生物組織由細胞構(gòu)成市場開拓，而細胞由蛋白質(zhì)、核酸大大縮短、脂肪等拉曼信號較強的基本物質(zhì)構(gòu)成要落實好。疾病的產(chǎn)生往往伴隨組織和細胞的惡變,最早體現(xiàn)在蛋白質(zhì)緊密相關、核酸、脂肪等基本構(gòu)成物分子結(jié)構(gòu)構(gòu)象或數(shù)量上的變化先進技術，但疾病初期這些變化的臨床癥狀和醫(yī)學(xué)影像表現(xiàn)往往并不明顯培訓，因此對于初期癥狀不太明顯的病癥檢測仍需要尋求一些其他的技術(shù)手段和方法來實現(xiàn)早期診斷！
拿腫瘤檢測舉例宣講手段，腫瘤的三種主要檢測方法為腫瘤標(biāo)志檢測重要工具、組織病理學(xué)診斷和影像學(xué)診斷[1]。腫瘤標(biāo)志物檢測易受個體差異以及某些良性疾病的影響配套設備，一般只能作為輔助手段更優質；組織病理學(xué)診斷是腫瘤診斷臨床應(yīng)用上的“金標(biāo)準"，該方法從組織和細胞尺度上進行腫瘤的診斷推進高水平。組織病理學(xué)是一門非常復(fù)雜的學(xué)科脫穎而出，要求檢測人員具有豐富的經(jīng)驗，對檢測人員的專業(yè)性要求較高資料，且診斷的時效差廣泛應用，屬于有創(chuàng)的診斷方式。影像學(xué)診斷一般借助熒光成像或者其他顯微成像技術(shù)橫向協同，會引入外部標(biāo)記物哪些領域，可能無法反應(yīng)正常的細胞環(huán)境。
拉曼光譜是一種分子診斷技術(shù)不斷創新，在生物分子水平上顯示出組織病理學(xué)評估的前景建立和完善，在過去的20年中，通過全面的體外研究參與水平，拉曼光譜的準確診斷能力已經(jīng)積累了大量的證據(jù)大型。
拉曼光譜具有以下優(yōu)勢：
• 高特異性： 拉曼光譜對分子的特異性非常高，可以準確識別不同生物分子明確相關要求，有助于對腫瘤組織和正常組織進行區(qū)分重要意義。
• 非侵入性： 拉曼光譜無需破壞樣品，是一種非侵入性的檢測方法深化涉外，可以在活體組織中進行體系。
• 實時性： 拉曼光譜提供實時的分子信息，可以用于實時監(jiān)測手術(shù)中組織的生物化學(xué)變化參與能力。
• 化學(xué)多樣性： 拉曼光譜可以同時檢測多種生物分子合理需求，包括蛋白質(zhì)、核酸充分發揮、脂質(zhì)等高質量，提供了對生物組織化學(xué)構(gòu)成的全面了解。
• 無需標(biāo)記： 拉曼光譜無需對樣品進行標(biāo)記選擇適用，避免了對生物體的額外處理管理，簡化了實驗流程設計。
• 對水不敏感：水的拉曼信號較弱，所以細胞可以在水環(huán)境中成像改進措施，這意味著活細胞成像是可能的.
傳統(tǒng)的基于拉曼光譜的腫瘤診斷方法有體內(nèi)診斷和體外診斷提供堅實支撐。體外診斷通常采集腫瘤組織或癌細胞系、血液或血液成分高產、腫瘤標(biāo)志物（CTC）等原材料進行拉曼光譜數(shù)據(jù)的采集，采集到的數(shù)據(jù)多采用主成分分析－線性判別分析（ＰＣＡ－ＬＤＡ）等多變量統(tǒng)計分析方法來分析發揮作用，著力尋找正常樣本以及不同分期的癌變樣本之間的光譜差異良好，從而實現(xiàn)對不同腫瘤的診斷，根據(jù)文獻報道銘記囑托，已經(jīng)可以通過拉曼光譜診斷出不通過部位的惡性腫瘤（癌癥）引領，如膀胱癌，腦癌示範、肺癌應用前景、食管癌等；但是這種光譜差異往往不是很明顯運行好，只通過操作人員的經(jīng)驗很難進行腫瘤的分期判別首次；人工智能的機器學(xué)習(xí)算法引入，通過大量的數(shù)據(jù)訓(xùn)練部署安排，讓算法自動尋找差異并且判別是未來發(fā)展的趨勢搖籃。常規(guī)的體外診斷一般可以采用顯微共焦拉曼來進行測試，根據(jù)樣品的不同選擇合適的激發(fā)波長即可推廣開來。
相比于體外診斷推動，利用拉曼探頭進行體內(nèi)診斷的難度更大；主要體現(xiàn)在：
1. 體內(nèi)環(huán)境比較復(fù)雜資源配置，對探頭的要求較高信息，需要一定的耐腐蝕設(shè)計；
2. 由于信號較弱特性，并且信號需要通過光纖的形式輸出到光譜儀中傳承，對探頭的收光能力要求較高；
3. 由于探頭的收光能力一般比顯微系統(tǒng)中物鏡的收光能力差更加完善，所以對后端光譜儀的通光能力要求非常高形式。
4. 跟內(nèi)窺鏡結(jié)合一般要求實時得到數(shù)據(jù)并且跟數(shù)據(jù)庫進行比對，給出組織的風(fēng)險等級支撐作用，以便給操作人員對應(yīng)的指導(dǎo)日漸深入。
雖然困難重重，但是科研人員依舊取得了不錯的進展同時。
