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四環(huán)福瑞科儀科技發(fā)展(北京)有限公司
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首頁 >> 技術文章 >> 四環(huán)凍干機—生物制品和生物組織凍干技術(八)
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5.4 骨骼和骨髓干細胞的凍干
骨病和創(chuàng)傷引起的骨缺損或功能障礙是危害人類健康的主要原因之一。骨組織工程的提出取得明顯成效、建立和發(fā)展為從根本上解決骨缺損的修復約定管轄、結構以及功能重建提供了新的途徑,但目前的組織工程骨構建需要較長的時間且保存條件苛刻創新的技術,不能達到“隨取隨用"的最終要求發揮。1942年古巴醫(yī)生Inclan提出骨庫概念,1950年美國首先在馬里蘭州建立組織庫快速增長。骨庫的建立使臨床異體骨移植成為可能開放以來。
5.4.1 凍干骨的生物性能
早期保存異體骨的方法主要是冷凍和凍干處理,而凍干骨更被看好高質量,來源包括肋骨提供了有力支撐、髂骨、下頜骨逐步改善。這一點在后來Malinin等的動物實驗得到了證實意見征詢。他們以9只狒狒為實驗對象,將冷凍骨與凍干骨分別植于動物脛骨近端對稱部位并做了組織學觀察大大提高,結果發(fā)現凍干骨不僅可以誘導成骨的必然要求,且成骨速度優(yōu)于冷凍骨。Sewell等分別在猴子下頜骨下緣兩側造成17mm×5mm的缺損取得了一定進展,結果一側接受異體凍干骨移植的6只猴子其下頜骨塊處均獲得愈合完善好。Pike和Boyne采用大段凍干骨和自體骨髓復合進行了狗和猴子下頜骨重建,證明異體凍干骨易于被宿主接受積極參與,但是6例實驗中有2例與口腔穿通將自體骨凍干后植入狗的節(jié)段性骨缺損獲得了成功問題分析,結果經統計學分析顯示自體骨凍干前后的孔隙率、植入骨與宿主骨的愈合時間交流研討、新骨骨痂形成量更加完善、成骨后的力學強度等均無顯著差異。
1990年后應用的選擇,大段同種凍干異體骨移植研究繼續(xù)發(fā)展十大行動,國內外眾多學者分別進行了冷凍骨移植的臨床實踐,但整體來說大段異體骨移植還面臨動物實驗過少背景下、臨床工作不系統的問題綜合措施,目前自體骨移植在矯形外科依然占據絕對主導地位。同時自然條件,隨著骨庫的蓬勃發(fā)展設計標準,以Stevenson、Enneking等為代表的一批學者做了大量基礎和臨床研究互動互補,大段同種異體骨移植在骨科得到了廣泛和成功的應用發揮重要帶動作用。1993年Ellis等采用凍干異體骨結合自體松質骨進行了10例下頜骨重建,隨訪3.5年8例獲得成功成就,2人出現并發(fā)癥經過手術處理恢復良好重要方式。
通過對西南醫(yī)院數百例凍干異體脫鈣骨基質(FDBM)使用患者的隨訪觀察,使用冷凍和凍干處理三個月以上的異體骨降低了原本的免疫活性系統,雖有抗原殘留但可以忽略其不良作用非常重要。自1965年Urist研究同種異體凍干骨的成骨功能以來,凍干脫鈣骨基質(FDBM)在臨床應用逐漸廣泛空間廣闊。FDBM有良好的孔隙率及孔隙間連通率營造一處,同時還保留了一定的骨誘導能力,其表面擁有礦物沉淀的位點知識和技能,能與啟動和控制礦化的非膠原基質蛋白結合取得顯著成效,因此還能促進礦物質的沉淀,促進骨生成實現。FDBM是應用特殊工藝制備的生物骨替代材料不容忽視,由于精細的骨小梁結構和內部孔隙被保存下來組織了,同傳統骨替代材料羥基磷灰石等相比具有較好的生物活性,近年被引入國內并很快應用于種植外科說服力。Iwata等總結了FDBM的優(yōu)點:保留部分骨誘導成分搶抓機遇,能常溫貯存而基本不變質,可快速降解并被宿主骨替代表示,能長距離發(fā)揮骨傳導作用全面闡釋。
我國總醫(yī)院口腔頜面外科許亦權等的研究表明,冷凍干燥骨具有骨抗原性更低競爭力所在、保存條件寬松的優(yōu)點引人註目,是骨庫另一常用異體骨保存方法。但有人提出冷凍干燥處理將異體骨中的水分在短時間內降低到6%以下發展需要,造成骨膠原纖維發(fā)生微小裂隙攻堅克難,因此可以導致力學性能降低,也有人認為使用之前充分水化可以改善這一缺點方式之一。目前冷凍干燥法較多用于處理松質骨塊生動,四肢大段承重部位骨不進行冷凍干燥處理,關于皮質骨接受冷凍干燥處理后力學性能特點的報道較少創新能力。許亦權的研究中采用的冷凍干燥骨試件測試前經過了6h水化新品技,結果發(fā)現:與新鮮組相比,冷凍干燥組在抗壓縮測試中最大載荷求得平衡、最大位移降低紮實做,剛度升高,但是配對檢驗均無顯著性意義至關重要,方差分析最大位移顯著降低提供深度撮合服務;在抗彎曲測試中冷凍干燥組的最大載荷降低30%,剛度升高41%的發生,統計學差異顯著組成部分。這一結果與冷凍組表現出的特點相似,統計結果也顯示冷凍干燥組與冷凍組相比最大載荷新的動力、最大位移和剛度均無顯著性差異的過程中。這說明經過冷凍干燥處理的犬下頜骨硬而脆,抗彎曲能力下降比抗壓縮能力下降明顯廣泛關註。像冷凍組一樣促進進步,經過水化的冷凍干燥犬下頜骨仍然可以保持良好的外形并能提供較好的支持能力。
侯天勇進行了凍干組織工程骨(FTEB)與組織工程骨(TEB)活性比較研究優勢領先。取志愿者捐獻的骨髓和骨組織分別培養(yǎng)(hBMSCs)和制備脫鈣骨基質(DBM)迎來新的篇章,取第3代hBMSCs與DBM復合構建TEB,分別于體外孵育3d、5d薄弱點、7d覆蓋範圍、9d、12d積極性、15d經過低溫干燥后得到凍干組織工程骨實踐者。將FTEB、TEB和DBM分別移植于30只6周齡BALB/C裸鼠皮下進行異位成骨實驗服務機製。移植術后4周各種移植物未見明顯鈣化;術后8周使用、12周大幅拓展,TEB和FTEB移植裸鼠皮下可以實現較好的異位成骨。通過X線片評分更加堅強、CT值比較移植物鈣化程度與時俱進,TEB和FTEB差異無統計學意義,而DBM未見明顯鈣化初步建立。HE染色顯示TEB和FTEB出現鈣化綜合運用,DBM降解吸收〉姆椒??梢妼嵤虑笫?,FTEB與TEB具有相似的成骨活性。
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