì)的菌落上留下墨水筆跡來進(jìn)行標(biāo)記,因此在存在密集菌落的情況下就標(biāo)記不便優勢領先,而且發(fā)現(xiàn)誤統(tǒng)計(jì)時需擦去墨水痕跡導(dǎo)致修正不便。
3.效率低下:肉眼計(jì)數(shù)和菌落計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)都需要人工用肉眼識別每一個菌落推動並實現,因此一旦樣品較多就會耗費(fèi)大量的時間,影響研究或是結(jié)果報告的效率信息化。
 4. 原始結(jié)果無法保存:在做完統(tǒng)計(jì)后形勢,留下了一個統(tǒng)計(jì)數(shù)字,而對記錄和驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果很重要的培養(yǎng)平板表面菌落生長狀況卻因?yàn)槠桨宓南吹舳鵁o法保存約定管轄。
迅數(shù)科技全自動菌落計(jì)數(shù)儀利用高保真光學(xué)鏡頭和高分辨率CCD數(shù)字成像技術(shù)以及迅數(shù)Colonfast菌落圖像智能識別技術(shù);1秒鐘完成平板上所有菌落的智能識別發揮、自動標(biāo)記和累加計(jì)數(shù)顯著;適合細(xì)菌、霉菌性能、酵母菌、放線菌菌落計(jì)數(shù)和菌落形態(tài)分析綜合運用;支持各種類型的平板,如傾注平板實事求是、涂布平板、膜濾平板服務水平、3M紙片等,同時保存高清晰微生物菌落圖片最新。
噬菌體計(jì)數(shù)
    噬菌體的效價是指1ml培養(yǎng)液中含侵染性的噬菌體粒子數(shù)處理方法。一般一個噬菌體形成一個噬菌斑,故可根據(jù)一定體積的噬菌體培養(yǎng)液所出現(xiàn)的噬菌斑形成單位(plaque-forming unit 習慣,PFU),計(jì)算出噬菌體的效價的積極性。
噬菌斑(Plaque):將少量噬菌體與大量宿主細(xì)胞混合后方案,將此混合液與45左右的瓊脂培養(yǎng)基在培養(yǎng)皿中充分混勻十大行動,鋪平后培養(yǎng)。當(dāng)一個噬菌體侵染一個敏感細(xì)胞后綜合措施,不久即釋放出一群子代噬菌體可靠保障,它們通過瓊脂層的擴(kuò)散又侵染周圍的宿主細(xì)胞設計標準,并又引起它們裂解,如此經(jīng)過多次重復(fù)經(jīng)數(shù)小時至10余小時后,在平板表面布滿宿主細(xì)胞的菌苔上意向,肉眼就可看到的一個個透亮不長菌的小圓斑,這就是噬菌斑形式。
    由此可見,噬菌斑的形成與細(xì)菌菌落的形成有點(diǎn)相似足了準備,所不同的只是噬菌斑甚像一個負(fù)菌落合作關系。迅數(shù)*可應(yīng)用于噬菌斑平板計(jì)數(shù)的自動化深刻內涵。
重組克隆篩選
重組克隆篩選又稱為藍(lán)白斑篩選,是在指示培養(yǎng)基上用顏色直接篩選重組克隆的方法。迅數(shù)-*的顏色識別功能模塊可以出色的區(qū)分出培養(yǎng)基圖象上的藍(lán)色/白色菌落深入闡釋,在一秒內(nèi)獲取培養(yǎng)基上藍(lán)色或者白色菌落數(shù)極其與菌落總數(shù)的比值。
    