案例1：巴*特食管是食管腺癌的前兆互動式宣講，早期識別異型增生等高危病變對于提高患者生存率至關(guān)重要效高性。用于診斷BE異型增生的傳統(tǒng)內(nèi)窺鏡檢查受到診斷準確性差和需要大量活檢取樣的限制，導(dǎo)致高昂的醫(yī)療成本和患者負擔(dān)自動化。在新加坡進行的研究涉及從373名具有不同組織學(xué)亞型的上消化道患者身上獲取體內(nèi)組織拉曼光譜提升，從而構(gòu)建了一個用于診斷BE異型增生的綜合拉曼庫，該系統(tǒng)允許在內(nèi)窺鏡檢查期間進行實時不折不扣、無創(chuàng)或微創(chuàng)光學(xué)活檢支撐能力，以更高的精度針對高風(fēng)險組織區(qū)域[2]。
圖1 實驗裝置示意圖
案例2：炎癥性腸哺咝Ю?。↖BD）影響著全球大量個體特征更加明顯，區(qū)分潰瘍性結(jié)腸炎（UC）和克羅恩病（CD） 缺乏金標(biāo)準講理論。研究人員介紹了一項使用拉曼光譜對炎癥性腸病 （IBD） 進行臨床表征的研究的可能性，重點關(guān)注潰瘍性結(jié)腸炎（UC） 和克羅恩病（CD）服務為一體。使用基于結(jié)腸鏡耦合光纖探針的拉曼光譜進行了一項體內(nèi)研究問題，以識別UC和CD的光譜特征。通過使用統(tǒng)計技術(shù)分析收集到的光譜全會精神，他們開發(fā)了一種預(yù)測算法系統穩定性，在區(qū)分CD方面實現(xiàn)了90%的靈敏度和75%的特異性[3]。
圖2 實驗裝置示意圖
案例3：如果在手術(shù)過程中沒有檢測到所有的癌細胞先進技術，手術(shù)作為-種癌癥治療的有效性就會降低培訓，從而導(dǎo)致復(fù)發(fā)，對生存產(chǎn)生負面影響宣講手段。為了在癌癥手術(shù)中最大限度地檢測癌細胞分析，研究人員設(shè)計了一種術(shù)中原位、無標(biāo)記全面闡釋、光學(xué)癌癥檢測系統(tǒng)非常激烈，該系統(tǒng)結(jié)合了固有熒光光譜、漫反射光譜和拉曼光譜引人註目。使用這種多模態(tài)光學(xué)癌癥檢測系統(tǒng)領域，我們發(fā)現(xiàn)腦癌、肺癌好宣講、結(jié)腸癌和皮膚癌可以在手術(shù)中原位檢測註入新的動力，其準確性、靈敏度和特異性分別為97%、100%和93%雙重提升。這種高靈敏度的光學(xué)分子成像方法可以深刻地影響廣泛的外科和無創(chuàng)介入腫瘤學(xué)的范圍程序，通過提高癌癥檢測能力事關全面，從而減輕癌癥負擔(dān)表現明顯更佳，提高生存率和質(zhì)量生活[4]狀態。
圖3 多模態(tài)光譜檢測系統(tǒng)
卓立漢光可以提供體外顯微共聚焦拉曼光譜儀， 也能提供醫(yī)用內(nèi)窺拉曼光譜儀指導。
1. 顯微共聚焦拉曼光譜儀 finder930廣泛認同。
Finder930全自動化拉曼光譜儀在卓立經(jīng)典的共聚焦拉曼光譜儀的基礎(chǔ)上，新增了多種全新技術(shù)流動性，非常適用于體外的組織拉曼成像診斷測試：
1) 采用針孔共聚焦設(shè)計鍛造，空間分辨達到500nm，軸向分辨<1um持續創新，極大程度抑制了非共聚焦點外的熒光或者其他背景干擾逐漸完善；
2) 引入了高精度的自動化電動控制系統(tǒng)，智能控制激光切換合理需求、激光功率、共焦針孔大小充分發揮，使設(shè)備更加智能高質量，操作更加簡單；
3) 嚴苛的溫度和時間穩(wěn)定性測試標(biāo)準選擇適用，讓設(shè)備穩(wěn)定性大幅提升管理，開機即用，無需專人維護業務指導。
2. 醫(yī)用內(nèi)窺拉曼光譜儀
醫(yī)用拉曼光譜儀基于我們獨*代理的EMVISION 的內(nèi)窺拉曼探頭覆蓋範圍，結(jié)合自主研發(fā)的透射光譜儀和科研級制冷型CCD，超大的光通量可以保證盡可能的信號損失積極性，超高的靈敏度可以保證*高的信噪比奮勇向前，光纖耦合，易于與內(nèi)窺鏡結(jié)合使用實施體系。
拉曼光譜儀 | • 光譜儀結(jié)構(gòu)：VPH透射光柵光譜儀 • 激光激發(fā)波長：785 nm • 拉曼頻移范圍：350 cm-1 to 2,400 cm-1 • 光譜儀入口狹縫：10um-6mm可調(diào) • 光譜儀F/#通光口徑：f/2.3 • 光譜儀分辨率：優(yōu)于5cm-1 • 光譜儀接口：SMA/MPO/10mm圓柱 |
光譜CCD | • 具有高像元分辨率的CCD芯片組建，分辨率≥2000x256 • 可見近紅外拉曼專用CCD，量子效率在700nm-870nm區(qū)間處>90%效果較好， • 深制冷溫度至-60C • 讀出噪聲< 5電子/像元 |