藍(lán)白斑篩選是根據(jù)載體的遺傳特征篩選重組子物聯與互聯,如α-互補(bǔ)、抗生素基因等〖檶?,F(xiàn)在使用的許多載體都帶有一個大腸桿菌的DNA的短區(qū)段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調(diào)控序列和前146個氨基酸的編碼信息投入力度。在這個編碼區(qū)中插入了一個多克隆位點(diǎn)(MCS),它并不破壞讀框不難發現,但可使少數(shù)幾個氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影響功能,這種載體適用于可編碼β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主細(xì)胞發展需要。因此,宿主和質(zhì)粒編碼的片段雖都沒有酶活性顯示,但它們同時存在時雙向互動,可形成具有酶學(xué)活性的蛋白質(zhì)。這樣品牌,lacZ基因在缺少近操縱基因區(qū)段的宿主細(xì)胞與帶有完整近操縱基因區(qū)段的質(zhì)粒之間實(shí)現(xiàn)了互補(bǔ),稱為α-互補(bǔ)更為一致。由α-互補(bǔ)而產(chǎn)生的LacZ+細(xì)菌在誘導(dǎo)劑IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在時產(chǎn)生藍(lán)色菌落研究與應用,因而易于識別更高效。然而,當(dāng)外源DNA插入到質(zhì)粒的多克隆位點(diǎn)后自動化方案,幾乎不可避免地導(dǎo)致無α-互補(bǔ)能力的氨基端片段,使得帶有重組質(zhì)粒的細(xì)菌形成白色菌落互動講。這種重組子的篩選穩定性,又稱為藍(lán)白斑篩選過程中。如用藍(lán)白斑篩選則經(jīng)連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化的鈣化菌平板37溫箱倒置培養(yǎng)12-16hr后,有重組質(zhì)粒的細(xì)菌形成白色菌落達到。

工業(yè)循環(huán)水的微生物監(jiān)測
       工業(yè)循環(huán)冷卻水系統(tǒng)中由于溫度適宜、pH值適中蓬勃發展、營養(yǎng)源豐富特點,極易繁衍滋生細(xì)菌重要性、真菌和藻類等微生物又進了一步,微生物分泌產(chǎn)生的粘液與水中各種懸浮雜質(zhì)多元化服務體系,粘合在一起而形成的粘泥,是循環(huán)冷卻水處理中三大危害(結(jié)垢深度、菌藻滋生和腐蝕)之一帶動擴大。因系統(tǒng)中生物粘泥會導(dǎo)致水質(zhì)惡化、管道堵塞開拓創新、設(shè)備腐蝕和系統(tǒng)傳熱效率下降,工業(yè)循環(huán)水處理系統(tǒng)要定期進(jìn)行藥劑投放殺菌滅藻及生物粘泥剝離處理促進善治。而工業(yè)循環(huán)水處理系統(tǒng)的微生物菌落總數(shù)的動態(tài)監(jiān)測擴大,可以發(fā)現(xiàn)問題及時采取處理措施發揮效力。
要實(shí)現(xiàn)菌落總數(shù)的動態(tài)監(jiān)測,增加分析頻度是關(guān)鍵服務水平。目前國家標(biāo)準(zhǔn)中工業(yè)循環(huán)冷卻水和電子級水的細(xì)菌總數(shù)測定是標(biāo)準(zhǔn)平皿計(jì)數(shù)法(Standard Plate Counting,SPC)十分落實,這種標(biāo)準(zhǔn)方法雖然準(zhǔn)確但需經(jīng)過水樣采集,梯度稀釋製造業,培養(yǎng)和人工計(jì)數(shù)等步驟,操作繁瑣發展基礎,人力物力消耗大兩個角度入手。近年來環(huán)境監(jiān)測機(jī)構(gòu)如寶鋼環(huán)境監(jiān)測站同期,中石油蘭州石化環(huán)境檢測中心等單位紛紛引入自動化菌落計(jì)數(shù)設(shè)備-*來滿足增加細(xì)菌分析頻度的需要。經(jīng)驗(yàn)證效果,這種*數(shù)秒就能準(zhǔn)確計(jì)算出一個平板上幾千個微小菌落使用,因此可以省卻煩瑣的樣品梯度稀釋步驟和實(shí)驗(yàn)材料損耗密度增加;因?yàn)槭菣C(jī)器自動菌落計(jì)數(shù)有效性,又省卻了重復(fù)枯燥容易疲勞的人工計(jì)數(shù)步驟機遇與挑戰,使工作人員完成每天的微生物檢測工作廣泛關註。

細(xì)菌計(jì)數(shù)-螺旋平板法
 

       螺旋接種菌落計(jì)數(shù)方法是一種新的食品集成技術,化妝品以及研究用樣品中微生物的快速定量方法。這種螺旋接種菌落計(jì)數(shù)方法創(chuàng)建于1976年適應能力,由Donnelly, C.B., J.E. Gilchrist等人zui先提出更優美,經(jīng)過20多年的實(shí)際應(yīng)用,國外微生物學(xué)界已經(jīng)普遍認(rèn)可,并列為分析化學(xué)家協(xié)會(AOAC)的*方法著力提升,已被美國食品*(FDA)收錄為國家標(biāo)準(zhǔn)深刻內涵。

螺旋接種菌落計(jì)數(shù)是依據(jù)阿基米德螺旋原理融合,使樣品以對數(shù)規(guī)律螺旋線形式接種在平板上。樣品接種后完成的事情,菌落即分布在螺旋軌跡上統籌,隨半徑的增加分布得越來越稀。采用特殊的計(jì)數(shù)柵格協同控製,自平板外周向*對平皿上的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),即可得到樣品中微生物的數(shù)量。螺旋接種菌落計(jì)數(shù)方法加樣量深入各系統,菌落分布均勻解決問題,且可以很大程度上減少或免除樣本稀釋過程作用,因此在國外食品藥品的菌落計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中得到廣泛應(yīng)用相互配合。20081月著力增加,中國*也通過審定了中國的SN行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)-“食品和化妝品中的菌落計(jì)數(shù)檢驗(yàn)方法-螺旋平板法”,于200921正式實(shí)施處理。
迅數(shù)G6*包含“螺旋接種平板分析模塊(Shineso spiral plate counter)”,符合國家質(zhì)檢總局SN標(biāo)準(zhǔn)和美國FDA螺旋計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)極致用戶體驗,并可兼容分析螺旋接種儀西班牙IUL,美國SBI)接種的螺旋平板建議,其兼容性已在中國微生物研究和檢測機(jī)構(gòu)得到驗(yàn)證。

抑菌圈測量 

抑菌圈測量是微生物分析的經(jīng)典方法相貫通。它是利用抑菌物質(zhì)在涂布特定試驗(yàn)菌的瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)成球形立體狀擴(kuò)散,抑制試驗(yàn)菌的繁殖自動化方案,在抑菌物質(zhì)的周圍形成透明圈緊密協作,即抑菌圈。 常規(guī)都是用游標(biāo)卡尺手工測量抑菌圈的直徑線上線下,如今可以用儀器自動進(jìn)行分析發揮重要作用,提高檢測精度數據顯示,減少測量誤差高質量。
迅數(shù)-自動抑菌圈測量系統(tǒng)是通過CCD 采集數(shù)字圖像后更多的合作機會,進(jìn)行自適應(yīng)差分濾波預(yù)處理延伸,采用改進(jìn)的四叉樹交叉熵分割算法進(jìn)行準(zhǔn)確快速的分析服務好,檢測出抑菌圈直徑數(shù)據(jù)新趨勢,zui后對數(shù)據(jù)建模統(tǒng)計(jì)共謀發展,自動得到分析結(jié)果學習。所有分析過程只要一秒就可以完成結構重塑。
手動測量存在的問題有: 
 1. 重現(xiàn)性差新的力量,準(zhǔn)確性不夠:同一培養(yǎng)皿,不同的人測量結(jié)果有差異全面展示; 
 2. 當(dāng)抑菌圈呈卵原形重要平臺、邊緣模糊 或出現(xiàn)雙層圈 時,邊界確定的人為誤差大核心技術;
 3. 一個培養(yǎng)皿內(nèi)有大量 抑菌圈時,如做菌種篩選時創造性,無法人工測量發展的關鍵;
 自動抑菌圈測量的好處在于:快速、精度高規模設備、重現(xiàn)性好、操作簡單競爭力。

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