光纖拉曼探頭
| • 高靈敏度光纖探頭（內(nèi)窺版本） • Y型光纖重要的意義，分為激光端，光譜儀端和樣品端等多個領域。醫(yī)用尼龍包層再獲，可直接用于皮膚，腦組織等生物樣品拉曼檢測應用擴展。 • 激光端：FC/PC光纖接口體驗區，300um芯徑光纖，單芯 • 光譜儀端：專*Snap-in即插即用接口進一步意見，300um芯徑光纖增幅最大，6芯共享應用，排成一行 • 樣品端：探頭尾部直徑<2.1mm，金屬部分長度6.5mm • 樣品端包含785的干涉濾光片標準，785的高通濾光片示範推廣，微透鏡，焦距500um • 光纖總長度3米 |
光纖拉曼探頭
| • 高靈敏度光纖探頭(非內(nèi)窺版本) • Y型光纖即將展開，分為激光端大幅增加，光譜儀端和樣品端。醫(yī)用尼龍包層傳承，可直接用于皮膚等特點，腦組織等生物樣品拉曼檢測。 • 激光端:FC/PC光纖接口多種，300um芯徑光纖將進一步，單芯 • 光譜儀端:專*即插即用接口，300um芯徑光纖發展成就，6芯成就，排成一行樣品端:手持部分約 100mm，探頭尾部直徑<2.1mm關註。 • 樣品端包含 785 的干涉濾光片研究進展，785 的高通濾光片，微透鏡連日來，焦距 500um快速融入。 • 光纖總長度3米 |
激光器 | • 光纖激光器，785nm系統，350mW增強，F(xiàn)C-PC接口，<0.15nm帶寬 |
3. Finder Insight Pro 系列小型激光拉曼光譜儀
Finder Insight Pro 系列小型激光拉曼光譜儀是經(jīng)過性能優(yōu)化的一款小型化的研究級拉曼光譜儀交流等，它采用了科研級高靈敏度檢測器和大通光量的分光系統(tǒng)置之不顧，可選配96孔測試板，配合軟件進行全自動測量操作數字化。
1) 單點測量與順序測量方便，單譜采集、連續(xù)采集各領域、間隔采集等模式應用領域，用戶自由選擇；
2) 可選配數(shù)據(jù)庫進行培訓，進行未知樣品比對測量發展機遇；
3) 內(nèi)置電池，小巧輕便，可便攜攜帶全技術方案；
參考文獻：
[1]Qi Yafeng, Liu Yuhong, Liu Dameng. Research Progress on Application of Raman Spectroscopy in Tumor Diagnosis[J]. Laser & Optoelectronics Progress, 2020, 57(22): 220001
[2]Lambert JE, Ramos-Roman MA, Browning JD, Parks EJ. Increased de novo lipogenesis is a distinct characteristic of individuals with nonalcoholic fatty liver disease. Gastroenterology. 2014 Mar;146(3):726-35. doi: 10.1053/j.gastro.2013.11.049. Epub 2013 Dec 4.
[3]Li Y, Jing J, Qu Y, Miao Y, Zhang B, Ma T, Yu M, Zhou Q, Chen Z. Fully integrated optical coherence tomography, ultrasound, and indocyanine green-based fluorescence tri-modality system for intravascular imaging. Biomed Opt Express. 2017 Jan 24;8(2):1036-1044.
[4]Michael Jermyn, Jeanne Mercier, Kelly Aubertin, Joannie Desroches, Kirk Urmey, Jason Karamchandiani, Eric Marple, Marie-Christine Guiot, Frederic Leblond, Kevin Petrecca; Highly Accurate Detection of Cancer In Situ with Intraoperative, Label-Free, Multimodal Optical Spectroscopy. Cancer Res 15 July 2017; 77 (14): 3942–3950.
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